胶原酶消化法—培养脐带间充质干细胞

人脐带间充质干细胞具有高度分化潜能,基因稳定、不易突变,不会引起肿瘤;无需配型、无排异,广泛应用于疾病治疗及抗衰老研究。目前,在美容行业及针对亚健康群体的应用,也越来越引人注目。脐带间充质干细胞脐带是由包膜、华通氏胶、脐静脉、脐动脉脐构成。脐带间充质干细胞存在于华通氏胶中。由于存在数量少,用胶原酶消化后获取的细胞量很少。另外,一般的胶原酶消化法获取细胞时,胶原酶对细胞的伤害较大,培养出来的细胞状态差。贴块方法培养人脐带间充质细胞是普遍采用的方法,但是,细胞从组织中爬出来的时间长(10-20天,甚至更长)。我们经过不断的摸索,找出一个用胶原酶消化获取脐带间充质干细胞的方法。具体操作方法如下:① 在剪断连接婴儿端和母亲的脐带后,立刻用脐带夹夹住,防止内部污染。装入无菌袋(容器)中,送进实验室。② 在生物安全柜或超净工作台内,取出脐带,连同脐带夹用75%的酒精泡2min(50ml离心管或250px皿)。如果脐带较长......阅读全文

小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材

实验概要小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材主要试剂含2% SP的DPBS、1 mg/mL胶原酶Ⅰ、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、摇床、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤冰上预冷含2% SP的DPBS。断颈法处死小鼠,取出其腹部脂肪组织,用预冷的含2%SP(Pen S

干细胞家族中的“美猴王”:间充质干细胞

作者:时玉舫 中科院上海生命科学研究院/上海交通大学健康科学研究所研究员   我们现在正在做一个国家973重大科研项目—关于间充质干细胞的分化控制和免疫调节研究,为其进入临床应用做一些基础性工作。  大家都知道孙悟空72变的能力,干细胞家族中的重要成员—间充质干细胞,其变换自己的本

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比......

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有何不同?近来,国家的干细胞的政策是一个接一个。对应的,来自用户的咨询也是一个接一个。大多数的问题是:现在都在说无血清培养基,无血清培养基和血清培养基到底有什么差别?差别很大,从用途方面简单说下你感受的可能更具体。如果你是提供间充质干细胞(MSC)药物

胎盘间充质干细胞的优势及用途

  优势  相较于其他干细胞,胎盘间充质干细胞具有来源方便,细胞数量充足,易于分离、培养、扩增和纯化,传代扩增30多代后仍具有干细胞特性。胎盘是目前证实干细胞的最佳来源。  用途  胎盘作为理想的间充质干细胞来源,在抗衰老及疾病治疗领域显示了其独特的功能,对于以下疾病的治疗有明显效果:  心脑血管系

关于人羊膜间充质干细胞的简介

  Miki等发现,培养的hMSCs除表达神经干细胞的特异性标志蛋白nestin外,还表达干细胞特异性转录因子八聚体连接蛋白4(octamer-binding protein4,Oct-4),且表达能力比骨髓间充质干细胞更强。近来报道证实了其有向三胚层细胞分化的潜能:外胚层(神经)、中胚层(骨骼肌、

什么是间充质干细胞?有什么作用?

从骨髓中分离出一种纤维原细胞,并证明其可在体外大量扩增,并具有定向分化的特征。干细胞在免疫抑制方面有了首例干细胞用于器官移植的案例。这篇发表在Stem Cells Translational Medicine上的案例报道展示了一例肾脏移植患者用自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导免疫耐受获得成功。

间充质干细胞开辟疾病诊疗新“航道”

“随着间充质干细胞技术在临床上的应用与推广,现在治疗不好的疾病,或许今后就‘迎刃而解’。”近日,广州医科大学附属第三医院产科主任、广州妇产科研究所所长陈敦金教授在接受《中国科学报》采访时连用两个“真的想不到”形容干细胞发展速度之快。 干细胞是机体的起源细胞,也是形成人体各种组织器官的始祖细胞。而

间充质干细胞的临床应用的介绍

  间充质干细胞临床应用于解决多种血液系统疾病,心血管疾病,肝硬化,神经系统疾病,膝关节半月板部分切除损伤修复,自身免疫性疾病等方面取得了重大突破,挽救了更多病患的生命。此外,间充质干细胞在神经系统修复及更多方面具有长远的发展前景。  间充质干细胞是干细胞的一个研究分支,干细胞是一类具有自我复制和多

胎盘间充质干细胞的功能及优势

  功能  具有免疫调节作用,通过负性免疫调节功能,抑制机体亢进的免疫反应,使机体免疫功能恢复平衡,从而可以用来治疗造血干细胞移植之后的免疫排斥反应以及克隆氏病、红斑狼疮,硬皮病等自身免疫系统疾病。  胎盘间充质干细胞是人体微环境的重要组成部分,移植间充质干细胞可以改变造血微环境,重建免疫系统,促进

胎盘间充质干细胞的特性及功能

  特性  具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为:上皮干细胞、神经干细胞、肝干细胞,肌细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。  功

胎盘间充质干细胞的安全性

  胎盘的采集简便易行,不会引起母亲和新生儿任何不适的感觉或产生任何不良的影响。过去胎盘通常作为废物丢弃或作为食材食用,而从胎盘中提取间充质干细胞进行保存,是宝贵的生命资源再生。  干细胞行业数据显示,胎盘间充质干细胞基因稳定、不易突变,动物实验证明无致瘤性,使用安全可靠,对适应症范围疾病治疗效果好

骨髓间充质干细胞的定义和来源

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层。

关于间充质干细胞的发展的介绍

  间充质干细胞的临床研究已经在许多国家开展,美国批准了60余项临床试验,随着间充质干细胞及其相关技术的日益成熟,我国也批准了多项临床试验,走入了间充质干细胞核心技术研发的舞台。我国已经大力加强干细胞研究工作的开展,包括国家昂赛细胞基因工程有限公司、细胞产品国家工程研究中心在内的多家权威研究机构以及

间充质干细胞代谢调控研究获进展

  近日,中科院深圳先进技术研究院医药所退行性中心管敏课题组在干细胞代谢调控的研究邻域取得新进展,相关论文发表于《干细胞》期刊上。  间充质干细胞(MSC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,临床应用潜力巨大。干细胞的分化受到衰老、营养、激素等内外复杂因素的影响,科研人员最新发现能量代谢可

间充质干细胞的归巢作用介绍

动物实验研究中发现,无论是静脉回输移植还是局部组织注射,MSC可快速迁移到机体炎症发生部位并滞留在炎症部位发挥作用。目前已发现多种趋化因子(如SDF1、c-Met, CCR1和CD44等)和多条信号通路(如PI3K、蛋白激酶B、细胞外信号调节激酶、p38等)参与MSC的归巢进程。

间充质干细胞:组织修复的理想“种子”

间充质干细胞培养   干细胞治疗虽争议不断,但却离我们越来越近。   英国《新科学家》周刊网站日前报道,一名因视网膜细胞变性而致盲的男子,通过试验性的干细胞疗法重见光明。可以说,在攻克许多医学难题方面,干细胞研究被学界寄予厚望。   在近日举办的2013年细胞治疗技术研讨会上,干细胞家族的重

间充质干细胞的生物学特性

间充质干细胞的生物学特性,而且还具备如下优点:①胎盘和脐带中的干/祖细胞更原始,有更强的增殖分化能力。②免疫细胞较为幼稚,功能活性低,不会触发免疫反应及引起移植物抗宿主病。③干细胞易于分离,纯度高,无肿瘤细胞污染。④扩增时培养体系能统一,便于质控。⑤可制成种子细胞冷冻,多次使用,冷冻后细胞损失小。⑥

骨髓间充质干细胞(MSC)原代培养与传代培养实验步骤

准备工作(1)试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗(青链霉素)、75%酒精、95%酒精、培养瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周龄,18~22g,雌雄不限)、胎牛血

红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓腔内具有很强增殖 能力及多向分化潜能的一类成体干细胞,在一定条件下其不仅可以分化为同源于中胚层的间质细胞,还可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、上皮样细胞、 心肌细胞、肝细胞等。近年来随着组织工程技术的快速发展,骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及其增殖特 性的相关研

什么是胶原酶消化法

就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的,所用胶原酶有不同类型:1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分

什么是胶原酶消化法

就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的,所用胶原酶有不同类型:1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分

间充质干细胞的的免疫调节介绍

MSC可通过旁分泌或细胞间接触发挥免疫调节作用,且其免疫调节具有很强的可塑性,可以说具有双向调节作用:根据局部微环境刺激因子的种类和数量不同,MSC可作出不同的反应。例如,在大量促炎因子(如IFN-γ,TNF-α等)刺激下,MSCs被激活转变为抗炎MSC2型,产生大量的NO/IDO等免疫调节因子以及

骨髓间充质干细胞的运输和保存方法

视气温状况、运输距离,客户与公司协商后选择下述一种运输方式:(1)T25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输。收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。(2)1ML冻存细胞悬液装于1.8M

人骨髓间充质干细胞的原代取材

实验概要人骨髓间充质干细胞的原代取材主要试剂75%酒精、含2% SP(Pen Strep)的DPBS、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、手术剪、手术镊、5 mL注射器、10 mL注射器、7号针头、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤人骨髓间充质干细胞取材,需在手术前与

小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材

实验概要小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材主要试剂75%酒精、含2% SP(Pen Strep)的DPBS、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、手术剪、手术镊、5 mL注射器、10 mL注射器、7号针头、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤①断颈法处死小鼠,用手术器械完整地

关于间充质干细胞的临床试验介绍

  2004年,Le Blanc等报道了首例半相合异基因间充质干细胞移植治疗GVHD获得成功,其后又报道了异基因配型不合的间充质干细胞移植治疗GVHD的有效性,并且认为在应用间充质干细胞治疗GVHD不需要严格的配型,其后又有多篇异基因未经配型的MSC治疗GVHD、促进造血重建的报道,其MSC来源涉及

关于骨髓间充质干细胞的分离方法介绍

  常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同,分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入,又有人

间充质干细胞的主要功能介绍

间充质干细胞可以分化为骨、软骨、肌肉或肌腱,为临床治疗各种创伤提供细胞来源;间充质干细胞还可以分化为心肌组织,在显微镜下,能观察到心肌组织中的细胞株出现自发搏动;用间充质干细胞分化为真皮组织,可覆盖于烧伤创面。

认识什么是间充质干细胞功能有哪些?

间充质干细胞,又称多能基质细胞,简称MSCs,是属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,包括:骨髓、胎盘、脐带、脂肪、粘膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、羊膜、脐带血等。在适宜条件下可分化为脂肪、骨、软骨等多种组织细胞。1976年,Freidenstein等首次发现在骨

MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞的传代培养

缩小细胞培养体积试验证明,MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中,面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量,一般使用此方法传代,每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌完全培养培养基(CCM)、PB