活体多光谱荧光成像应用实例(一)
前言传统的活体光学荧光成像(FLI)采用一个激发滤光片和一个发射滤光片。这对于区分靶向信号、可能存在的报告基因信号以及自体荧光组织信号而言有着诸多局限。多光谱(MS)FLI 采用多个激发滤光片和单个发射滤光片,或单个激发滤光片搭配多个发射滤光片,可以产生独特的荧光区域或材料的光谱曲线。(1)因此,图像上每一个像素点的荧光组分可以由此来确认(图 1)。为何选择活体多光谱荧光成像? 选择活体MS FLI 有两大原因:1-在组织自体荧光的特定范围内对波长较短的报告基因进行成像时,可以抑制自体荧光背景信号。2-在利用带有重叠谱的波长较长的报告基因(如 NIR)进行成像时,可以抑制交叉反应对独特的报告基因实现清晰的检测。为了了解这两大原因,首先有必要了解小鼠组织自体荧光的基础知识,及其在荧光光谱不同范围中的成像。下图 2 显示了在采用绿/红、蓝/绿滤光片和 NIR 滤光片组合(2)时小鼠组织典型的天然自体荧光特性。值得注意的是绿/......阅读全文
活体成像——APIR-MALDI/LAESI技术
了解细胞的内部成分是理解健康细胞不同于病变细胞的关键,但是,直到目前为止,唯一的方法是观察单个细胞的内部,然后将其从动物或植物中移除,或者改变细胞的生存环境。但是这么做的话,会使细胞发生变化。科学家还不是很清楚一个细胞在病变时与健康细胞的差别,或者当它们从一个环境移到另一个环境中产生的变化。来自华盛
什么叫做活体组织检查?
活体组织检查,是从病人身上可疑的病变组织上,取下一小块组织,送病理科惊醒细胞形态学检查的一种诊断方法。这项诊断技术,一般情况下准确可靠,是临床工作中相当重要的诊断方法,对于肿瘤的诊断尤为重要。做好此项工作,病人、临床医师、病理医师,三者必须密切合作。因此,病人对此项工作,应当有一个概括的了解。“
活体电穿孔法介绍1
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1
精诺真活体成像系统
1、【仪器名称】:精诺真活体成像系统。 2、【仪器型号】:IVIS 200。 3、【生产厂家】:美国精诺真(Xenogen,Inc.)公司(龙脉得生物技术有限公司代理)。 4、【检测适用范围】:用于提供LPTA动物模型靶基因在体内的实时表达和对候选药物的准确反应,还可以用来评估候选药物和其他化
液泡系的活体染色实验
实验方法原理 中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料 蟾蜍试剂、试剂盒 中性红染液Ringer氏液仪器、耗材 光学显微镜手术器材解剖盘载片盖片吸水纸实验步骤 一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察
活体电穿孔法介绍3
肝 脏由于肝脏的生理代谢十分旺盛,因此外源基因在肝脏中的表达时间往往很短暂,而且表达产物的水平也较低。为减少出血,可从小静脉注入,然后在肝脏上施加电场,能显著增强基因的表达。睾 丸相对于其他的转基因方法,活体电穿孔法可使外源基因在睾丸中产生大量和持久的表达。此外,很多研究人员希望利用活体电穿孔法将外
活体流式细胞仪
活体流式细胞仪(In vivo Flow Cytometer, IVFC)是一种新的生物医学光学仪器,结合活体(近红外)实时高速影像方法和体外流式细胞仪的概念,可实时检测活体CTC并可以进行定量分析与检/监测,可用于实验室对肿瘤治疗效果的早期实时监测及评估,药物的早期筛选等。IVFC技术原理是:带有
液泡系的活体染色实验
实验方法原理中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料蟾蜍试剂、试剂盒中性红染液Ringer氏液仪器、耗材光学显微镜手术器材解剖盘载片盖片吸水纸实验步骤一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察1. 方
液泡系的活体染色实验
实验方法原理中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料蟾蜍 试剂、试剂盒中性红染液
微透析活体取样技术介绍
一. 微透析技术的基本原理和方法 微透析(Microdialysis)技 术是从上世纪八十年代发展起来的一种微量生物化学采样、检测技术,其基本原理是采用具有一定截留分子量的纤维半透膜制成极细的微透析探头(Microdialysis Probe,MDP),将探头埋入待测的组织区域内,
活体电穿孔法介绍2
电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时,无法造成细胞膜表面状态的改变,因而外源D 不能进入细胞内。电压过高时,局部组织积聚过多热量,造成细胞的死亡或组织失去功能,即使外源基因导入细胞,也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多
小动物活体成像原理
体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或 DNA,而荧光技术则采用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和 FITC、Cy5、Cy7 等荧光素及量子点 (quantumdot,QD) 进行标记。小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷
活体GFP绿色荧光成像系统
系统提供动物活体绿色荧光蛋白的实时观察与成像等一系列的荧光检测。能够应用在像深度肿瘤,大动物等活体肿瘤追踪观察成像研究。 该设备是一个高灵敏度的图像成像工作系统,主要利用特定波长的激光进行激发后,通过高灵敏度的致冷CCD进行实时检测后,获得所需的各类 特性的图像,有利于进一步的分析作用 。
活体电穿孔法介绍(二)
电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时,无法造成细胞膜表面状态的改变,因而外源D不能进入细胞内。电压过高时,局部组织积聚过多热量,造成细胞的死亡或组织失去功能,即使外源基因导入细胞,也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多为20
要不要动物活体实验
我在带学生做动物实验.每个纲都有一种代表动物.虽然是老师,但我的心中很沉重.由于人类自身的需要,有时候不得不利用动物做活体实验或活体解剖.从某个角度来说,这是残忍的,但是为了人类自身,不得不做.一番悲天悯人后,不得不承认,人类的医学、药物学和生物学等诸多学科的发展离不开活体实验.这个残酷的现实似
活体电穿孔法介绍(一)
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1
活体荧光成像系统介绍(一)
一、 技术简介活体生物荧光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项分子、基因表达的分析检测系统。它由敏感的CCD及其分析软件和作为报告子的荧光素酶(luciferase)以及荧光素(luciferin)组成。利用灵敏的检测方法,让研究人员
活体叶面积仪在蔬菜作物叶面积活体测算中的应用
以往,叶面积的测算方法大多需离体测量,对植株伤害大,影响产量和品质指标,且不宜作连续性动态调查。而现在应用活体叶面积仪进行测算则可以完美解决这个问题。 叶片是蔬菜作物制造营养物质的器官, 光合面积的多少、叶片的分布及光合效能的高低是产量形成的基础,有的蔬菜作物其叶片本身就是产品器官。因
活体光学成像技术之光学活体成像前动物脱毛的必要性
在上几期的文章中,我们分别介绍了荧光成像与生物发光成像的比较、荧光蛋白、荧光染料的挑选方法。当大家选择了合适的标记方法并建立成像模型(药物注射、肿瘤注射等)后,需要对实验动物进行活体成像观察。在成像前,对实验动物进行完全脱毛是非常重要的步骤,直接关系能否获得高质量的成像数据。今天将为大家详细介绍成像
WJ2005活体基因导入仪
在当今世界DNA疫苗和基因治疗的研究中,一个十分重要的技术难关是如何提高将基因导入动物活体细胞内的效率。研究和开发能将外源性DNA安全高效地导入组织细胞中的仪器是解决这个问题的关键。采用特定的电场使活体细胞处于脉冲电场之中,能显著地增强细胞膜的通透性,从而使DNA分子能大量的进入细胞内,提高DNA疫
重组MVA活体免疫染色实验
基本方案 实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记
用CRISPR实现基因转录活体成像
最近,日本的一个研究小组开发出一种实时成像方法,用于内源基因转录活性和核定位的同步测量。研究人员用该方法来检测亚基因组范围的流动性变化,这取决于小鼠胚胎干细胞中多能性相关基因的活性。 Hiroshi Ochiai博士和他的同事Takeshi Sugawara博士、Takashi Yamamoto
活体成像:把癌症抓个现行
在我们展示影片时,当人们看到肿瘤病变如何演化,都惊讶地站了起来。这是一种认知上的改变。活小鼠体内癌症细胞的影像显示了黑色素瘤细胞如何侵入皮肤组织 当Mikala Egeblad完成第一个活鼠体内肿瘤细胞的活动影片时,她兴奋不已。在那之前,她已经对显微切片上的样本进行了研究。不过在活的动物体内观
-Cell:活体实时追踪癌症及衰老
在发表于1月18日《细胞》(Cell)杂志上的一项研究中,来自北卡罗来纳大学Lineberger综合癌症中心的研究人员开发了一种新方法,通过一种与衰老和肿瘤生长密切相关的基因看到了小鼠中这些过程的影像。 研究人员早就知道,p16INK4a (p16)基因通过一种称作“细胞衰老”的重要肿
重组MVA活体免疫染色实验
实验方法原理活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一抗辣根
活体组织检查的简介和目的
活检是“活体组织检查”简称,亦称外科病理学检查,是指应诊断、治疗的需要,从患者体内切取、钳取或穿刺等取出病变组织,进行病理学检查的技术。 它是诊断病理学中最重要的部分,对绝大多数送检病例都能做出明确的组织病理学诊断,被作为临床的最后诊断。 活检目的 (1)协助临床对病变作出诊断或为疾病诊断
关于术前活体组织检查的介绍
是指在治疗性手术前或在其它治疗(如放疗、化疗)前所做的活检。一般是取一小部分病变组织(如病变小又位于体表者常常全取病变)送病理活检,经甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色,需3~7天才能发诊断报告。其目的是明确诊断,以便临床择期采取相应的手术或其它治疗措施。这样的活检多在门诊进行,而且只取小块组织
活体组织检查的注意事项
注意事项 (1)取材部位要准确,要避开坏死组织或明显继发感染区,在病变与正常组织的交界处取材,要求取到病变组织及周围少许正常组织,其大小一般以1.5cm×1.5cm×0.2cm为宜。 (2)取材应有一定的深度,要求与病灶深度平行的垂直切取,胃黏膜活检应包括黏膜肌层。 (3)有腔标本应取管壁的
简述活体组织病理检查的内容
活体组织病理检查(英文:In vivo pathology,简称:活检)是采取活体组织进行形态学检查是作出疾病诊断的重要方法。 活检主要用于肿瘤和非肿瘤性疾病、良性和恶性肿瘤的鉴别,判断恶性肿瘤生长、侵犯、转移的程度和范围,以及对疾病的发展程度或治疗反应进行观察等。根据取活检时应用的器械和方式
植物活体叶片测定仪简介
传统的植物叶面积测量方法,往往是离体测量,也就是将叶片采集下来之后再测量叶面积,而叶面积测量仪既可以离体测量也可以活体测量。对于植物生长的影响更小,学校或科研机构都可以采购该仪器用于植物生理研究。 叶面积测量仪所采用的测量方法,主要是图形分解法。图形分解法是根据植物叶片的形状特征总结出近似形状