用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMPHiRange检测（一）
简介在这篇应用文献中，我们展示了如何用SpectraMax®i3、SpectraMax®Paradigm®和SpectraMax®M5e多功能微孔板读板机进行可靠的、高通量的HTRF®检测，并具有完美的Z’因子和高重复性的EC50值。HTRF®是CisbioBioassays公司开发的一项检测生物分子相互作用的多用途技术1。这项技术结合了荧光共振能量转移(FRET)技术和时间分辨(TR)荧光测定，可消除短寿命的背景荧光。这一检测使用供体和受体荧光基团。当供体和受体彼此足够接近时，能量源(如氙闪灯)激发供体使能量转移到受体上，受体发射出特定波长的荧光。HTRF使用4种专门的荧光基团，能够组合成一对供体-受体TR-FRET基团。供体为铕(Eu3+)的穴状化合物和铽(Lumi4TM-Tb)的穴状化合物，其长寿命荧光可以用于时间分辨荧光检测中1。两种受体分别为XL665和d2，用于HTRF检测中。这两种受体的激发光谱均与HTRF供体的发......阅读全文
用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMP－HiRange检测（一）
简介在这篇应用文献中，我们展示了如何用SpectraMax®i3、SpectraMax®Paradigm®和SpectraMax®M5e多功能微孔板读板机进行可靠的、高通量的HTRF®检测，并具有完美的Z’因子和高重复性的EC50值。HTRF®是CisbioBioassays公司开发的一项检测生物分
用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMP－HiRange检测（二）
Z’ 因子由阴性(无cAMP，无cAMP-d2)和阳性质控(无cAMP)计算得到2。利用SoftMax® Pro软件生成和分析数据，包含一些预设的HTRF实验模板以简化检测和分析。结果使用SoftMax Pro软件的4-参数曲线拟合如上所述进行数据分析和做图。依据表2的读板机参数设置获得最佳结果
SpectraMax－M系列微孔板读板机应用集锦（一）
引领微孔板检测系统的行业标准历经13年发展，SpectraMax® M系列多功能微孔板读板机由于其优异的检测表现、可靠的性能、深受广大科研工作者的信赖，已然成为行业标准的引领者。可以根据应用需求轻松升级满足您的检测。仪器设置和数据处理都可借助于专业的SoftMax® Pro软件完成，所有
利用SpectraMax－i3x多功能微孔板读板机检测功能对...（一）
利用SpectraMax i3x多功能微孔板读板机检测功能对于细胞活力和细胞毒性的评价优势1.仪器具有超高灵敏度化学发光检测功能，最低至10个细胞/每孔2.微孔板读板高度自动优化设置，可提高检测信号强度 软件预置3.软件预置模板可以更快分析出检测结果 简介SpectraMax i3x是Molecul
使用SpectraMax微孔板读板机检测QuantiT－PicoGreen－dsDNA实验－－一
简介双链DNA通常使用微孔板读板机通过测量DNA溶液的260nm吸收光进行定量。然而，这种方法通常在微孔板读板机上只能检测到最低250ng/mL的浓度。对于生物学应用涉及到小体积样品，如新一代测序和扩增产物定量时，更灵敏的方法才能满足需求。Life Technologies公司的Quant-iT
SpectraMax－M系列微孔板读板机应用集锦（三）
应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析炎症反应的一个重要步骤是细胞表面抗原与血管中免疫细胞的特异性结合。因此，对这些分子变化的及时监控，如VCAM, E-selectin，以及内皮细胞上的HLADR等等，我们用多通道荧光读取人原代细胞表面的炎症标记，并在此基础上评估不同介质对炎症反应的调节作用。
利用SpectraMax－i3x多功能微孔板读板机检测功能对...（二）
ATP标准曲线既可以验证试验条件也可以用来计算细胞内ATP的含量。因此ATP标准品浓度范围从1nM至10uM产生的化学发光信号范围可覆盖整个不同细胞数目孔中产生的信号值(图二)，检测的线性范围大于四个数量级。 经十字孢碱(staurosporine)和茴香霉素 (anisomycin)等化合物
SpectraMax－M系列微孔板读板机应用集锦（二）
软件验证对于在GLP或GMP实验室工作的科研人员，SoftMax Pro软件验证方案提供了最为全面的记录文档和可用于验证GxP管理员功能，软件运行和分析能力的工具。- 验证时间从6个月降低到3天支持平行线分析，4-P和5-P曲线拟合验证- 全面复杂的针对常规实验计算的检测- 即时可用于OQ验证检测的
SpectraMax－M系列微孔板读板机应用集锦（四）
使用NanoOrange蛋白试剂盒传统的比色方法，如280吸光，BCA，Bradford或Lowry法，当使用微孔板格式时灵敏度不佳。来自Life Technologies公司的NanoOrange® 蛋白定量试剂盒在多孔板格式的动态区间可达 10 ng/mL到10 μg/mL。此应用文章展
使用SpectraMax微孔板读板机检测QuantiT－PicoGreen－dsDNA实验－二
- 高浓度范围标曲可以浓度从1 ng/mL制备到1 μg/mL，低浓度范围标曲可以从25 pg/mL制备到25 ng/mL。对于高浓度范围标曲，按Table 2中稀释方案稀释；对于低浓度范围标曲，40倍稀释2μg/mL溶液制备50 ng/mL溶液，参考Table 3中的稀释方案。 注意：此篇
利用－SpectraMax－iD3－微孔板读板机检测内源色氨酸荧光
介绍蛋白质的内源荧光主要来源于芳香族氨基酸如色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。在水中，色氨酸的最大激发光波长在270-280nm左右而其发射光波长峰值接近350nm。蛋白的发射光谱对溶剂的极性和外界环境十分敏感。当蛋白质变性时，色氨酸残基会暴露在水中而其发射波长会变长。这种发射波长峰值的改变可以用来检测蛋白
利用多功能微孔板读板机和MycoAlert支原体检测试...（一）
利用多功能微孔板读板机和MycoAlert支原体检测试剂盒进行相应污染物评价这篇应用文章介绍了如何利用Molecular Devices公司的具有化学发光的微孔板读板机进行相应检测，仪器和试剂盒组合简单易操作，进行相应检测时表现出很高的灵敏度。两种类型的检测试剂盒均可在Molecular D
使用SpectraMax－M5e读板机进行HTRF－cAMP－dynamic－2和IPOne检测－－一
简介SpectraMax® M5e多功能微孔板读板机具有双单色器，能够进行荧光、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振、光吸收和化学发光检测。它具有HTRF®(均相时间分辨荧光)认证的优势，使得生命科学和药物发现研究者们通过TRF检测的高度灵活性提高产出。HTRF®是Cisbio Bioassays公
如何优化SpectraMax－Paradigm多功能微孔板检测仪进行Transcre...
如何优化SpectraMax Paradigm多功能微孔板检测仪进行Transcreener荧光偏振检测试验简介这篇文章主要描述了当使用Molecular Devices公司推出的SpectraMax® Paradigm® 微孔板检测仪检测Bellbrook 实验室的Transcreener荧光偏振
利用多功能微孔板读板机和MycoAlert支原体检测试...（二）
结果我们利用Lonzede公司的MycoAlert试剂盒针对所有发光型微孔板读板机进行灵敏度评价，针对于MycoAlert试剂盒质控样品在1:8稀释倍数关系时获得Ratio＞1.2，而针对于MycoAlertPLUS试剂盒质控样品在1:1000稀释倍数关系时可获得Ratio＞1.2。所有的Molec
使用SpectraMax－M5e读板机进行HTRF－cAMP－dynamic－2和IPOne检测－三
仪器设置波长、延迟和整合设置都已针对基于双单色器的SpectraMax M5e读板机进行了优化。尤其注意，XL665/d2的最佳发射波长为668nm而非HTRF产品信息中所说的665nm。结果最佳结果来自基于细胞的cAMP测定，其使用384-孔微孔板并以每孔大约4,000CHO-M1细胞接种(40
使用SpectraMax－M5e读板机进行HTRF－cAMP－dynamic－2和IPOne检测－二
IP-One测定CHO-M1细胞按上述方法培养。在测定前一天，细胞以每孔10,000?40,000接种于含有完全生长培养基的384-孔微孔板中。第二天，使用浓度范围从15 nM到33 μM的碳酰胆碱刺激细胞(刺激缓冲液包含用于准备碳酰胆碱浓度的氯化锂溶液)。刺激一小时后，IP1-d2偶联物、
如何使用M5－多功能微孔板读板机和IMAP®－荧光偏振...（一）
如何使用M5 多功能微孔板读板机和IMAP® 荧光偏振检测平台进行激酶活性的分析？介绍 蛋白激酶在调节许多细胞反应过程时起着核心的作用。近年来已经成为癌症和其它许多疾病药物重要的作用靶点。IMA P是Molecular Devices 公司推出一种快速、非放射性的激酶检测技术，由于技术本身特点其
EMax－Plus－微孔板读板机应用Molecular－Devices
介绍随着光吸收法可以满足越来越多的应用检测领域，终点法读板机在实验室中的占有率也越来越高。例如ELISAs方法进行细胞因子定量和Bradford法进行蛋白定量。本篇应用就是要着重比较使用Bradford法进行蛋白定量检测时，Molecular Devices公司最新的产品EMax® Plu
如何使用M5－多功能微孔板读板机和IMAP®－荧光偏振...（二）
结合反应步骤1.将75%的结合缓冲液A与25%的结合缓冲液B混合，制备结合缓冲液；步骤2.将结合试剂以1:600倍稀释成结合缓冲液，得到结合反应液；步骤3.移出60ul结合反应液到每个检测孔和校正标准孔中(包括背景孔样本)步骤4.室温避光孵育1小时 在SoftMax Pro软件上设置模板，并在Spe
如何使用M5－多功能微孔板读板机和IMAP®－荧光偏振...（三）
结果SoftMax Pro软件中预置的IMAP 荧光偏振模板会自动计算出水平偏振均值和垂直偏振均值(mP值)，总的荧光强度，标准方差和CV值。每一组试验样品的组群一栏中，模板会自动扣除背景样品的荧光偏振值，然后计算出最小偏振mP值。也可根据相应的校正曲线计算出样品磷酸化比率。(See IMA
应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性（一）
前言报告基因对于基因表达的研究来说是非常有用的工具，它可以代替要研究的目的基因，从而帮助我们了解目的基因的信号通路和相关的疾病。荧光素酶是最常用的报告基因，使用光度计和化学发光功能的微孔板读板机我们可以很容易的检测到荧光素酶，另一方面，由于在细胞实验中其背景较低，因此具有很高的灵敏度。我们通常用萤火
利用Sword－ELISA－Boosters在皮克水平下检测炎性细胞因子
传统的 ELISA ( 酶联免疫吸附实验 ) 方法使用辣根过氧化物酶 (HRP) 底物3, 3’ , 5, 5’ -四甲基联苯胺 (TMB) 通常无法检测低丰度分析物，例如炎性细胞因子。SwordDiagnostics公司开发出新一代ELISA检测技术-Sword ELISA Booster，可
利用Sword－ELISA－Boosters在皮克水平下检测炎性细胞因子
前言 传统的 ELISA ( 酶联免疫吸附实验 ) 方法使用辣根过氧化物酶 (HRP) 底物3, 3’ , 5, 5’ -四甲基联苯胺 (TMB) 通常无法检测低丰度分析物，例如炎性细胞因子。SwordDiagnostics公司开发出新一代ELISA检测技术-Sword ELISA Boo
利用Sword－ELISA－Boosters在皮克水平下检测炎性细胞因子
前言传统的 ELISA ( 酶联免疫吸附实验 ) 方法使用辣根过氧化物酶 (HRP) 底物3, 3’ , 5, 5’ -四甲基联苯胺 (TMB) 通常无法检测低丰度分析物，例如炎性细胞因子。SwordDiagnostics公司开发出新一代ELISA检测技术-Sword ELISA Boo
均相高通量方法在活细胞GPCR功能性和表面受体...（一）
均相高通量方法在活细胞GPCR功能性和表面受体结合试验中的研究介绍：G蛋白偶联受体（GPCR）是目前已知细胞表面受体家族中最大的一个分支，目前的药物筛选中有40%是针对GPCR进行的。先导化合物的筛选过程中，首先要针对这些潜在药物（化合物）进行疗效的评估（例如在心血管疾病及其它领域），如果想充分了解
如何利用微孔读板机进行微量DNA和蛋白的高通量检测？
介绍在遗传学和分子生物学中，对核酸和蛋白进行定量是许多复杂实验必要的上游检测。虽然已有多种检测方法，但是最常用的仍然是紫外分光光度法。紫外分光光度法的原理是利用分子在固定波长范围吸收光和散射光，在朗伯比尔定律(方程式1)的基础上计算待测物质的浓度。这种方法还需要提前知道样品的摩尔消光系数和通路长度。
细胞系开发过程中IgG检测流程的简化
简介在不同的研究人员中，以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员，例如 HPLC 和表面干涉
细胞系开发过程中IgG检测流程的简化
介 在不同的研究人员中，以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。最终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步 ( 图 1 )。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员，例如 HPLC 和表面干
如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测
点击次数：10296 发布日期：2018-11-14 来源：本站 仅供参考，谢绝转载，否则责任自负 引言 活性氧 (Reactive oxygen species，ROS) 是 一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应 活性的一类含氧分子，参与细胞信号转 导、免疫防御