自噬双标腺相关病毒说明（二）
(Tom Egil Hansen and Terje Johansen，BMC Biology，2011) 图4 Vigene自噬双标病毒载体图谱五．Vigene mCherry-GFP-LC3B 自噬双标操作方法（一）体外实验以2型AAV病毒为例，Vigene为您推荐的MOI值104-105，是根HEK293细胞得出的数据，不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前，进行预实验摸索最佳MOI值，推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒，推荐使用96孔板进行预实验。2. 将目的细胞接种于96孔板中，细胞融合率为50%为最佳。为保证细胞生长良好，请保证细胞贴壁过夜。3. 取10ul AAV病毒原液加入90 ul培养基中做1:10稀释（10-1），以此为起点做梯度稀释直至稀释10-7。可根据实际情况降低或提高稀释倍数。4. 取出提前准备好的96孔板，先确定细胞......阅读全文
Nature：自噬与干细胞命运
骨骼肌的再生能力依赖于长寿的肌肉干细胞（称为卫星细胞）。这些细胞一般处于静息状态，在组织受损的时候激活，生成肌纤维或者进行自我更新。静息状态是维持骨骼肌干细胞群体的一种简单方式。 肌肉干细胞的再生功能在衰老过程中逐渐衰退，这种衰退在生命的最后阶段达到顶峰。正因如此，高龄老人容易患上肌肉衰减综合
Cancer－cell解析癌症与自噬
辛辛那提大学癌症中心(CCC)的研究人员发现，一种叫做瞬时受体电位离子通道蛋白3（TRPM3）的膜通道促进了肾癌的肿瘤生长，治疗性靶向这一通道有可能为这一疾病找到更多有效的治疗方法。他们的研究结果发布在11月10日的《癌细胞》（Cancer Cell）杂志上。 肾癌是泌尿系统肿瘤中致死率最高的
PNAS：自噬帮肿瘤抵抗化疗
神经母细胞瘤(Neuroblastoma)是一种常见的儿童恶性实体瘤，起源于胚胎神经系统的细胞。传统化疗往往不能有效治疗高侵袭性的神经母细胞瘤，要开发新的有效疗法，就必需先理解这类肿瘤的抗性机制。 德国癌症研究中心DKFZ和海德堡大学附属医院的科学家们，在Olaf Witt教授的带领下
细胞自噬的蛋白定位介绍
在研究自噬相关蛋白时，需对其进行定位。由于自噬体与溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位： Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。 LysoTrackerTM 探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。 pDsRed2
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
一文了解自噬阶段
自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。 自噬在机体的生理和病理过程中都能见到，其所起的作用是正面还是负面的尚未完全阐明，对肿瘤的研究尤其如此，值得关注。
细胞自噬是怎么发生的？
细胞自噬是一种在进化上保守的细胞内分解代谢过程，在该过程中，细胞质大分子、聚集性蛋白、受损细胞器或病原体被运送至溶酶体，并被溶酶体水解酶降解，产生核苷酸、氨基酸、脂肪酸、糖和三磷酸腺苷，最终再循环到胞浆中。诸如饥饿、辐射、缺氧、细菌入侵、生长因子匮乏等多种因素均可诱导细胞自噬发生。细胞自噬的发生过程
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
发现自噬基因的过程简介
大隅良典接着利用了他改造过的酵母菌株——在这些酵母挨饿时，它们的自噬体会积累起来。如果对自噬过程重要的基因被失活，那么自噬体积累就理应不会发生。大隅良典将酵母细胞暴露在一种能随机在多个基因里引起突变的药物中，然后诱导自噬过程。 他的策略奏效了！在他发现酵母自噬一年内，大隅良典就鉴定出了第一批对
知识分享：细胞自噬研究详解
一、自噬简介 1、大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。 详
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
检测自噬的方法有哪些
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：（一）自噬诱导剂1）bredeldina/thapsigargin/tunicamycin：模拟内质网应激2）carbamazepine/l-690，330/lithiumchloride（氯化锂）：imp
纳米机械力引发细胞自噬
机械力刺激在细胞生长、分化与通讯等重要生命活动中发挥关键作用。近年来，机械门控离子通道蛋白Piezo的发现为在分子水平理解机械力对于生物体的作用奠定了基础。然而，如何在单细胞水平定量分析机械力对于细胞效应的作用仍然是一个难题。近日，上海交通大学樊春海院士、邵志峰教授与中国科学院上海高等研究院胡钧
细胞自噬的研究方法介绍
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
内质网蛋白VAPA/B与自噬蛋白互作调控自噬小体形成
4月23日，《当代生物学》（Current Biology）发表了中国科学院生物物理研究所张宏课题组的研究论文：The ER contact proteins VAPA/B interact with multiple autophagy proteins to modulate autopha
细胞自噬相关蛋白参与脑细胞分子运输的新机制
此前研究表明，自噬作为一种细胞自我循环或废物清除的过程，对于神经元的存活而言必不可少。在最近一项研究中，来自科隆大学CECAD衰老研究中心的Natalia Kononenko实验室的科学家们发现，自噬实际上还具有新的重要功能：参与细胞自噬的蛋白质同时参与了细胞内蛋白转运速度的调节。相关结果发表在
双抗体夹心酶标抗体法的相关介绍
双抗体夹心酶标抗体法是检测抗原最常用的方法。将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体，洗涤除去未结合的抗体及杂质。加受检标本，使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。加酶标抗体使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合，彻底
小儿病毒相关噬血细胞综合征的简介
小儿病毒相关噬血细胞综合征，又称噬血细胞性淋巴组织细胞增生症，是免疫缺陷性疾病。该病与全身性病毒感染有关，临床以高热、肝脾大、出血、皮疹、血细胞计数减少等为特征。
关于腺相关病毒载体的优缺点介绍
1、优点 在辅助腺病毒存在下，AAV可以高效定点整合至人染色体中；而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助，不插入宿主的基因组，而是游离于宿主细胞基因之外，呈卫星状稳定表达。 腺相关病毒载体（AAV）体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏，肝脏，骨骼肌等。 腺相关病毒是RG1
关于腺相关病毒的基本信息介绍
腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）,也称腺伴随病毒,属于微小病毒科依赖病毒属,是目前发现的一类结构最简单的单链DNA缺陷型病毒，需要辅助病毒（通常为腺病毒）参与复制。它编码两个末端的反向重复序列（ITR）中的cap和rep基因。ITRs对于病毒的复制和包装具有决定
腺相关病毒载体的基本信息介绍
腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）是简单的非致病性单链DNA病毒，需要辅助病毒参与生活周期，辅助病毒通常为腺病毒（Ad）或者单纯疱疹病毒（HSV）。基因组两端为末端反
腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册（一）
腺相关病毒（AAV）作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具，在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。什么是AAV？野生型AAV是一种复制缺陷型微小病毒，需要腺病毒或
干货：腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册
腺相关病毒（AAV）作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具，在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。 什么是AAV？ 野生型AAV是一种复制缺陷型微
Nature揭示自噬命运的控制开关
来自瑞典Karolinska学院、密歇根大学、加州大学圣地亚哥分校的科学家们展开合作，在新研究中解析了细胞核中事件对于自噬的影响。他们惊讶地发现，细胞核中的一个信号链充当了一种分子开关，决定了细胞的生死。 简而言之，自噬就是指细胞消化自身蛋白质或细胞内结构(细胞器)的一种自食过程。自噬作为
Nature子刊解析自噬的秘密
来自斯克里普斯研究所(TSRI)的科学家们发现了两种蛋白在细胞内帮助构建了特化细胞器，对维持细胞健康起极其重要的作用。这一发现为研究人员开启了大门，研究可以干扰这些细胞器形成的物质，从而促成新的癌症治疗。相关论文发表在12月2日的《自然结构与分子生物学》(Nature Structural
抗癌新思路:－迫使癌细胞自噬
我们体内的细胞自身存在一种细胞的自噬作用，自噬作用是普遍存在于大部分真核细胞中的一种现象, 是溶酶体对自身结构的吞噬降解, 它是细胞内的再循环系统。自噬作用在消化的同时，也为细胞内细胞器的构建提供原料，即细胞结构的再循环。然而癌细胞的自噬作用一旦出现问题，癌症细胞不在降解自我的时候，癌症就出
如何检测原代细胞中的自噬
凋亡会染色体固缩，染色加深，细胞膜内陷形成凋亡小体，最后细胞解体；坏死貌似是细胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成双层膜的自噬泡，包裹胞质内的物质，然后与溶酶体融合消化掉内容物。
如何检测原代细胞中的自噬
凋亡会染色体固缩，染色加深，细胞膜内陷形成凋亡小体，最后细胞解体；坏死貌似是细胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成双层膜的自噬泡，包裹胞质内的物质，然后与溶酶体融合消化掉内容物。