StrataQuest定量分析方法:探索胞内原生生物与宿主细胞...3
体外原位成活与失活胞内病原体的诊断此图为体外活细胞和死细胞的定量分析。因为失活病原体不能够吸收DAPI,所以软件能够做出宿主细胞中病原体的区别。对样本进行EB-AO平行染色。StrataQuest识别细胞的胞质(绿色部分),细胞与细胞接触部分(橘色)。(A)AO灰阶图用于薄膜的检测(绿色部分),细胞边缘的确定(橘色部分)。(B)对粘连细胞进行详细分析。(C)反向回溯确定巨噬细胞拥有多于2个失活寄生虫。(E)拥有失活寄生虫的巨噬细胞的频率分析。(F)拥有不同数量失活寄生虫的吞噬细胞的频率分析。冰冻切片利用DAPI染色然后TissueQuest进行分析。DAPI的信号指出病原体的DNA并未退化。活检,活检,干燥前的病原体仍然具有活性。StrataQuest软件创建胞核(橘色)和核膜(绿色)。因此,DAPI阳性病原能够在宿主细胞的胞浆部分进行识别。此图为寄生负载的评估。(A)被感染的淋巴腺。灰阶图为DAPI+宿主细胞核和寄生虫DNA。......阅读全文
原生质体融合的发展与研究
1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是
糖原生成的调节与控制
糖原生成这一过程受到激素的控制,其中最主要的控制形式是对糖原合酶和糖原磷酸化酶的各种磷酸化作用。这是一种在激素活性控制之下受到酶调控的作用,而激素活性转而由其他多种因素调控。例如,相较于调控的变构系统,有很多不同的可能效应器。 肾上腺素当糖原磷酸化酶被磷酸化时会被激活;然而当糖原合酶被磷酸化时会被抑
气单胞菌属与邻单胞菌属
(一)气单胞菌属 气单胞菌属广泛分布于自然界,可从水源、土壤以及人的粪便中分离。本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。 1.生物学特性 (1)形态染色:革兰阴性短杆菌,大小为(1~4)μm×(0.1~1)/μm,菌体两端钝圆,单极鞭毛,运动极为活泼(除杀鲑气单胞菌外)。无芽胞,有窄的荚膜
生物制剂中宿主残余DNA检测技术与标准的发展趋势
生物制品中残留DNA检测标准的变化2015年3月底,中国食品药品检定研究院网站的国家药品标准物质目录中新增加了一个编号为410001的产品:CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(PCR-荧光探针法)。这个由中检院与中科院联合研发,由生物制药企业参与标定的试剂盒与现行美国药典(USP)建议的检测方法同步
原生质体培养的方法介绍
主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法(应用最广泛)、琼脂糖珠培养法。
原生质体的分离方法介绍
机械分离法 :常用于分离藻类原生质体,采用渗透方法使细胞发生质壁分离,用刀把细胞壁切破,使原生质体流出。(手工操作难度大,得率低,费时费力)酶解分离法:用酶(琼脂酶,果胶酶,纤维素酶等)将细胞壁分解。(条件温和,原生质体完整性好,活力高,得率高) 因此原生质体制备多采用酶解法,此法操作过程分为:取材
原生质体的鉴定方法介绍
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体(1)低渗胀破法:把原生质体放入低渗透溶液中,在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体,因为没有细胞壁,这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁,则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破,破碎后留下的残迹
原生质体分离的分离方法
(1)机械法分离:缺点:产量极低;应用的材料受限制;操作极费力(2)酶法分离:Cocking最早开展这方面研究,克服了机械法分离的缺陷,可分为直接法和顺序法两种。酶法可在短时间内获得大量原生质体,缺点是:不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
诱导原生质体融合的方法
诱导原生质体融合的过程中可用的方法有三种:物理法、化学法、生物法。将不同植物体细胞放在一起培养,必须通过一定的技术手段进行人工诱导。诱导方法有物理法和化学法两大类。物理法就是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合;化学法是用聚乙二醇等试剂作为诱导剂诱导细胞的原生质体融合,聚乙二醇简称为PEG;诱导
牙龈假单胞菌在结直肠癌病因中的有一定作用
2021年5月25日中山大学在CANCER RESEARCH杂志上发表了题为"Porphyromonas gingivalis Promotes Colorectal Carcinoma by Activating the Hematopoietic NLRP3 Inflammasome"的文章
微生物所新冠状病毒侵入宿主细胞机制研究获进展
继在流感病毒跨种传播机制研究中取得重大成果,并在《科学》和《柳叶刀》发文之后,中科院微生物研究所高福研究组又在新冠状病毒侵入宿主细胞机制研究中取得重要进展,研究成果于7月7日在《自然》杂志在线发表。 新冠状病毒,又称中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East Respiratory
Nanolive新冠肺炎疫情篇病原微生物迫害宿主细胞(二)
上篇我们主要跟大家聊了聊病原体中的微生物攻击宿主细胞一些研究。接下来我们再来聊聊病原体中的寄生虫与宿主的研究,所谓寄生虫(parasite)是指具有致病性的低等真核生物,可作为病原体,也可作为媒介传播疾病。寄生虫特征为在宿主或寄主(host)体内或附着于体外以获取维持其生存、发育或者繁殖所需的营养或
Nanolive新冠肺炎疫情篇病原微生物迫害宿主细胞(一)
无论是2003年的SARS病毒还是2019年来势汹汹的新冠肺炎病毒COVID-19,其实它们本身并不那么可怕,可怕的是我们不知道这些病原体是怎么攻击宿主细胞并导致发病的,我们怎么才能阻止它们迫害宿主细胞 。 细胞内病原体根据对宿主细胞资源的依赖程度,它们可分为两类:兼性和专性细胞内病原体。病毒、弓形
静电相互作用增强了刺突蛋白与宿主细胞的结合
美国西北大学的研究人员发现了新型冠状病毒臭名昭著的刺突蛋白中的一个新弱点,它阐明了一种相对简单的潜在治疗途径。刺突蛋白包含病毒的结合位点,该位点粘附在宿主细胞上,使病毒能够进入并感染人体。使用纳米级模拟,研究人员发现了一个带正电荷的位点(称为多碱基切割位点),该位点位于刺突蛋白上实际结合位点10纳米
全景组织细胞定量分析系统技术在新冠肺炎相关方向...3
TG在病毒分子机制研究中的应用发表文章节选流行性感冒和肺炎的分子机制研究 (日本东北大学医学研究院)致死性流感肺炎的严重程度取决于OX40L表达。由于OX40L能够与细支气管肺泡干细胞的流感病毒相结合,流感感染时通过增加细胞数量以介导上皮修复,并诱导其表面的OX40L表达从而刺激免疫反应。然而,宿主
细胞生物学名词解释(一)
1. 细胞(cell)细胞是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成, 是生物体的结构和功能的基本单位, 也是生命活动的基本单位。细胞能够通过分裂而增殖,是生物体个体发育和系统发育的基础。细胞或是独立的作为生命单位, 或是多个细胞组成细胞群体或组织、或器官和机体;细胞还能够进行分裂和繁殖
新研究或揭示肠道菌群紊乱致病奥秘
4月17日,海南大学生命健康学院刘柱教授团队发现,维氏气单胞菌C4(A.veronii C4)可通过细菌Ⅵ型分泌系统(T6SS)重塑宿主肠道菌群并致其紊乱,进而导致宿主患病。该发现揭示了细菌T6SS致病机理,可帮助挖掘新治疗靶点,为细菌性病害防控提供理论依据。相关研究成果已经发表于《国际微生物生态学
细胞转染原理及常见转染方法的比较(一)
实验原理:转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的
细胞质的基本信息
细胞质(cytoplasm)又称胞质、胞浆,是一种使细胞充满的溶胶状物质。细胞质的主要成分是胞质溶胶(一种凝胶状物质)、细胞器(细胞的内部亚结构)和各种细胞质内含物。。细胞质属于一种原生质,与原生质同样是由水、盐、有机分子及各种催化反应的酶所组成。其中,细胞质中约 80% 是水,通常是无色的。细胞质
科学家揭示微孢子虫“换装”真相
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/1/516113.shtm西南大学资源昆虫高效养殖与利用全国重点实验室微孢子虫科研团队揭示了微孢子虫感染体——孢原质的细胞膜来源,回答了微孢子虫发芽机制中的关键科学问题。日前,相关研究成果以《微孢子虫“换装”:
细胞生物基本方法:常用转化细胞
几种常用转化细胞和转化技术1)致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验1.取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分钟,滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入1875p
细胞合胞特化的概念
中文名称合胞特化英文名称syncytial specification定 义在合胞体胚层生成细胞膜分离细胞核之前,由母体细胞质相互作用所决定,即细胞的命运在形成细胞之前就已被指定了。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)
中大吴耀文eLife:肺炎细菌抵御人体细胞自噬的清除作用
一项新的研究成果揭示了细菌毒性效应子抑制细胞自噬的分子机制,该研究详细地阐释了嗜肺军团菌(Legionellapneumophila)利用其分泌的毒性效应子RavZ切除细胞自噬的关键蛋白质LC3-PE(磷脂酰乙醇胺修饰的LC3蛋白)的分子机制,嗜肺军团菌利用该机制导致宿主细胞自噬体无法形成,从而
常用的细胞转染方法
转染是将外源性基因导入细胞内的一种技术,是实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类:瞬时转染和稳定转染(永久转染)。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析;后者外源DNA
原代细胞的培养与建系3
(二)消化分离法组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易
干细胞与肝脏修复和再生3
干细胞的作用机制目前,干细胞具体的作用机制仍不十分明确。韩英教授综合以往的研究,提出了自己的观点。她认为:干细胞主要通过三方面在肝病治疗中发挥作用:1.通过转分化为肝细胞发挥替代作用;2.细胞融合机制;3.干细胞可分泌多种细胞因子,参与肝损伤修复,即干细胞的旁分泌机制。
原代细胞的培养与建系3
下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求: (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。 (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 (3)细胞活力 冻融前后细胞接种存活率和生长特性(生长繁殖曲线,分裂指数等)。 (4
异钙调素结合在质膜胞外位点上并导致胞内钙离子水平...
异钙调素结合在质膜胞外位点上并导致胞内钙离子水平上升钙调蛋白(CaM)是一种高保守性的细胞内钙离子感应器。在植物中,胞外CaM也作为一个多肽信号影响许多生理功能,但是其在细胞质外的结合位点至今仍存在争议。2009年5月,中科院植物所林金星研究组在《JBC》上发表文章,研究人员利用CaM交联QD系统对
活细胞内的生物正交反应研究获突破
北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组长期致力于发展活细胞内的外源化学反应,特别是生物正交消除反应的提出,丰富了生物正交反应的内容。最近,他们首次在活细胞的蛋白质上实现了“逆电子需求的狄尔斯—阿尔德反应”(简称“狄—阿”反应),并将其应用于蛋白质酶的激活。基于对“(逆)狄—阿”反应的解析,他们发现
细胞封装系统内高效氧气递送的生物仿生支架
近日,美国康奈尔大学的科学家开发了嵌套在细胞封装系统的生物仿生支架,可解决细胞封装系统氧气输送困难的问题。相关研究成果在《Nature Communications》发表,题为:A bioinspired scaffold for rapid oxygenation of cell encaps