被分离组分在柱中的洗脱原理(二)

2⊕理论塔板高度(theortical plate height,H)每单位柱长的方差。H=。实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算:H=L/N4.相平衡参数(distribution coefficient,K)--在一定温度下,化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的浓度之比。K=[xs]/[xm] Cs-溶质在固定相中的浓度Cm-溶剂在流动相中的浓度分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数,离子交换色谱法为选择性系数(或称交换系数),凝胶色谱法为滲透参数。但一般情况可用分配系数来表示。在条件(流动相、固定相、温度和压力等)一定,样品浓度很低时(Cs 、Cm很小)时,K只取决于组分的性质,而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件,在这种条件下,得到的色谱峰为正常峰;在许多情况下,随着浓度的增大,K减少,这时色谱峰为拖尾峰;而......阅读全文

常用洗脱溶剂和解析能力介绍

洗脱溶剂的解析能力的强弱顺序是:醋酸、水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、醚、氯仿、苯、四氯化碳和己烷等。为了能得到较好的分离效果,常用两种或数种不同强度的溶剂按一定比例混合,得到合适洗脱能力的溶剂系统,以获得最佳分离效果。

液相色谱法术语概念梯度洗脱

梯度洗脱(gradient elution)间断地或连续地改变流动相的组成或其他操作条件,从而改变其色谱洗脱能力的过程。

液相色谱法术语概念洗脱体积

洗脱体积(Ve, elution volume)从进样开始计算的通过色谱柱的实际洗脱剂体积。

无菌检验用洗脱液(含PBS)配方

中文名无菌检验用洗脱液(含PBS)英文名ELUENT FOR STERILE TEST用途用于无菌检验样品的制备。标准配方(g/L)配方(每升)                含量 蛋白胨                      10.0g 氯化钠                      8.5

细胞同步化实验_离心洗脱法

实验材料细胞仪器、耗材洗脱离心机培养基锥形瓶洗脱仪实验步骤1. 准备下列仪器:洗脱离心机装有一个大容器中的 20 L 培养基,含 0.5%~1% 血清和抗生素,置于室温20 个 1 L 的锥形瓶,用以收集各洗脱组分2. 至少提前 10 天开始培养细胞,进行离心洗脱时细胞连续进入指数生长期且不会达到太

液相色谱仪的梯度洗脱技术

液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响,因此,

凝胶中蛋白质的洗脱实验

实验步骤 一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质 将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。 这一领域较多的早期方法已经发

高效液相色谱仪的梯度洗脱

高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物,梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动

HbF酸洗脱法检测参考值

正常血片中含HbF的着色红细胞:成人<0.01(1%) 新生儿0.55~0.85(55%~85%) 2岁后幼儿<0.02(2%)

凝胶中蛋白质的洗脱实验

一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。这一领域较多的早期方法已经发表(HagerandBurgess,1980),但却需要重新讨论 (butbear

不同梯度洗脱系统的特征比较

不同梯度洗脱系统的特征比较特性二元高压梯度二元低压梯度多元低压梯度可能洗脱范围较广较广广梯度的重现性较好好较好成本较高低低改变流动项较容易容易较容易机械性能较简单,较可靠简单,可靠较简单,较可靠自动化难以程度容易容易较容易对溶解气体的敏感性较敏感敏感敏感梯度准确性较准确准确较准确不同溶剂混合能力较强

梯度洗脱的技术要点和装置要求

①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高

凝胶中蛋白质的洗脱实验

SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希望可以利用凝胶的高分辨率特性来获得小量的纯净蛋白质。实验步骤一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由

高效液相色谱仪梯度洗脱曲线

高效液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或

我国首个国产靶向药物洗脱支架获准上市

  一个医学专科的兴盛,不仅取决于基础研究水平、临床诊疗水平,还要看该专科相关的医疗工业制造水平。中国介入心脏病学始于上世纪80年代,我国首例经皮冠状动脉腔内血管成形术(Percutaneous fransluminal coronary angioplasty,PTCA)于1983年在苏州

HPLC什么情况下使用梯度洗脱

梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗提。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分

高效液相色谱仪的梯度洗脱技术

高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响

影响液相色谱仪梯度洗脱的因素

液相色谱仪进行梯度洗脱时,选定溶剂A、B之后,设定梯度速度和梯度时间,确定梯度曲线形状,要以最经济的梯度洗脱程序,实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有:1、溶剂的纯度要高,否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好,应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混合流

离子交换层析的加样与洗脱

层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。柱的负荷能力可用交换容

凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响

洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果,一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽,反

D101大孔吸附树脂洗脱方法

  天津市西金纳环保材料科技有限公司产品牌(型)号:AB-8大孔树脂 D301碱性树脂,D001强酸性树脂,D3520非极性树脂,D101大孔吸附树脂洗脱方法;D101 结 构:苯乙烯型共聚体 PDVB 极 性:弱极性 技术指标: 粒 径 范围:0.3—1.25(mm)>90% 含 水 量:65—7

吸附柱色谱分离中怎么选择洗脱剂

在进行吸附柱色谱分离时,应根据样品的性质、吸附剂的性能、流动相的极性三方面的影响因素加于选择。一般的选择规律是:样品极性较大,在极性吸附剂柱上进行分离,则应选用吸附性较弱(即活性较低)的吸附剂,用极性较大的溶剂进行洗脱。组分的极性较弱,就应选用吸附性较强(即活性较高)的吸附剂,用极性较小的溶剂进行洗

薄层层析的洗脱测定法介绍

  洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。

D101大孔吸附树脂洗脱方法

,D3520非极性树脂,D101大孔吸附树脂洗脱方法;D101 结 构:苯乙烯型共聚体 PDVB 极 性:弱极性 技术指标: 粒 径 范围:0.3—1.25(mm)>90% 含 水 量:65—75% 湿 真 密度:1.05--1.09(g/ml) 湿 视 密度:0.68—0.75(g/ml) 表 观

高效液相色谱仪的梯度洗脱技术

高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响

液相色谱法术语概念再循环洗脱

再循环洗脱(recycling elution)色谱柱流出组分经过再循环装置又送入色谱柱进行再分离,以增加分离程度的洗脱过程。

液相色谱法术语概念等度洗脱

等度洗脱( isocratic elution)用单一的或一定组成的流动相连续洗脱的过程。

离子交换层析洗脱时的要求介绍

  ①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不至于太拥挤。  ②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。  ③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。  洗脱馏份的分析按一定体积(

液相色谱法术语概念洗脱淋洗剂

洗脱淋洗剂( eluant)在柱液相色谱法中用作流动相的液体。

离子交换层析的洗脱相关信息介绍

  已结合样品的离子交换前,可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全,往往需要逐步改变pH或离子强度,其中最简单的方法是阶段洗脱法,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入,使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大,使许多洗