RealspaceandrealtimedynamicsofCRISPRCas9visualizedby...（一）
Real-space and real-time dynamics of CRISPR-Cas9 visualized by high-speed atomic force microscopyAbstractThe CRISPR-associated endonuclease Cas9 binds to a guide RNA and cleaves double-stranded DNA with a sequence complementary to the RNA guide. The Cas9–RNA system has been harnessed for numerous applications, such as genome editing. Here we use high-speed atomic force microscopy (HS-AFM) &nbs......阅读全文
Dynamic－Monitoring－ofCellular－Remodeling－Induced－bythe－Transforming－Growth2
Results and discussionData acquisition demonstrated a linear increasing of the CI values in control cells during the time interval observed. However,
体积是CRISPRCas9的一半的新型基因编辑工具CasΦ
基因编辑（gene editing），又称基因组编辑（genome editing）或基因组工程（genome engineering），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行定点“编辑”，实现对特定DNA片段的修
体积是CRISPRCas9的一半的新型基因编辑工具CasΦ
基因编辑（gene editing），又称基因组编辑（genome editing）或基因组工程（genome engineering），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行定点“编辑”，实现对特定DNA片段的修饰。
基因编辑进展梳理－Part－II－基于CRISPRCas9的技术应用篇(一)
前言：近年来，CRISPR基因编辑技术正在席卷整个生物医学研究领域，上一期我们已先从CRISPR系统开发及机制研究方面梳理了2018年相关大事件。伴随着基础技术不断优化，CRISPR技术的应用也更加广泛，如动物造模、药物筛选、单碱基编辑技术、细胞谱系示踪、基础疾病研究、疾病诊断、体内编辑和遗传病校正
CRISPRCas9基因编辑技术简介
CRISPR-Cas9是继ZFN、TALENs等基因编辑技术推出后的第三代基因编辑技术，短短几年内,CRISPR-Cas9技术风靡全球, 成为现有基因编辑和基因修饰里面效率最高、最简便、成本最低、最容易上手的技术之一，成为当今最主流的基因编辑系统。一、什么是CRISPR-Cas系统CRISPR-Ca
realtime－PCR中内参基因的CT值
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致。如果加样量是一致的，而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题。理论上加入的DNA量一样多，内参的CT值应该都一样。如果你能肯定加样量是一致的，那说明你的样本要么降解了，要么就是你的实验处理对内参的量产生了影响，必须换一个基因做内参
realtime－PCR中内参基因的CT值
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致。如果加样量是一致的，而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题。理论上加入的DNA量一样多，内参的CT值应该都一样。如果你能肯定加样量是一致的，那说明你的样本要么降解了，要么就是你的实验处理对内参的量产生了影响，必须换一个基因做内参
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Realtime－PCR实验心得和RNA提取心得
并不是所有的实验都可以做real－time的，技术路线要选好当你的基因表达量少或有些不表达具体就是做普通pcr跑胶条带比较弱，不是很亮的情况下个人觉得最好不要选择real，不容易做好，特别是融解曲线用sbgr green染料做的话，引物设计时扩增片断最好小于250bp，太长了不好扩预实验先rt－pc
引物设计原则（Principle－of－realtime－quantiation－PCR－primer－）
1、引物的长度一般为15-30bp，常用的是18-27bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74°C，不适于Taq DNA聚合酶进行反应。2、引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错配。引物3’端出现3个以上的连续碱基，如GGG或CCC，也会使错误
realtime－PCR中内参基因的CT值
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致。如果加样量是一致的，而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题。理论上加入的DNA量一样多，内参的CT值应该都一样。如果你能肯定加样量是一致的，那说明你的样本要么降解了，要么就是你的实验处理对内参的量产生了影响，必须换一个基因做内参
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Realtime－PCR与RTPCR的区别
实时荧光定量PCR原理所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。1．内标在传统定量中的作用由于传统定量方法都是终点检测，即PCR到达平台期后进行检测，而PCR经过对数期扩增到达平台期时，检测重
Realtime－PCR－数据导出－——－ABI仪器篇（二）
• 6. StepOne阈值（Threshold）：选中孔板中所有的数值，如下界面选择log、Target对话框• 将每个基因的Tredshold Auto勾选掉，阈值数值调整范围原则在指数增长期。阈值数值调整范围原则在指数增长期，该范围中，曲线斜率相同，ΔCT值不变 • 注意同
realtime－PCR中内参基因的CT值
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致。如果加样量是一致的，而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题。理论上加入的DNA量一样多，内参的CT值应该都一样。如果你能肯定加样量是一致的，那说明你的样本要么降解了，要么就是你的实验处理对内参的量产生了影响，必须换一个基因做内参
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实时荧光定量PCR（RealTime－PCR）实验流程
一、RNA的提取(详见RNA提取及反转录)不同组织样本的RNA提取适用不同的提取方法，因为Real-Time PCR对RNA样品的质量要求较高，所以，正式实验前要选择一款适合自己样品的提取方法，在实验过程中要防止RNA的降解，保持RNA的完整性。在总rna的提取过程中，注意避免mRNA的断裂;取2u
realtime－PCR中内参基因的CT值
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realtime－PCR负对照有信号问题分析
引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。 引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的 mix 试剂盒。 模板有基因组的污染：RNA 提取过程中避免基因组 DNA 的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。
CRISPRCas9基因编辑的两种不同编辑实验流程的应用（一）
IDT Alt-R® CRISPR-Cas9基因编辑系统 IDT（Integrated DNA Technologies）作为核酸定制合成领域的知名企业，依托30年来的技术研发，推出了Alt-R®系列CRISPR-Cas9基因编辑产品，通过对gRNA序列、Cas9核酸酶优化，对RNP转染效率、同
Dynamic－Monitoring－ofCellular－Remodeling－Induced－bythe－Transforming－Growth1
The plasticity of differentiated adult cells could have a great therapeutic potential, but at the same time, it is characteristic of progression of se
从RNA的提取到PCR——Realtime－PCR经验
一 引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要，因为real time pcr的检测灵敏度比较高，所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道，还有几点必须注意：1，引物的错配率（引物错配形成引物二聚体，但是SYBR照样能嵌入进去，结果导致实验结果的误差很大，重复性也不好）。2，引物的特
研究人员开发一种利用CRISPRCas9修复特定类型的基因突变
在一项新的研究中，来自美国马萨诸塞大学医学院的研究人员开发出一种利用CRISPR-Cas9和一种很少使用的DNA修复途径编辑和修复一种特定类型的与微重复（microduplication）相关的基因突变。这种可编程基因编辑方法克服了之前在基因校正中所遭遇的低效率。相关研究结果于2019年4月3日