如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果...
如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果准确性在此次的新型冠状病毒疫情中，核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知，本次新冠病毒的核酸检测流程为采样（咽拭子、肺泡灌洗液），提取病毒RNA，再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确性的讨论也甚嚣尘上，其中PCR实验污染是导致实验有偏差的原因之一， 造成PCR实验污染的主要原因有以下几点，样本间交叉污染（样本泄漏引起的交叉，样本提取过程中移液器、耗材的污染），PCR试剂的污染（容器、耗材、移液器，水等被污染），PCR扩增产物污染，气溶胶污染，克隆质粒污染等。在病毒核酸检测过程中，结果的准确性除了检测方式的灵敏度很重要以外，保证提取RNA样本的完整性也十分重要。今天我们就聊聊如何防止RNA降解，获得高质量的RNA进行后续试验。导致RNA降解最主要的物质就是RNase，RNase非常稳定，且无处不在，用常规的......阅读全文
如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果...
如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果准确性在此次的新型冠状病毒疫情中，核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知，本次新冠病毒的核酸检测流程为采样（咽拭子、肺泡灌洗液），提取病毒RNA，再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确
如何防止RNA酶污染
在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所
PCR污染的防止方法
(一)合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。最好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应专用，实验前应将实验室用紫外线
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 （一）标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 （二）PCR试剂的污染:主
防止RNA酶污染的措施
在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所
防止RNA酶污染方法
防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。3. 有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2 室温10mi
生物污染净化仪在杀死新型冠状病毒的应用
2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，因2019年武汉病毒性肺炎病例而被发现，2020年1月12日被世界卫生组织命名。酒精用于包括2019-nCoV，流感，SARS等病毒性呼吸道传染性疾病的预防，主要用法是用来洗手/搓手，因为酒精可以通过破坏其生物包膜而快速杀灭它们。那么我们来看看Keyp
高GC含量PCR样本的扩增困难与防止污染与降解的操作方法
每天做实验小心翼翼，时时担心提取的DNA被污染、被降解。终于，废了九牛二虎之力，好不容易提取到高质量的DNA，然而PCR仍然P不出来条带。是试剂加漏了吗？是酶失活了吗？换上新试剂，冰上重来一次，然并卵，不仅P不出来，更重要的是也不知道为啥P不出来，贝多芬都弹不出我的悲伤！
怎么防止PCR实验室污染
PCR实验室污染标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。PCR试剂的污染：主要是由于
磁性金属测定仪如何保证结果精准？
磁性金属对人体有一定的副作用，因此，食品中有明确的规定，不能多于某一标准值。磁性金属测定仪在质量监督、面粉加工、粮食储运、购销、科研等部门，并且取得了一定的市场口碑。然而，在具体应用中，磁性金属测定仪的使用还存在着一定的缺点，下面来简单分析下。 实验表明：小麦粉中不同程度地加有添加
RNA－和－DNA－提取的降解问题
降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在 RNA 提取过程中,样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于 DNA 提取,降解不是一个大问题,因为对于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有较多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
细胞培养污染如何防止
细胞培养防止污染的操作方法：1、准备工作：准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。2、取材：在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，
RNA降解
新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。 2. 新鲜组织：某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏，胸腺等)，即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮条件下将组织
信使RNA的降解
同一细胞内的不同mRNA具有不同的寿命（稳定性）。在细菌细胞中，单个mRNA可以存活数秒至超过一小时，但平均寿命为1至3分钟，因此，细菌mRNA的稳定性远低于真核mRNA。哺乳动物细胞mRNA的寿命从几分钟到几天不等。mRNA的稳定性越高，从该mRNA产生的蛋白质越多。 mRNA的有限寿命使细胞能够
Nat－Catalysis：RNA是如何保证被准确转录的？
生命的信息通过信使RNA的转录和蛋白质的翻译在我们的基因组DNA中编码以执行细胞功能。为了确保准确的转录， RNA聚合酶II将合成并校正信使RNA以去除任何不匹配的错误。 虽然已知RNA聚合酶II对于确保转录的准确性至关重要，但对于这种酶如何完成这项艰巨的任务而言，这是一个长期存在的难题。科学
使用耐压测试仪如何保证安全？
尽管是目前值得相信的耐压测试仪，在运行过程中也有可能会因为一些操作人员自身或外界影响等问题，从而对操作人员造成一定的危险，所以不管是专业生产耐压测试仪的企业，还是使用耐压测试仪的相关企业，都应该尽可能的去避免此类危险的发生。 一般来说，目前很多耐压测试仪在设计时都有嵌入智能防高压触电体系，这
如何预防PCR污染？
进行 PCR 反应时，遵照下列规则有助于防止 PCR 的污染。（1）PCR 的前处理和后处理在不同的房间或不同的隔离工作台上进行。即整个 PCR 操作要在不同的隔离区（标本处理区，PCR 扩增区，产物分析区）进行，特别是阳性对照需在另一个隔离环境中贮存、加入。（2）试剂要分装，每次取完试剂后盖紧
如何保证水质监测结果的可靠性？
环保督查之下，各种水污染问题频频曝光，前段时间，国家地表水环境质量监测事权上收工作全面启动。今天，我们就来聊聊水质监测。 一、水质监测概念 水质监测是监视和测定水体中污染物的种类、各类污染物的浓度及变化趋势，评价水质状况的过程。 二、监测目的 1.地表水及地下水--经常性监测。 2.生产和生活过程-
如何保证水质监测结果的可靠性
环保督查之下，各种水污染问题频频曝光，前段时间，国家地表水环境质量监测事权上收工作全面启动。今天，我们就来聊聊水质监测。1 水质监测概念水质监测是监视和测定水体中污染物的种类、各类污染物的浓度及变化趋势，评价水质状况的过程。2监测目的1.地表水及地下水--经常性监测。2.生产和生活过程--监视性监测
如何看荧光定量PCR的结果
按公式计算：对照组-ΔΔCt ＝对照组（Ct 目的基因－Ct 内参基因）－对照组（Ct 目的基因－Ct 内参基因）
如何看荧光定量PCR的结果
按公式计算：对照组-ΔΔCt ＝对照组（Ct 目的基因－Ct 内参基因）－对照组（Ct 目的基因－Ct 内参基因）
RNA提取时RNA降解原因
1 ) 新鲜细胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鲜组织： 某些含有内源性核酸酶的样品，很难避免RNA酶的降解，建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎，并且，匀浆时采用更多的裂解液。 3 ) 冷冻样品： 样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放，然后转移到-70℃冰箱存
如何防止细胞培养出现污染
防止细胞培养出现污染的方法如下：1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有
如何防止细胞培养出现污染
防止细胞培养出现污染的方法如下：1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有
如何保证差示扫描量热仪正常使用
1.为保证差示扫描量热仪正常使用，样品在测试温度范围内不能发生热分解，与金属铝不起反应，无腐蚀。被测量的试样若在升温过程中能产生大量气体，或能引起爆炸的都不能使用该仪器。因此，测试前应对样品的性质有大概了解。2.检查差示扫描量热仪所有连接是否正确，所用气体是否充足，工具是否齐全。3.试验中，若选择铝
如何保证差示扫描量热仪正常使用
1.为保证差示扫描量热仪正常使用，样品在测试温度范围内不能发生热分解，与金属铝不起反应，无腐蚀。被测量的试样若在升温过程中能产生大量气体，或能引起爆炸的都不能使用该仪器。因此，测试前应对样品的性质有大概了解。2.检查差示扫描量热仪所有连接是否正确，所用气体是否充足，工具是否齐全。3.试验中，若选择铝
如何保证差示扫描量热仪正常使用
1.为保证差示扫描量热仪正常使用，样品在测试温度范围内不能发生热分解，与金属铝不起反应，无腐蚀。被测量的试样若在升温过程中能产生大量气体，或能引起爆炸的都不能使用该仪器。因此，测试前应对样品的性质有大概了解。2.检查差示扫描量热仪所有连接是否正确，所用气体是否充足，工具是否齐全。3.试验中，若选择铝
如何保证差示扫描量热仪正常使用
1.为保证差示扫描量热仪正常使用，样品在测试温度范围内不能发生热分解，与金属铝不起反应，无腐蚀。被测量的试样若在升温过程中能产生大量气体，或能引起爆炸的都不能使用该仪器。因此，测试前应对样品的性质有大概了解。2.检查差示扫描量热仪所有连接是否正确，所用气体是否充足，工具是否齐全。3.试验中，若选择铝
提取RNA时如何去除DNA的污染
提取RNA时如何去除DNA的污染的方法：注意实验室的标准化问题，注意污染的存在，同时严格按照说明书上的操作应该没有问题。发现DNA污染，用DNAse I 消化1小时，37度离心取上清的时候，一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于
PCR仪RACE的PCR结果有杂带
RACE PCR杂带或非特异性PCR条带可能是由于以下原因： *GSP与其他cDNA的非特异性结合会导致在扩增目的产物时得到无关产物。 *GeneRacer引物和cDNA的非特异性结合会导致产生一端带有GeneRacer引物序列的PCR产物。 *RNA降解。 *PCR管或试剂污染。 注