制备色谱技术与操作(三)

12 问:分析HPLC如何放大到制备型HPLC?在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级,甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:10000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积(小于1:100)。 在这种条件下,会达到很好的分离效果,峰形尖锐并且很对称。分析系统线形放大到制备型HPLC意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品,但这种方法从经济上一般不合适。在制备液相中,最大的区别就是超量进样。制备的分离峰形一般不可能仍会保持尖锐而对称,分析和制备是不同的概念。制备的首要概念是在达到纯化的基础上,降低成本,加快时间(提高效率)。一般说来,纯化的成本要高于生产粗产品的成本,所以,可以加大上样量,甚至过载,出现平头峰,而收集只集中在峰的一小部分,以来保证纯度,主要为了节省流动相和提高设备利用率。13 ......阅读全文

凝胶色谱柱

分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子

反相色谱介绍

反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式.反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于

色谱技术基础

色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液

薄层色谱知识

薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发

凝胶色谱讲义

第一章  前言一、高聚物及多糖平均分子量及其分布1、高聚物的平均分子量除天然聚合物外,合成聚合物都是以单体为原料经过聚合反应而制得的。每个聚合物分子都是由数目很大的单体分子加成或缩合而成,所以合成聚合物的分子量比单体要大千百倍甚至成万倍。另一方面,根据绝大多数的聚合反应机理预示,生成的聚合物的分子量

分配色谱

分配色谱(partition chromatography)原理: 主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同(分配作用)而实现分离的液相色谱分离模式。键合固定相: 分配色谱原本是基于样品分子在包覆于惰性载体(基质)上的固定相液体和流动相液体之间的分配平衡的色谱方法,因此也称液-液分

色谱技术基础

色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液

RRHD色谱柱

图1.  RRHD在1000 bar以上的压力下,连续进样5000针,表现出极好的稳定性。 创新点: 作为全球第一家生产亚二微米填料色谱柱的厂家,安捷伦在2002年推出RRHT的基础上,于2009年进一步研发出耐压可达到1200bar的色谱柱RRHD (Rapid Resol

色谱的定义

色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。

色谱标准物质

用于气相色谱的定性、定量依据的标准物质,称为色谱标准物( GCS ),简称色标,纯度高无杂质峰。可用于一般色谱保留值、校正因子的测定,也可用色谱科学研究中较精确的保留值和校正因子、及色谱常数的测定。

色谱芯介绍

导读点石成金的神话故事源远流长,人们向往一种神奇力量可以把自然界极为普通和丰富的石头变成昂贵而稀有的金子以期改变贫穷的困境。但只要学过一点化学知识的人都知道,石头主要是由二氧化硅组成,而硅元素是不可能变成金元素,因此点石成金也只能存在于虚构的故事中。但现代的科学家把石头组份变成比金子还贵的高科技产品

反相色谱RPC

   反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。   在 HPLC系统

什么是色谱

谱仪色谱法从二十bai世纪初发明以来,经历了整整du一个世纪的发zhi展到今天已经成为最重要的分离分析科学,dao广泛地应用于许多领域,如石油化工、有机合成、生理生化、医药卫生、环境保护,乃至空间探索等。将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,随着溶液的展开可以观察到一个个同心圆环出现,这种层

凝胶色谱柱

凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分

凝胶色谱(图)

原理: 以多孔性物质作固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力(吸附、分配和离子交换等),因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱

色谱参考条件

色谱参考条件色谱柱:固定液100%二氰丙基聚硅氧烷,100m×0.25mm,0.20um,或性能相当的色谱柱。载气:氮气。载气流速:1.0mL/min。进样口温度:260℃。分流比:30:1。检测器温度:280℃。柱温箱温度:初始温度140℃,保持5min,以4℃/min升温至240℃,保持15mi

色谱技术基础

色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相

柱色谱概述

(一)原理及基本装置液相色谱中的柱色谱法又称柱层析法,既可以用比较复杂的装置,也可以用简单的设备。用一根适宜的柱子,一个洗脱装置,一个流量控制装置(蠕动泵),一个紫外检测仪和一个部分收集器就可以构成最基本的分离装置。色谱柱是整个过程的心脏,在使用时必须满足下述要求:(1)柱底应有一凝胶的支持层,该支

离子色谱简介

一、色谱的发展历史 色谱(chromatography)是一种分离的技术,随着现代化学技术的发展应运而生。20世纪初在俄国的波兰植物化学家茨维特(Twseet)首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中,植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同,因此在玻璃管中呈现出不同的颜色,这样就可以对各种不同的

色谱分离技术

分离技术毛细管电泳是以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组份之间电泳程度或分配行为的差异而实现分离的液相分离技术,具有所需样品量小、柱效高、分析速度快、绿色环保等优点,对于带电荷药物的分离有相当的优势。色谱法毛细管电色谱则是集合了高效液相选择性色谱分离以及毛细管电泳高柱效的优势,是近

快速色谱技术

快速色谱法(Flash chromatography)是制备液相色谱中法中的一种,通常用于有机化合物的分离。快速色谱法具有操作容易、价格便宜、分析快速的优点,在纯化有机化合物应用方面,几乎没有其它技术可以和快速色谱法相媲美。快速色谱法已成为通过纯化进行正相分离的通用方法。快速色谱法是一项典型的低

色谱类仪器

色谱类仪器:离子色谱仪:气相色谱仪高压液相色谱仪气相色谱—质谱联机液相色谱—质谱联机色谱—富里埃红外光谱联机

StableBond-色谱柱

  图1.  StableBond-C18在流动相(pH=0.8)及柱温为80℃的条件下,表现出卓越的稳定性。 安捷伦于1990年推出StableBond 色谱柱,价格4000~6000元,平均使用寿命3000次进样。 最大特点:ZL的键合技术为键合相提供了空间保护作用,使得该色谱柱键

凝胶过滤色谱

根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

反相色谱柱

 反相色谱柱

色谱保留值

色谱保留值 :  色谱保留值是色谱定性分析的依据,它体现了各待测组分在色谱柱上的滞留情况。在固定相中溶解性能越好,或与固定相的吸附性能越强的组分,在柱中的滞留时间越长,或者说将组分带出色谱柱所需的流动相体积越大。所以保留值可以用保留时间和保留体积两套参数来描述。

薄层色谱简介

  薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高

色谱柱分类

1、非极性100%Dimethylpolysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷产品牌号:AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-12、弱极性5%Phenyl dimethylpolysiloxane, 5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷产品牌号:AC5,

色谱试剂用途

色谱试剂用途广泛,凡用到高压液相色谱仪器的单位,如工厂、学校、医院、质检部门、商检部门、环保部门、石化行业、药业部门每天都用到大量的色谱淋洗剂。乙腈Acetonitrile HPLC级4×4L甲醇Methanol HPLC级4×4L四氢呋喃Tetrahydrofuran HPLC 级4×4L 乙酸乙

色谱标准物质

用于气相色谱的定性、定量依据的标准物质,称为色谱标准物( GCS ),简称色标,纯度高无杂质峰。我所生产的色标有 200 多种,含量均在 99.5-99.99 ﹪之间,水分含量均≤ 0.05 ﹪。可用于一般色谱保留值、校正因子的测定,也可用色谱科学研究中较精确的保留值和校正因子、及色谱常数的测定。既