快速蛋白液相色谱(FPLC)简介
FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统,FPLC为近年来的一项重要革新,其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来,其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展,有薄壳型填料和双扩散灌流型填料两种新型填料出现了,对于分离大分子物质,它们的优越性独特,从而大大拓展了FPLC的应用领域。其能够进行蛋白的含量的测定以及蛋白的分子量的确定,能够分离纯化蛋白、有机化合物,所以其在生物学领域和化学领域的研究可以得到使用。 近些年以来,在HPLC基础上发展出了新型色谱技术,包括低压液相色谱(LPLC)、中压液相色谱(MPLC)以及快速蛋白液相色谱(FPLC),在这些新型色谱技术当中,快速蛋白液相色谱(FPLC)可以非常迅速地分离复杂混合物,能够在短时间内对大量样品加以纯化。其特性表现为较大的容量、较高的回收效率以及不易失活......阅读全文
快速蛋白液相色谱(FPLC)简介
FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统,FPLC为近年来的一项重要革新,其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来,其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展,有薄壳型填料和双扩
FPLC简介
FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与高效液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。FPLC是
快速制备液相色谱的特色功能简介
● 灵活的无线控制方式,尤其适用于需要避光或置于操作箱内运行分离实验的场景 ● 账户安全登录,通过128/256位AES数据加密存储并传输,保障数据安全 ● 内设独立的气泵模块,实验结束后自动吹扫管路和色谱柱的残留溶剂,防止溶剂浪费和不安全因素 ● 全自动智能液位实时监测 ● 带LCD显
液相色谱简介
什么是色谱? 色谱法是一种物理化学分析方法。它利用混合物中组分在两相间分配系数的差别,当溶质在两相间作相对移动时,各组分在两相间进行多次分配,从而使各组分得到分离。 2. 色谱的发展 色谱这一概念是由俄国植物学家Tswett(茨维特)1903提出的,他在一根细长的玻璃管中装入碳酸钙粉末,然后将植物
HPLC与FPLC的异同
FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与GX液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。 近些年
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步zui关心的是流速和载量,常采用
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝
蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论
蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论快速蛋白液相色谱(FPLC)、中压液相色谱(MPLC)、低压液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及
高压液相色谱特点简介
高压 液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。 高速 流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1
教你快速了解制备型液相色谱
1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。 1.快速色谱 柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混合物,由于快速色谱具有操作简便、经济等优点,常常是实验室的。但快速
蛋白分离色谱与高压制备液相色谱的异同讨论
快速蛋白制备液相色谱(FPLC)、中压制备液相色谱(MPLC)、低压制备液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及药物生产上使用越来越广泛。
蛋白分离色谱与高压制备液相色谱的异同讨论
快速蛋白液相色谱(FPLC)、中压液相色谱(MPLC)、低压液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及药物生产上使用越来越广泛。(1)FP
液相色谱柱的分类简介
1、正相色谱柱:固定相极性大于流动相一般指硅胶柱,以正己烷系列为流动相。2、反相色谱柱:固定相极性小于流动相,其技术就是在硅胶基质上键合有机碳链。一般指C18、C8、苯基柱等,以甲醇、乙腈、水为流动相。目前用的最多的色谱柱是反相色谱柱反相色谱柱填料合成技术用四乙氧基硅烷脱乙基聚合成硅胶,并脱去表面的
简介液相色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤: a. 平衡开始时将流
UPLC(超高效液相色谱)简介
超越HPLC 随着科学技术的进步,对液相色谱技术的要求也不断提高,单从技术角度的改进已经不行。这就需要同时从科学与技术的角度出发,或者说从理论高度对液相色谱重新认识。因此,UPLC(超高效液相色谱)概念得以提出,将HPLC的极限作为自己的起点。在1996年,Waters公司推出Alliance HP
快速液相色谱柱的特点和特性
快速液相色谱柱度优化功能,或“GO”功能,把线性梯度转化成阶梯梯度,在已确认的洗脱峰附近,优化洗脱条件。先用一个小的色谱柱纯化一个小部分样品,一旦运行完毕,选择优化按钮。然后选择目标峰,一个新的,优化了的,基于梯度洗脱方法就自动产生了。选择一个新的色谱柱和收集支架,分离方法就根据新柱子的大小自动调整
快速液相色谱柱的特点和特性
快速液相色谱柱度优化功能,或“GO”功能,把线性梯度转化成阶梯梯度,在已确认的洗脱峰附近,优化洗脱条件。先用一个小的色谱柱纯化一个小部分样品,一旦运行完毕,选择优化按钮。然后选择目标峰,一个新的,优化了的,基于梯度洗脱方法就自动产生了。选择一个新的色谱柱和收集支架,分离方法就根据新柱子的大小自动调整
快速液相色谱柱的特点和特性
快速液相色谱柱度优化功能,或“GO”功能,把线性梯度转化成阶梯梯度,在已确认的洗脱峰附近,优化洗脱条件。先用一个小的色谱柱纯化一个小部分样品,一旦运行完毕,选择优化按钮。然后选择目标峰,一个新的,优化了的,基于梯度洗脱方法就自动产生了。选择一个新的色谱柱和收集支架,分离方法就根据新柱子的大小自动调整
高压快速液相制备色谱仪概述
高压快速液相制备色谱仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2017年6月23日启用。 技术指标 泵流量范围:1-250ml/min;泵最大压力:250bar(3625psi); 四元梯度泵:实现四元梯度洗脱;检测器波长范围:200-600nm,支持双波长同时显示,支持全波长扫描;UV显示范围:0
高效液相色谱的液固分离简介
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm 式中
比较FPLC与HPLC
1、二者原理相同:都是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进 行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。 2、特点:二者均具有快速、分辨率高、检测灵敏度高、分离效能高等特点,而且FPLC还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大
快速液相色谱柱选择的条件有哪些
快速液相色谱柱选择的条件 填料基质 1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定(高温可以达到80度以上),机械强
快速液相色谱柱选择的条件有哪些
快速液相色谱柱选择的条件填料基质1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定(高温可以达到80度以上),机械强度小。 颗粒外形大多现代HPL
液相色谱快速识别三聚氰胺
毒奶粉”事件,让“三聚氰胺”这一陌生绕口的专业名词进入了大家的视野,并自始至终在很多年影响着大伙儿对中国乳制品质量的信心,也让气相色谱仪在乳制品检测制造行业崭露了头角。 毒奶粉”紧急事件后,国家标准全国食品安全应急规范性协作组、全国质量监管头等大事产品质量检测方法 规范性专业性委员会迅速做
快速液相色谱柱选择的条件有哪些
填料基质1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定(高温可以达到80度以上),机械强度小。 颗粒外形大多现代HPLC填料都是球形颗粒,但有
关于超高效液相色谱的简介
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超高效液相色谱是一个新兴的领域,作为世界第一个商品