色谱技术概述
色谱技术又称层析技术、色层技术,是生物大分子研究中必不可少的工具,已被普遍认为是当前分离生化样品最有效的手段。不管是哪一种色谱方法,其最基本的特征是具有一个固定相和一个流动相,各种物质得以分离的最基本原因就在于它们在这两个相间具有不同的分配系数。当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,从而得到分离。色谱技术有多种分类方法。按两相状态来分类,有气相色谱法和液相色谱法两种。气相色谱以气体作流动相,液相色谱以液体作流动相。在生物大分子分离中,主要以液相色谱为主,故气相色谱在此不做介绍。液相色谱按照作用机制来分类有:离子交换色谱、凝胶排阻色谱、亲和色谱、反相色谱、疏水作用色谱、正相色谱等几种。若按操作方式来分类,又有柱色谱、薄层色谱、纸色谱等数种。按照制备量来分类,有分析色谱和制备色谱。按照填料的强度来分类,有经典的软胶色谱和现代高效液相色谱,等等。尽管分类方法很多,但按照色谱作用机制的分类方法是最重要和最基本的方法,也......阅读全文
色谱技术方法柱色谱
柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液
色谱技术方法薄层色谱
薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法,这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层,用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端,之后将点样端浸入流动相中,依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单,被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对静止的固
吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱(二)
薄层色谱法 按各单体所规定的载体,放入适当容器,加入适量水以配成悬浮液,在厚度均匀一致的50×200mm或200×200mm平滑玻璃板上将此悬浮液均布成0.25mm的厚度,风干后一般在110度下干燥0.5-1h(或按单体规定)。 以离薄层板一端约25mm的位置作为点样基线,用
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱(一)
色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其
液相色谱薄层色谱联用
薄层色谱在有机分析,特别是药物分析,和样品的分离纯化中得到广泛的应用。气相色谱和薄层色谱的联用比较简单,早在20世纪60-70年代就有商品仪器介绍,主要是气相色谱分离分析后,利用薄层色谱帮助定性。而用薄层色谱预分离后再用气相色谱进行分离分析也是很方便可行的,故对气相色谱和薄层色谱的联用在此就不多作介
色谱试剂与色谱纯试剂
色谱试剂与色谱纯试剂色谱试剂与色谱纯试剂是两个截然不同的概念,色谱纯是指试剂的纯度而色谱试剂是指试剂应用的对象。色谱纯试剂纯度发很高,除要求含量高以外,还对微尘、水分都有很高的要求,属于高纯试剂的范畴。而色谱试剂是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂。因色谱种类多,过程复杂,故又把色谱试剂
色谱试剂与色谱纯试剂
色谱试剂与色谱纯试剂有什么不同色谱试剂与色谱纯试剂色谱试剂与色谱纯试剂是两个截然不同的概念,色谱纯是指试剂的纯度而色谱试剂是指试剂应用的对象。色谱纯试剂纯度发很高,除要求含量高以外,还对微尘、水分都有很高的要求,属于高纯试剂的范畴。而色谱试剂是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂。因色谱种类
色谱仪中色谱图
什么是色谱图?进样后色谱柱流出物通过检测器系统时,所产生的响应信号时间或载气流出气体积的叫曲线图称为色谱图。
正相色谱和方向色谱
1、正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动
色谱仪对色谱描述
离子对色谱的分离机理是吸附、分离的选择性主要由流动相决定。 该方法主要用于表面活性阴离子和阳离子以及金属络合物的分离。 下面我们以离子交换色谱为例简单介绍一下离子色谱的原理。 一事实上酸度下,样品离子和固定相基团之间存在着相互作用,对于不同的样品离子,这种作用的大小是不同的。因此在随流动相
反相色谱色谱柱的选择
色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优
色谱技术方法气相色谱
气相色谱是机械化程度很高的色谱方法,气相色谱系统由气源、色谱柱和柱箱、检测器和记录器等部分组成。气源负责提供色谱分析所需要的载气,即流动相,载气需要经过纯化和恒压的处理。气相色谱的色谱柱一般直径很细长度很长,根据结构可以分为填充柱和毛细管柱两种,填充柱比较短粗,直径在5毫米左右,长度在2-4米之间,
色谱异常峰之“色谱双峰”
色谱双峰产生的原因及处理 液相色谱分析中,在色谱柱正常,样品灵敏度足够,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下(不包括梯度),峰型应对称而尖锐。但是,在对样品了解程度不够,方法不妥,样品处理方法及进样方式不合理下,会出现各种意想不到的问题,而对色谱峰难以作出合理的解释。色谱双峰指的是不
液相色谱仪色谱曲线相关术语色谱图
色谱图(chromatogram)色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图,或者通过适当方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。
分析色谱,制备色谱与工业色谱的主要区别
分析色谱,制备色谱与工业色谱的主要区别? 1.分析色谱: 在乎分析结果,对化验结果的纯度,比例等要求准确,而对收率,浓度等产品参数不在乎,一次进料,而且每次进料少。 2.工业色谱: 比较在乎产品的浓度和收率,还有纯度,工业化生产是连续进料。 3.制备色谱:
液相色谱仪色谱曲线相关术语色谱峰
色谱峰(chromatographic peak)色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。
色谱仪色谱图的意义
凝胶分析色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室凝胶分析色谱仪和工业凝胶分析色谱仪。2、按进样自动性可分:自动进样凝胶分析色谱仪和手动进样凝胶分析色谱仪。3、按洗脱方式可分:等度洗脱凝胶分析色谱仪和程序洗脱凝胶分析色谱仪。4、按结构可分:台式凝胶分析色谱仪和落地式凝胶分析色谱仪。5、按产地可分:
色谱仪的色谱保留值
色谱仪的色谱保留值是样品组分在色谱仪中的保留行为,反映组分与固定相作用力的大小,描述组分色谱峰在色谱图中的位置。保留值是总称,具体参数如下:一、死时间:指不被固定相吸附或溶解的组分进入色谱柱时,从进样到柱后出现色谱峰极值时所需的时间。二、死体积:指色谱柱填充后,柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪
色谱仪色谱柱概述(四)
①氯硅烷类:三苯基氯硅烷、二苯基氯硅烷和六甲基二硅烷等。②硅氨烷类:六甲基二硅氨烷、二苯基四甲基硅氨烷和四苯基二甲基硅氨烷等。六甲基二硅氨烷是空间障碍最小的硅烷化试剂,它在玻璃表面形成非极性的甲基硅氧烷基团,适用于涂渍聚二甲基硅氧烷类固定液。二苯基四甲基硅氨烷在玻璃表面引入苯基,适用于涂渍含苯基量不
分析色谱与制备色谱的关系
分析色谱是制备色谱的基础。当我们在分析色谱上 取得了良好的分离效果时,可以将其放大,应用到制备色谱上,由此,我们需要考虑调整上样量,流速,梯度:1.上样量的调整:他与分析色谱柱和制备色谱柱的柱长和柱内径有关:具体关系时;制备柱上样量/分析柱上样量=制备猪场/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平
关于色谱填料色谱填料ODS分类
色谱柱是高效液相的心脏,大部分色谱谱图问题都来自于色谱柱,色谱填料的主要用途是对混合物质进行分离,然后通过后处理以达到对各组分进行定性和定量. 常见色谱填料 有以下几个分类 1、 反相(与离子对)方法(填料为非极性) C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广 C8
色谱技术与色谱试剂现状评述
由于色谱技术具有快速、正确、高效的特点,故得到广泛地应用。近几年来的有关报道,反映了我国色谱理论研究和色谱应用取得了很大成就。如在制药工业、生物化学、石油化工、冶金工业、环保、农药、食品等领域,色谱技术已成为广泛使用的分离和分析手段之一。化学试剂是分析仪器的一个重要组成部分,它用量虽然很少,但作用难
色谱技术与色谱试剂现状评述
在分析测试领域,用色谱分析的方法和应用越来越广泛。在今天对高质量产品的测定已涉及食品、医药、环保、生化和石油化工等等。色谱技术的发展和变化对化学试剂有着很大的影响,尤其对从事生产制造、经营管理和分析使用者来说,了解色谱技术的发展和现状,来对待色谱试剂的新认识、有助于分析测试的正确性和可靠性的进一步提
分析色谱与制备色谱的关系
分析色谱是制备色谱的基础。当我们在分析色谱上 取得了良好的分离效果时,可以将其放大,应用到制备色谱上,由此,我们需要考虑调整上样量,流速,梯度:1.上样量的调整:他与分析色谱柱和制备色谱柱的柱长和柱内径有关:具体关系时;制备柱上样量/分析柱上样量=制备猪场/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平
色谱技术与色谱试剂现状评述
在分析测试领域,用色谱分析的方法和应用越来越广泛。在今天对高质量产品的测定已涉及食品、医药、环保、生化和石油化工等等。色谱技术的发展和变化对化学试剂有着很大的影响,尤其对从事生产制造、经营管理和分析使用者来说,了解色谱技术的发展和现状,来对待色谱试剂的新认识、有助于分析测试的正确性和可靠性的进一步提
液相色谱色谱柱的保养
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,发展到今天已经成为了包括科学研究、工业生产、环境保护、食品安全在内多个领域常用的科研分析仪器之一。与此同时,随着液相色谱的普及,因为仪器故障或者使用不规范导致的事故新闻也时有发生,因此,了解液相色谱相关的规范与使用方法,对于使用者来说尤
色谱仪色谱柱概述(一)
第一节 色谱仪填充柱 一、填充柱管的选择:1、柱管材质:常用的填充柱有玻璃管柱、金属管柱和塑料管柱。(1)玻璃管柱:1)材质:硼硅玻璃。2)特点:化学惰性好,柱效高,易碎。3)使用事项:使用时等柱冷却后才能停止通载气。4)应用:适用于强极性化合物的分离。(2)金属管柱:1)材质:主要为不锈钢。2)特