制备色谱技术与操作（三）
12 问：分析HPLC如何放大到制备型HPLC？在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级，甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:10000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积（小于1:100）。 在这种条件下，会达到很好的分离效果，峰形尖锐并且很对称。分析系统线形放大到制备型HPLC意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品，但这种方法从经济上一般不合适。在制备液相中，最大的区别就是超量进样。制备的分离峰形一般不可能仍会保持尖锐而对称，分析和制备是不同的概念。制备的首要概念是在达到纯化的基础上，降低成本，加快时间（提高效率）。一般说来，纯化的成本要高于生产粗产品的成本，所以，可以加大上样量，甚至过载，出现平头峰，而收集只集中在峰的一小部分，以来保证纯度，主要为了节省流动相和提高设备利用率。13 ......阅读全文
液相色谱仪色谱柱填料选择
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。而对于液相色谱而言，色谱填料的选择有时候恰恰决定了样品分析效果的好快。今天小编就围绕常见的色谱填料种类，讲解一下，应该如何针对仪器使用环境对色谱填料进行合适的选择。 硅胶填料
半制备色谱和制备色谱的区别
1.制备与半制备的差异是流速与色谱柱；半制备一般会选择直径为10mm的色谱柱；而制备选择的是直径为20的色谱柱；同样，流速也会相应提升，半制备的流速一般为1.0ml/min，而制备一般会设置为8ml/min。液相色谱仪有分析型以及制备型，分析型一般用来分析多个化学成分，可以进行定性以及定量，而制备型
液相色谱柱的色谱柱再生
液相色谱柱的色谱柱再生 液相柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降，需要定期进行彻底清洗和再生。 1、反相柱 分别用甲醇：水＝90：10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次
柱色谱和薄层色谱有什么异同
1、方法不同柱色谱又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前
液相色谱仪之色谱柱结构
液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝（封头）与柱填料等组成。柱管：多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度，用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的
正相色谱和反相色谱的区别
在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基（-CN）、氨基（-NH2）、二醇基（DIOL）键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂（如醇、乙腈等），以调节流动相的洗脱
液相色谱仪色谱柱柱填料
液相色谱柱装填的固定相，其基体材料多为粒度5~10µm或3~5µm的全多孔球形或无定形硅胶。以后又发展了无机氧化物基体（如三氧化二铝、二氧化钛、二氧化皓、三氧化钨）、高分子聚合物基体（如苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球，丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯的聚合物微球）和脲醛树脂微球，它们多为3~10µm的全多孔微球
常用的色谱方法（吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(1)
按色谱分离的机理来分，常用的色谱方法可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱和亲合色谱。一、吸附色谱(adsorption chromatography)吸附色谱是指混合物随流动相通过由吸附剂组成的固定相时，由于吸附剂对不同组分有不同的吸附力，从而不同组分随流动相移动的速度不同，最终可将混合
色谱柱是色谱仪最重要的部件色谱柱的介绍
色谱柱是色谱仪最重要的部件（心脏）。通常用厚壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的，对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时，可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。柱子内径一般为1～6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm ，长度为15 ～30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5 ～10μm ，柱效以
常用的色谱方法（吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(3)
(二)凝胶 凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体颗粒状物质，其内部都具有很微细的多孔网状结构。目前市场上供应的色谱用凝胶主要有交联葡凝聚糖、交联聚丙稀酰胺以及琼脂糖等。 交联葡聚糖，瑞典出品商品名称为Sephadex，国产商品名称为Dextran，它是由葡聚糖(右旋糖苷)和甘油通过醚桥
常用的色谱方法（吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色...(2)
常用离子交换剂的类型见表2-1 表2-1 常用的离子交换剂的种类及解离基团 种类 解离基团 阳离子交换树脂 强酸型 弱酸型
做气相色谱和液相色谱时怎么样选择色谱柱
气相色谱柱选择：柱长：增加柱长可提高分离效果。但柱长过长，使分析时间延长。所以在满足一定分离度的条件下，应选用尽可能短的色谱柱。填充柱的柱内径一般为 3~6 mm，毛细管柱的内径0.1~0.5 mm。固定液的用量选择：担体的表面积较大时，固定液用量可多些，允许的进样量也相应增加。但从速率方程式的传质
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响..
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响因素一、凝胶过滤色谱：一般来说，凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效（每米多少理论塔板数），而影响柱效的因素主要有：1、凝胶本身性质：每一种凝胶均有其合适的分离范围，应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的，柱效越高。2、色谱柱
色谱塔板理论和色谱速率理论在色谱研究中的优缺点
塔板理论是基于热力学近似的理论，虽然能很好地解释色谱峰的峰型、峰高，客观地评价色谱柱地柱效，却不能很好地解释与动力学过程相关的一些现象。如色谱峰峰型的变形、理论塔板数与流动相流速的关系等。而速率理论是从动力学方面考虑的，和塔板理论可以互补。因此在色谱研究领域这两个理论是非常有用的。
高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点
高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点 ：与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外，液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用，而且与固定相一
离子色谱仪色谱泵系统介绍
色谱泵系统： 1、材质： 离子色谱的淋洗液为酸、碱溶液，与金属接触会对其产生化学腐蚀。如果选择不锈钢泵头，腐蚀会导致色谱泵漏液、流量稳定性差和色谱柱寿命缩短等。离子色谱泵头应选择全PEEK材质（色谱柱正常使用压力一般小于20MPa）。 2、类型： （1）单柱塞泵。 （2）双柱塞泵：
色谱仪的色谱流出曲线与基线
一、色谱仪的色谱流出曲线：是由色谱仪检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线，又称为色谱图。二、色谱仪的色谱基线：1、基线：仅有纯流动相通过色谱柱时的流出曲线。在稳定的条件下应是一条水平的直线。2、基线噪声：在没有样品进入检测器时，一定时间内基线发生起伏的信号。3、基线漂移：基线随时间定向的缓慢
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱，连接于仪器上后，应先试压，试漏，而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析，一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂，低沸点杂质，低分子量固定液等赶走，使记录器基线平直，并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程，从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会
液相色谱仪的色谱柱的安装
a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保护柱)；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0
液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱，连接于仪器上后，应先试压，试漏，而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析，一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂，低沸点杂质，低分子量固定液等赶走，使记录器基线平直，并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程，从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱，连接于仪器上后，应先试压，试漏，而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析，一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂，低沸点杂质，低分子量固定液等赶走，使记录器基线平直，并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程，从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
气相色谱法色谱柱的选择
气相色谱法色谱柱的选择柱温与温度控制程序一个已经拆开以显示出内部毛细管柱的气相色谱仪恒温箱气相色谱仪中的色谱柱放置于温度由电子电路精确控制的恒温箱内。（当分析者说“柱温”时，他实际上指的是恒温箱的温度。不过这种区别并不重要，因此在下文中对这两者并不作区分。）样品通过色谱柱的速率与温度正相关。柱温越高
液相色谱仪色谱柱的分离条件
多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围，但具体应用又受到限制，主要是pH值、柱温和流动相的选择。 传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间，极端pH值的流动相能“溶解”硅胶，使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少，碱性组分的保留增加，引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相
气相色谱的色谱柱通常如何老化
装填好的色谱柱，连接于仪器上后，应先试压，试漏，而后在恒定的温度下用载气吹洗数时后承受分析，一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂，低沸点杂质，低分子量固定液等赶走，使记录器基线平直，并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程，从而涂得更加均匀牢固。一般在使用过长要是不会老化
高效液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下，高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用3～6个月，能完成数百次分离。但若操作不慎，将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性，必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护： 1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。 2、加3～5cm保护柱。 3、
液相色谱仪对色谱条件的要求
色谱条件一般包括流动相、色谱柱、检测波长、流速及进样量。流动相就涉及到配制流动相所用到的水和试剂试液，水一般要求用超纯水或其他水的电阻率不大于18.2兆欧级别，试剂试液要求用色谱级别的，原因为防止水和试剂试液中的杂质对色谱结果的干扰。色谱柱会因不同的品种而有不同的要求，但每根色谱柱都有它的清洗要求，
液相色谱仪色谱柱使用及维护
液相色谱仪色谱柱使用及维护使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见下图） 3
纸色谱法所需色谱纸的选择
对Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸对Rf值相差较大的化合物，则可用快速滤纸
液相色谱仪色谱相关术语实验溶液
试验溶液(test solution)已知其成分,用以对仪器进行试验的溶液。