液液色谱原理简介
色谱法按 流动相和固定相的物态分类时,流动相和固定相均为液体的方法称为液液色谱法、液体固定相与流动相溶,通常渍在惰性载体仁使用液液色谱法的分离机制通常为溶解作用。故属于分配色谱法。 使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。 涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。 液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇......阅读全文
液液色谱法的基本原理
液液色谱法按流动相和固定相的物态分类时,流动相和固定相均为液体的 方法称为液液色谱法、液体固定相与流动相不溶,通常涂渍在惰性载体仁使用。液液色谱法的分离机制通常为溶解作用,属于分配色谱法。 使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相
高校液相色谱分离原理
分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离,分离过程是一个分配平衡过程。高效液相色谱主要有4种,下面分别描述一下。1、液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强,K值越大保留时间越长。2、液-液分配色谱。顾名思义,它是将固定液涂在担
气液相色谱的原理
高效液相色谱法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气相色谱在基本理论
气液相色谱的原理
高效液相色谱法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气相色谱在基本理论
液液分配色谱仪的固定相简介
液液分配色谱仪的固定相由惰性载体和涂渍在惰性载体上的固定液组成。一、惰性载体:惰性载体主要是固体吸附剂,如全多孔球形微粒硅胶、无定形微粒硅胶和全多孔氧化铝等。二、固定液:1、正相分配色谱常用固定液:(1)β,β′-氧二丙腈(2)1,2,3-三(2-氰乙氧基)丙烷(3)聚乙二醇400(4)聚乙二醇60
液相色谱柱的分类简介
1、正相色谱柱:固定相极性大于流动相一般指硅胶柱,以正己烷系列为流动相。2、反相色谱柱:固定相极性小于流动相,其技术就是在硅胶基质上键合有机碳链。一般指C18、C8、苯基柱等,以甲醇、乙腈、水为流动相。目前用的最多的色谱柱是反相色谱柱反相色谱柱填料合成技术用四乙氧基硅烷脱乙基聚合成硅胶,并脱去表面的
液固吸附色谱仪简介
液固吸附色谱仪是以固体吸附剂作为固定相的高效液相色谱仪,根据样品组分在固定相上吸附作用的不同进行分离。一、分离原理:当流动相通过固定相(固体吸附剂)时,吸附剂表面的活性中心吸附流动相溶剂分子。当样品分子被流动相带入色谱柱后,只要它们在固定相上有一定程度的保留就要取代数目相当的已被吸附的溶剂分子。样品
简介液相色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤: a. 平衡开始时将流
液固吸附色谱仪简介
液固吸附色谱仪是以固体吸附剂作为固定相的液相色谱仪,根据样品组分在固定相上吸附作用的不同进行分离。一、分离原理:当流动相通过固定相(固体吸附剂)时,吸附剂表面的活性中心吸附流动相溶剂分子。当样品分子被流动相带入色谱柱后,只要它们在固定相上有一定程度的保留就要取代数目相当的已被吸附的溶剂分子。样品分子
UPLC(超高效液相色谱)简介
超越HPLC 随着科学技术的进步,对液相色谱技术的要求也不断提高,单从技术角度的改进已经不行。这就需要同时从科学与技术的角度出发,或者说从理论高度对液相色谱重新认识。因此,UPLC(超高效液相色谱)概念得以提出,将HPLC的极限作为自己的起点。在1996年,Waters公司推出Alliance HP
快速蛋白液相色谱(FPLC)简介
FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统,FPLC为近年来的一项重要革新,其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来,其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展,有薄壳型填料和双扩
关于高效液相色谱的液—固分配原理介绍
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm式中:X
压力液位变送器的原理简介
压力式液位计采用静压测量原理,当液位变送器投入到被测液体中某一深度时,传感器迎液面受到的压力的同时,通过导气不锈钢将液体的压力引入到传感器的正压腔,再将液面上的大气压 Po 与传感器的负压腔相连,以抵消传感器背面的 Po ,使传感器测得压力为:ρ .g.H ,通过测取压力 P ,可以得到液位深度
反相高效液相色谱的原理
在反相液相色谱中,固定相的极性小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性,疏水性强的保留时间长!
液相色谱基本原理
液相色谱根据分离机理的不同可分为:☆液固吸附色谱☆液液分配色谱☆离子交换色谱☆离子对色谱法☆分子排阻色谱(或凝胶渗透色谱) (一)液-固吸附色谱流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据物质吸附作用的不同来分离物质。 (二)液-液分配色谱流动相和固定相都是液体的色谱法即为液-液色谱,是利用样品组分在两种
液相色谱柱的有关原理
与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。 色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构
液固色谱法技术原理
一. 原理 液-固色谱法” 是利用各组分在固定相上吸附能力的不同而将它们分离的方法。 当组分随着流动相通过色谱柱中的吸附剂时,组分分子及流动相分子对吸附剂表面的活性中心发生吸附竞争。组分分子对活性中心的竞争能力的大小决定了它们保留值的大小。被活性中心吸附越强的组分分子越不容易被流动相洗脱
液相色谱柱的有关原理
与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。 色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成
高效液相色谱原理是什么
高效液相色谱仪原理是在条件一定,样品浓度很低时时,K只取决于组分的性质,而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件,在这种条件下,得到的色谱峰为正常峰;在许多情况下,随着浓度的增大,K减小,这时色谱峰为拖尾峰;而有时随着溶质浓度增大,K也增大,这时色谱峰为前延峰。高效液相色谱仪器使用高效液相色谱法只要
液相色谱柱的有关原理
与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。 色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来
二维液相色谱原理
液相色谱仪由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作
液固吸附色谱法原理
液固吸附色谱法原理: 是以固体吸附剂为固定相,吸附剂表面的活性中心具有吸附能力,试样分子被流动相带入柱内时,它将与流动相溶剂分子在吸附剂表面发生竞争吸附。分离过程是一个吸附-解吸的平衡过程。
液相色谱柱的有关原理
与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。 色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成
二维液相色谱原理
液相色谱仪由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作
液液分配色谱
液-液分配色谱 (一)、分离原理 流动相与固定相为互不相溶的两种液体,组分既溶解于固定相,也溶解于流动相,根据在两相中溶解度的不同分配,相当于液--液萃取。在一定色谱条件下 (二)、固定相 在惰性载体表面涂敷或键合一层固定液薄膜,前者称涂层固定相,后者称键合固定相。由于固定液在流动相中的
高效液相色谱法液液分配的分离原理介绍
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱
液固吸附色谱仪简介-(二)
3、特点:(1)优点:1)有柱溶剂效应时,减小了溶剂峰拖尾,组分峰接近溶剂拖尾峰,组分峰变窄。2)不分流进样是高沸点痕量样品分析的方式。对于高沸点样品,不分流进样可以不考虑溶剂沸点,采用高的初始柱温以缩短分析时间。样品几乎(95%以上)全部进入色谱柱,比分流进样相应信号高1~3个数量级,特别适合稀释
液固吸附色谱仪简介-(三)
五、大口径毛细管柱直接进样系统:大口径毛细管柱直接进样是所有气化的样品都进入大口径毛细管柱的进样方式。大口径毛细管柱(0.53mm)具有和常规毛细管柱(<0.32mm)同样的惰性,但柱容量比常规毛细管柱大的多,柱效介于填充柱和常规毛细管柱之间。因此,对于不太复杂和热不稳定样品的分析十分有效。1、结构
液固吸附色谱仪简介-(一)
第三节 气相毛细管柱色谱仪进样系统 气相毛细管柱色谱仪与气相填充柱色谱仪相比,具有分离效率高、色谱峰窄而尖、化学惰性好和热稳定性好等特点,特别是键合固定相技术的发展使柱流失进一步减少,提高了仪器的信噪比,有利于降低检测下限。但毛细管柱内径很细,一般液膜厚度只有几微米,固定液只能以毫克计,一般柱容量比
液固吸附色谱仪简介-(七)
五、衬管:1、衬管作用:(1)防止隔垫碎片和不挥发性样品组分进入色谱柱,保护色谱柱不被污染。(2)玻璃衬管比不锈钢衬管活性小,可减少对样品的催化分解,基本消除活性对定性和定量分析的影响。(3)不同的进样方法选择不同结构、形状和规格的衬管,可提高气化效率,大大减小样品气化过程中的样品歧视。2、衬管设计