原生质体的鉴定方法介绍
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体（1）低渗胀破法：把原生质体放入低渗透溶液中，在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体，因为没有细胞壁，这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁，则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破，破碎后留下的残迹仍保持半圆形的细胞壁。（2）荧光染色法：将原生质体放入离心管中，加入0.7mol/L甘露醇配置的 0.05%～0.1%荧光增白剂溶液，染色5～10min，离心、洗涤除去多余的染料，在荧光显微镜下观察。绿色光显示纤维素的存在，发出红色光的是没有纤维素的真正的原生质体。......阅读全文
原生质体的鉴定方法介绍
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体（1）低渗胀破法：把原生质体放入低渗透溶液中，在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体，因为没有细胞壁，这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁，则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破，破碎后留下的残迹
原生质体培养的方法介绍
主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法（应用最广泛）、琼脂糖珠培养法。
原生质体的分离方法介绍
机械分离法 ：常用于分离藻类原生质体，采用渗透方法使细胞发生质壁分离，用刀把细胞壁切破，使原生质体流出。（手工操作难度大，得率低，费时费力）酶解分离法：用酶（琼脂酶，果胶酶，纤维素酶等）将细胞壁分解。（条件温和，原生质体完整性好，活力高，得率高） 因此原生质体制备多采用酶解法，此法操作过程分为：取材
原生质体的纯化方法
原生质体的纯化方法：沉降法、漂浮法、界面法。
原生质体的应用介绍
由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选突变体5. 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究6. 用于分离细胞器和大分子7. 种质资源保存
原生质体分离的分离方法
（1）机械法分离：缺点：产量极低；应用的材料受限制；操作极费力（2）酶法分离：Cocking最早开展这方面研究，克服了机械法分离的缺陷，可分为直接法和顺序法两种。酶法可在短时间内获得大量原生质体，缺点是：不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
诱导原生质体融合的方法
诱导原生质体融合的过程中可用的方法有三种：物理法、化学法、生物法。将不同植物体细胞放在一起培养，必须通过一定的技术手段进行人工诱导。诱导方法有物理法和化学法两大类。物理法就是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合；化学法是用聚乙二醇等试剂作为诱导剂诱导细胞的原生质体融合，聚乙二醇简称为PEG；诱导
原生质体发生融合的介绍
由于在自然条件下，原生质体发生融合的频率非常低，因此在实际育种过程中要采用一定方法进行人为诱导融合。两株出发菌株制备好的原生质体可以通过化学因子或电场诱导的方法进行融合。 [3] 化学因子诱导是把两个亲株的原生质体混合在一起，加入融合剂聚乙二醇（ polyethylene glycol，PEG
植物原生质体的特点介绍
植物原生质体具有以下的特点： ①无细胞壁的物理障碍； ②能获得遗传性状和生理性状较一致的细胞群体； ③植物原生质体同样具有全能性； ④用组织培养方法可进行大量繁殖。 这些有利的特征决定了原生质体是一个极好的实验体系，在植物育种上有广泛用途。
原生质体融合的基本介绍
植物体细胞杂交（plant somatic hybridization）,又称原生质体融合（Protoplast fusion ）是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有
关于原生质体的基本介绍
原生质体是细胞壁以内各种结构的总称,也是组成细胞的一个形态结构单位，活细胞中各种代谢活动均在此进行。原生质体包括细胞膜（cell membrane）、细胞质（cytoplasm）、细胞核（nucleus）和细胞器（organelle）等。原生质体化学成分十分复杂,其组分也随着细胞不断的新陈代谢活
关于玉米原生质体的提取方法
一、酶解液的组成：1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8二、漂洗液的组成：山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5 mmol•L-1,硫酸铜0.01 µmol•L-1三、材料预处理： 取黄化叶片
原生质体的概念
原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
原生质体的培养
原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用 由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选
原生质体融合的融合过程介绍
将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。①杂交时间：植物细胞杂交是从细胞融合开始，到培育成的新植物体结束。a.原生质体制备：用酶解法去除细胞壁（纤维素酶和
拟南芥原生质体制备转化方法
实验概要本实验介绍了拟南芥原生质体制备转化操作流程。主要试剂1. 纤维素酶解液：试剂15ml酶液体系11-1.5﹪ Cellulase R10 (YaKult Honsha)0.225g干粉20.2-0.4﹪ Mecerozyme R10 (YaKult Honsha)0.045g干粉30.4M m
原生质体的细胞核的介绍
除细菌和蓝藻外，所有的植物细胞都含有细胞核，通常一个细胞只具有一个细胞核。细胞核位于细胞中央，一般呈圆形、卵圆形，或稍伸长，也有其他形状的，如某些植物花粉的营养核为不规则裂瓣。细胞核大小相差很大，直径般为10~20um，在光学显微镜下可以观察到，经过固定和染色后可以看到其内部构造，有核膜、核仁、
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出微
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出
原生质体的细胞膜相关介绍
细胞膜又称质膜，是指细胞质与细胞壁相接触的一层生物膜，在光学显微镜下不可见，须采用高渗溶液处理后发生质壁分离时，能在是原生质体表面看到一层光滑的薄膜。细胞膜的主要功能包括选择透性和调节代谢等。选择透性表现在能阻止可溶性蛋白质和糖等多种有机物从细胞内渗出，同时又能使水、无机盐和其他的必需营养物质进
关于原生质体的现生特性介绍
融合后的原生质体具有生物活性，但不具有细胞壁，无法表现优良的生产性状，不能在普通培养基上生长，必须设法让它长出细胞壁，所以将重新形成细胞壁的过程称为再生。再生培养基必须具有与原生质体内相同的渗透压，常用含有Ca2+、Mg2+或增加渗透压稳定剂的完全培养基。把融合的原生质体涂布于添加渗透稳定剂的高
关于原生质体融合的历史进展介绍
1960年，Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功； 1970年，Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合； 1971年，Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株； 1972年，Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的
概述原生质体的制备
原生质体是植物或微生物细胞去掉壁以后的内含物。原生质体的制备主要是在高渗压溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的原生质体，它保持原细胞的一切活性。 制备原生质体首先需要选择供融合的两个亲株。要求亲株的性能稳定并带有遗传标记，一般以营养缺陷型和抗药性等遗传性状为
植物原生质体的制备
植物原生质体的制备可以用于：（1）由于其具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；（2）具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；（3）通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。实验方法原理去掉植物细胞
植物原生质体的制备
实验材料 油菜或菠菜或烟草试剂、试剂盒 氯化钙、蒸馏水、2蔗糖、酶解液仪器、耗材 显微镜、离心机、离心管、剪刀、镊子、吸管、培养皿、载玻片、盖玻片
原生质体融合的原理
两个具有不同遗传性状的细胞，采用适宜的水解酶溶解细胞壁后，在自发情况或融合剂作用下，两个原生质体接触，融合成为异核体，经过繁殖复制进一步核融合，形成杂合二倍体，再经过染色体交换产生重组体，达到基因重组的目的，并在适宜的条件下再生出细胞壁，对重组体进行生产性能、生理生化和遗传特性分析获得所需重组子。其
原生质体培养的意义
①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源；②植物原生质体是细胞融合工作的基础；③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料；④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。
原生质体的活力测定
检验原生质体是活细胞还是死细胞染色法：①二乙酸荧光素（FDA）法：FDA本来没有荧光，当其进入细胞后被脂酶分解为具有荧光的极性物，不能透过质膜，而是留在细胞内发出荧光。因此能发出荧光的是具有活性的原生质体。②酚藏花红染料法:具有活性的原生质体均不着色，而死去的原生质体立即染成红色。③伊文思蓝染色法：
植物原生质体的制备
原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理
原生质体融合的原理
定义:原生质体融合就是将两个亲株的细胞壁分别通过酶解作用加以剥除,使其在高渗环境中释放出只有原生质膜包被着自球状原生质体。然后将两个亲株的原生质体在高渗条件下混合,由聚乙二醇助融,使它们相互凝集,通过细胞质融合接着发生两次基因组之间的接触、交換、遗传重组,在再生细胞中获得重组体原生质体融合技术简介.