凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响
洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果，一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法，一种是使用恒流泵，另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素，包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等，一般来讲，洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡，分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽，反而会降低分辨率，而且实验时间会大大延长；所以实验中应根据实际情况来选择合适的洗脱速度，可以通过进行预备实验来选择洗脱速度。市售的凝胶一般会提供一个建议流速，可供参考。......阅读全文
凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响
洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果，一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法，一种是使用恒流泵，另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素，包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等，一般来讲，洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡，分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽，反
凝胶色谱柱中的洗脱液主要成分
水溶性的基本是水，油溶性的基本是四氢呋喃，乙酸乙酯等
凝胶层析的加样洗脱
凝胶床经过平衡后，在床顶部留下数亳升洗脱液使凝胶床饱和，再用滴管加入样品。一般样品体积不大于凝胶总床体积的5%-10%。样品浓度与分配系数无关，故样品浓度可以提高，但分子量较大的物质，溶液的粘度将随浓度增加而增大，使分子运动受限，故样品与洗脱液的相对粘度不得超过1.5-2。样品加入后打开流出口，使样
凝胶层析的加样洗脱
凝胶床经过平衡后，在床顶部留下数亳升洗脱液使凝胶床饱和，再用滴管加入样品。一般样品体积不大于凝胶总床体积的5%-10%。样品浓度与分配系数无关，故样品浓度可以提高，但分子量较大的物质，溶液的粘度将随浓度增加而增大，使分子运动受限，故样品与洗脱液的相对粘度不得超过1.5-2。样品加入后打开流出口，使样
凝胶色谱柱
分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子
凝胶色谱柱
凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分
凝胶色谱柱
分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子，凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、
凝胶中蛋白质的洗脱实验
SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希望可以利用凝胶的高分辨率特性来获得小量的纯净蛋白质。实验步骤一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由
凝胶中蛋白质的洗脱实验
实验步骤 一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质 将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表，但当用于微量的蛋白质时，这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。 这一领域较多的早期方法已经发
凝胶中蛋白质的洗脱实验
一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表，但当用于微量的蛋白质时，这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。这一领域较多的早期方法已经发表（HagerandBurgess,1980)，但却需要重新讨论 (butbear
凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离，常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶，洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分
SRT凝胶色谱柱
SRT凝胶色谱柱：SRT SEC键合固定相采用专利的表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。工艺采用可控的化学修饰技术，因此能确保色谱柱与色谱柱之间有着可靠的重现性。SRT填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖完全，因此不仅具有优异的稳
凝胶色谱柱操作
1、 溶胀商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um的使用zui多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全，否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。2、 装柱由于凝胶的
吸附柱色谱分离中怎么选择洗脱剂
在进行吸附柱色谱分离时，应根据样品的性质、吸附剂的性能、流动相的极性三方面的影响因素加于选择。一般的选择规律是：样品极性较大，在极性吸附剂柱上进行分离，则应选用吸附性较弱（即活性较低）的吸附剂，用极性较大的溶剂进行洗脱。组分的极性较弱，就应选用吸附性较强（即活性较高）的吸附剂，用极性较小的溶剂进行洗
被分离组分在柱中的洗脱原理
一、基本概念和术语 1.色谱图和峰参数⊕色谱图（chromatogram）--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elution profile）.⊕基线（base line）--流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。⊕噪音
凝胶渗透色谱分析中,分子洗脱顺序
液相色谱原理大多是分配色谱,就是说样品被固定相（柱子填料）吸附以后,在流动相洗脱过程中,样品的极性不同,在流动相中溶解的浓度也不同,有的可以互溶,有的不容,有的有一定溶解度.就可以根据这个原理进行分离.与固定相作用时间长的后洗脱，不易吸附的随着流动相流动最先被洗脱出来
SRT凝胶色谱柱特点
SRT凝胶色谱柱特点： ● 高柱容量、高分辨率 ● 宽的pH范围 (pH范围2-8.5) ● 使用寿命长 ● 低盐浓度洗脱，适合LC-MS分析 ● 对于生物样品无强吸附 ● 极低的非特异性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率 ● 解决多维色谱分析应用
葡聚糖凝胶柱使用
做葡聚糖凝胶层析分离蛋白肽过程中，填充一般柱子需要2/3以上,灌时先加2-3毫升相应的缓冲液,然后,用玻棒轻轻绞匀再灌,不能产生气泡,也不能使它干掉,以免产生龟裂影响实验结果.
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱，除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外，还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱，其充填介质化学稳定性好，不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此，由于柱子的反复使用，在长时间使用后，样品组分的洗脱情况还
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一，其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料，已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基质，
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一，其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料，已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。 TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱 TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱，除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外，还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱，其充填介质化学稳定性好，不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此，由于柱子的反复使用，在长时间使用后，样品组分的洗脱情况
凝胶层析柱,离子交换柱,色谱吸附柱
凝胶柱层层析又称凝胶过滤，是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中，只留在凝胶颗粒之间的流动相中，因此以较快的速度首先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡，因
超高效液相色谱柱洗脱技术优化策略
超高效液相色谱洗脱技术的质量取决于什么?如何利用QbD评判色谱仪洗脱质量，它除关注关键性的邻近双峰外也考虑了洗脱的稳定性。 图1 色谱洗脱技术的经验模型。模型中的影响因素有梯度时间(tG)、温度(T)、有机洗脱剂B的初始浓度(%Bs)及最终浓度(%Be)、水质洗脱液A的酸碱度pH值以及
被分离组分在柱中的洗脱原理（一）
基本概念和理论一、基本概念和术语色谱图和峰参数⊕色谱图（chromatogram）－－样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elution profile）.⊕基线（base line）－－流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴
被分离组分在柱中的洗脱原理（二）
2⊕理论塔板高度（theortical plate height,H）每单位柱长的方差。H=。实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算：H=L/N4.相平衡参数（distribution coefficient,K）－－在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。K=[x
柱色谱法的洗脱方式和应用介绍
柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液
阴离子交换色谱柱洗脱液的选择
阴离子交换色谱柱洗脱液的选择 阴离子交换色谱柱的选择： 离子交换色谱柱通常粗短，直径和长度比一般为1：10～1：50。 阴离子交换色谱柱装柱： 1、色谱柱安装要垂直。 2、装柱时要均匀平整，不能有气泡。 五、平衡缓冲液的选择： 平衡缓冲液是指装柱后和上样后用
凝胶过滤时发现目的蛋白的洗脱时间延迟
最大的可能就是该目的蛋白和填料间有离子或疏水相互作用可以通过降低盐离子浓度，最小化疏水相互作用通过加入适量去污剂或有机溶剂，如5%异丙醇，增加盐浓度（如150mM氯化钠）最小化离子相互作用。
凝胶层析法时洗脱液为何不可流干
洗脱液是流动相层析填料是固定相如果流动相流干了，固定相就会进入空气，下次使用时会影响柱效。