用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯...

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法:可以在几分钟内从复杂的原代细胞混合物中分离出很高纯度的目的原代细胞。用包被特异性抗体或抗IgG抗体可以分离出非常纯的原代细胞群体,而且有极好的回收率和存活率。依据细胞频率和标记表达水平的不同,原代细胞的纯度可达95%-99.9%。基本原理:已包被用包被特异性抗体磁珠与原代细胞表面相应分子特异性结合,或者抗IgG抗体磁珠与预先已与细胞表面分子特异结合的特异性抗体结合。磁珠携带与之结合的细胞吸附于分离柱/试管上,实现阳性细胞分离或阴性细胞分离。基本分类:免疫磁珠法分为阳性细胞分离法和阴性细胞法:阳性细胞分离法-磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞。阴性细胞分离法-磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞。一般而言,阴性细胞分离法比阳性细胞分离法的磁珠用量大。基本步骤:1、离心收集待分......阅读全文

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯...

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法:可以在几分钟内从复杂的原代细胞混合物中分离出很高纯度的目的原代细胞。用包被特异性抗体或抗IgG抗体可以分离出非常纯的原代细胞群体,而且有极好的回收率和存活率。

脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离

实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物(10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体)ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白(HAG。用P

免疫磁珠法分离细胞原理/MACS微珠/MACS分选柱

免疫磁珠法分离细胞原理        免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离。二、MACS微珠(Micro

技术强则药物强单个B细胞抗体制备技术

  如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。   1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。

流式细胞仪免疫磁珠亲和板结合分离法分选c-kit+肝癌细胞

肿瘤干细胞研究需要获取高纯度、高活力、高增殖能力的肿瘤亚群细胞,并尽量避免混杂细胞、低活力、低增殖能力细胞对细胞亚群特性的干扰。笔者在前期研究的基础上,比较了流式细胞仪分选(flow cytometry sorting,FCMS)、免疫磁珠分选(magnetic cell sorting,MACS)

免疫磁珠细胞分选的简介

把细胞用超级顺磁性的 MACS MicroBeads (MACS微型磁珠)特异性地标记,磁性标记完后,把这些细胞通过一个放在强而稳定磁场中的分选柱。分选柱里的基质造成一个高梯度磁场。被磁性标记的细胞滞留在柱里而未被标记的细胞则流出。当分选柱移出磁场后,滞留柱内的磁性标记细胞就可以被洗脱出来,这样就完

免疫磁珠细胞分选的简介

把细胞用超级顺磁性的 MACS MicroBeads (MACS微型磁珠)特异性地标记,磁性标记完后,把这些细胞通过一个放在强而稳定磁场中的分选柱。分选柱里的基质造成一个高梯度磁场。被磁性标记的细胞滞留在柱里而未被标记的细胞则流出。当分选柱移出磁场后,滞留柱内的磁性标记细胞就可以被洗脱出来,这样就完

技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术(一)

如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。 1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。随后的50年,

人抗磷脂抗体IgG(APLIgG)酶联免疫分析

人抗磷脂抗体IgG(APL-IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗磷脂抗体IgG(APL-IgG)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗磷脂抗体IgG(APL-IgG)水平。用纯化

偶联了PECAM抗体的顺磁玻珠分离内皮细胞的实验

实验概要本实验用以血小板内皮细胞粘附分子(PECAM或CD31)为靶分子的活性筛选技术分离和培养纯的人毛细血管内皮细胞。实验原理PECAM是130kDa内膜糖蛋白,属于细胞粘附分子的免疫球蛋白超家族。该分子在细胞中呈组成型表达,基本上为内皮细胞和血小板所独有,只有一些骨髓谱系的亚种例外。PECAM在

免疫学实验抗幽门杆菌IgG抗体介绍

  抗幽门杆菌IgG抗体介绍:   幽门螺杆菌感染是慢性胃炎的重要致病原因。幽门螺杆菌相关的慢性胃炎能引起对幽门螺杆菌的局部和全身性免疫反应,幽门螺杆菌感染后通过体液免疫而产生幽门螺杆菌抗体,这一反应构成了特异性地鉴定血清中HP抗体的基础,并企图通过血清学方法诊断和评价疗效。目前有许多用于检测HP

免疫学实验抗登革病毒IgG抗体介绍

  抗登革病毒IgG抗体介绍:   登革热病毒(Dengue virus)和森林脑炎病毒(forest encepha-litis Virus)分别是引起登革热和森林脑炎的病原体,登革热流行在广东、广西、海南一带,而森林脑炎发生在东北、西北的森林地区。这两种病毒与乙脑病毒同属黄病毒,形态结构也相似

人抗心磷脂抗体IgG(ACAIgG)酶联免疫分析

人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)水平。

免疫分析用磁珠简介

磁珠的由来1979年,挪威著名的化学工程师和发明家Ugelstad教授发明了一种方法可以合成出具单分散性的聚合物微球,它的粒径在0.5-100μm;1993年,又进一步合成具有磁性的相同微球。由于其在该领域的杰出贡献,1991年被授予“圣奥拉夫勋章”。具有磁性的微粒子即“Dynabeads®”,而不

免疫磁珠分离法的原理和操作办法

  一、免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)   1、原理   用包被在磁珠上的抗 E.coli O157:H7 特异性抗体捕获样品增菌液中的目标菌,然后在磁场作用下将磁珠从增菌液中沉淀,以磷酸缓冲液反复清洗,从而使 E.coli O157:H7

捕获包被法检测抗体和捕获包被法检测抗体

   捕获包被法(亦称反向间接法)ELISA,首要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。以目前常用的IgM测定为例,因血清中针对某种抗原的特异性IgM和IgG同时存在,则后者可搅扰IgM的测定。因此先将一切血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性I

特异性IgG抗体技术都有什么?

  1.盐析法  多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。  2.凝胶过滤法  蛋白质分子量不同,通过凝胶介质时的洗脱速度不同。血清蛋白的分级分离常用该法。按分子大小可分为3组:第1组:IgM和一些脂蛋白;第2组:IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组:白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。该法过滤条

免疫生物磁珠分离技术原理

免疫生物磁珠分离技术借助免疫生物磁珠捕获样品中靶物质,通过生物磁珠在磁场中的运动使靶物质(如病原微生物)分离。免疫生物磁珠由磁性载体和免疫配基结合而成。天然磁性材料可从磁性细菌中分离获得,如从磁性细菌体内提取纳米生物磁珠,在其表面联上大肠杆菌抗体后用于分离大肠杆菌,但该方法成本较高,因而多采用工业方

免疫生物磁珠分离技术原理

  免疫生物磁珠分离技术借助免疫生物磁珠捕获样品中靶物质,通过生物磁珠在磁场中的运动使靶物质(如病原微生物)分离。免疫生物磁珠由磁性载体和免疫配基结合而成。天然磁性材料可从磁性细菌中分离获得,如从磁性细菌体内提取纳米生物磁珠,在其表面联上大肠杆菌抗体后用于分离大肠杆菌,但该方法成本较高,因而多采用工

磁珠法提取核酸的操作技巧

最近有不少小伙伴问到磁力架,着实令我有点意外了,之前一直以为大家还是比较热衷柱式提取法,毕竟小编之前读研的时候,柱提法是我们实验室历代师兄师姐一路传承下来的,我们压根就没想过还有更快更便捷的方法,今天我们就来聊一聊这个已经开始流行的用于核酸(DNA&RNA)的纯化、片段分选的磁珠法。  说到磁珠法,

人毛细血管内皮细胞的分离—偶联抗PECAM抗体的磁珠的制备

实验材料抗人 CD-31(PECAM)单克隆抗体试剂、试剂盒PBS BSA仪器、耗材磁珠实验步骤1. 短暂振荡,使磁珠溶液均一。2. 用 PBS 稀释 PBS/BSA(4.0 mg/ml BSA)至 BSA 终浓度 0.2 mg/ml。3. 取 100 μl 磁珠(1 mg)加 2 ml 含 0.2

循环肿瘤细胞的检测方法

  近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C

ELISA试剂盒实验方法大起底

从样品中分离提纯同种试剂盒,是许多下游应用的关键一步,分离得到的细胞可以用于基因鉴定、大鼠小鼠ELISA试剂盒计数、生化分析、蛋白分离、宿主-病原体互作以及细胞间相互作用等研究。一款合适的分离试剂盒可以说是实验成功的保障,因为只有获得正确的ELISA试剂盒,下游的分析结果才可能准确。目前,市面上有多

人毛细血管内皮细胞分离—偶联了抗PECAM抗体磁珠筛选细胞

试剂、试剂盒PBS FCS仪器、耗材磁珠T25 板实验步骤1. 向“分离样品的制备”步骤10的细胞样品中加入 30 μl 偶联了抗 PECAM 抗体的磁珠。2. 细胞和磁珠混合物冰上保温 15 分钟。3. 磁体置于管侧 5 分钟,吸引筛选样品向磁体移动。小心吸弃上清,移开磁体。4. 向磁珠中加 2

常见免疫技术鉴析及化学发光纳米磁微粒(二)

4电化学发光技术原理电化学发光(ECL)是电场参与化学发光所产生的结果,是指通过施加一定的电压进行电化学反应:体系中电极表面的三丙胺TPA释放电子,进而释放质子成为自由基TPA*,同时,二价的三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+ 释放电子成为三价的三联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+。具有强氧化性的三

细胞亚群分析

实验概要对一群细胞依据是否表达特定蛋白进行亚群分析是细胞鉴定中的常用实验。一般通过特异性抗体标记细胞,通过流式细胞术或磁珠等方法分离细胞。实验原理利用抗原抗体反应,使表达目标抗原的细胞带上标记,通过流式细胞仪或磁珠,对带有标记的细胞进行分选/分析。这种方法结合流式细胞术和免疫染色,能够快速、大量、特

技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术(二)

3)微雕刻和ISAAC方法分选B细胞微雕刻技术原理[7]是基于软光刻微阵列芯片识别、克隆抗原特异性B细胞的方法。通过刺激多克隆B细胞,并将其逐个分布到芯片孔内进行培养产生抗体,然后将改芯片孔内抗体转印至相应的蛋白芯片,通过与目标抗原反应后,再与荧光抗体反应,最后根据荧光抗体染色结果,通过显微操作将分

HLA抗体的临床意义及检测技术

HLA抗体发现迄今至少有35年,并被证实与多种移植失败密切相关 :妊娠,输血,移植和细菌感染所致的交叉致敏等,都会产生各种抗体,这些抗体主要为抗HLA的抗体,少量为红细胞抗体和非HLA抗体.HLA抗体的临床意义1 与器官移植的关系:许多资料表明,HLA抗体可以导致针对移植物的免疫反应而发生超急排和加

磁珠分选与流式分选该如何选择?

目前常见的分选方法有两种,一种是流式分选,一种是磁珠分选,两种方案各有优势,下面我们分别来了解一下。1、什么是MACS 磁性分选?            答:首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞,然后把标记好的细胞过分选柱(分选柱周围会有磁铁),带磁珠的细胞就留在柱子上,不带磁珠的细胞就流走了,从而

抗幽门杆菌IgG抗体的详细介绍

  幽门螺杆菌感染是慢性胃炎的重要致病原因。幽门螺杆菌相关的慢性胃炎能引起对幽门螺杆菌的局部和全身性免疫反应,幽门螺杆菌感染后通过体液免疫而产生幽门螺杆菌抗体,这一反应构成了特异性地鉴定血清中HP抗体的基础,并企图通过血清学方法诊断和评价疗效。目前有许多用于检测HP抗体状况的商品性ELISA试剂盒,