高效液相色谱有哪几种检测器?
高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别PDA检测器:即紫外检测器,点时间可检测单一点处吸收值。DAD检测器:二极管阵列检测器,可理解为无数个PDA检测器串联。即点时间可检测某一波段吸收值,比PDA检测器定性能力强大。荧光检测器:对某些吸收紫外光后可发射荧光的物质进行检测,灵敏度较高。蒸发光散射检测器:可以检测没有紫外吸收的有机物质(不可用于梯度洗脱)示差折光检测器:根据折射率的变化对样品浓度检测(不可用于梯度洗脱),万能检测器,但是定性能力和PDA一样差。 质谱检测器:MS你懂得。 LC上常用的就这些,比较特殊的还有离子色谱的电化学检测器等。......阅读全文
怎样提高高效液相色谱的效率?
为了提高液相色谱的效率,我们可以从以下几个方面着手,主要结果如下:(1)减小了运动相位的速度,但延长了分析时间。(2)减少了固定相的数量,但也减少了样品在色谱柱中的装载量。(3)固定相颗粒尺寸减小,但渗透系数降低过大。(4)选择低粘度的流动相有利于快速传质但不利于多组分分析。(5)适当提高柱温可以降
高效液相色谱常用的仪器有哪些?
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。
高效液相色谱柱怎样选择填料粒度
目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是*的因素。 如果固定相选择是真确,但
高效液相色谱可用于分离哪些物质
高效液相色谱一般要求样品制成溶液,对大部分有机物原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。 hplc可配备多种检测器以适应不同被分析物的检测工作。
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
关于高效液相色谱的应用实例介绍
高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色
高效液相色谱柱怎样选择填料粒度
目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是**的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,
高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理
尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong等使用HPLC/质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC分离蛋白质,并用MALDI-
高效液相色谱填料应如何选择(1.2)
2、反相色谱 反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。 样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。 常用的反相填料有:C18(ODS)、C8
高效液相色谱可以与哪些仪器联用
通常高效液相色谱的标准检测器是紫外和二极管阵列检测器。组合的原因如下灵敏度不够、无法检测或便于结构表征。1为了提高灵敏度,可以与原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体质谱法、电感耦合等离子体发射光谱法相结合,主要是形态学分析。2可与电化学检测器和电导检测器结合,用于提高灵敏度和检测某些离子
高效液相色谱日常简易保养及维护
1、流动相的抽作要求:高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)。2、吸滤头:特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。3、单向阀:
高效液相色谱峰面积比是什么
含量是不变的,不管你用什么方法积分算,你算出来的那个叫纯度。色谱归一法都是是按面积积分也就是半峰高对峰宽。
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小
关于高效液相色谱的内标法介绍
采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则
高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理
尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MAL
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
高效液相色谱柱的管理与保养
高效色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小,填
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
高效液相色谱中固定相分类
高效液相色谱中固定相可分为正向色谱和反向色谱1 正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相)流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷)常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)2 反相
关于高效液相色谱的化学结构介绍
若样品中包含离子型或可离子化的化合物,或者能与离子型化合物相互作用的化合物(例如配位体及有机螯合剂),可首先考虑用离子交换色谱,但空间排阻和液液分配色谱也都能顺利地应用于离子化合物;异构体的分离可用液固色谱法;具有不同官能团的化合物、同系物可用液液分配色谱法;对于高分子聚合物,可用空间排阻色谱法
如何用高效液相色谱进行手工积分
现在基本没有手工积分了,基本都是通过计算机自己完成的,估计你说的是通过工作站的手动积分。
高效液相色谱柱的保护与再生
高效液相色谱仪色谱柱在色谱分析系统中主要起着分离检测物质的作用,如同色谱系统的心脏,同时也是易损耗品。 色谱柱在吸附样品时,样品中所含有的盐、脂质、疏水蛋白质和其它一些生物物质都有可能与色谱柱发生相互作用,一些保留值较小的物质如盐类比较容易被冲出色谱柱,而一些保留性较强的组分,流动相溶液不足以把
怎样绘制高效液相色谱的标准曲线
绘制高效液相色谱的标准曲线的方法如下:精密取相应对照品,加适当的溶剂溶解,分别精密量取1、2、3、4、5ml(或相应成梯度的量),稀释成各个梯度的溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作软件能直
高效液相色谱日常简易保养及维护
1、流动相的抽作要求:高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)2、吸滤头:特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。3、单向阀:如
怎样绘制高效液相色谱的标准曲线
绘制高效液相色谱的标准曲线的方法如下:精密取相应对照品,加适当的溶剂溶解,分别精密量取1、2、3、4、5ml(或相应成梯度的量),稀释成各个梯度的溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作软件能直
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1、调整流动相比例:检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2、调整流动相PH值:流动相pH值改
高效液相色谱跑梯度如何平衡基线?
首先,当梯度完成时,基线漂移是正常的,但是基线漂移的严重性可以通过以下措施来改善1.梯度前,最好用纯有机溶剂冲洗高效液相色谱柱,或使用新高效液相色谱柱,以防止高效液相色谱柱中的残留物导致基线漂移。2.试剂纯度优选为普通色谱纯试剂。如果纯度不够,梯度过程中也会出现基线漂移。3.控制室或柱温,防止温度波
高效液相色谱标准曲线的浓度范围
液相的浓度要求不高,我们1000mg/L都可以检测出来,主要看你用什么流动相柱子,最主要是要知道柱温,波长,流速,流量,这些控制好就OK了!气相的话浓度有要求的,不用很高,因为很灵敏!
关于超高效液相色谱的应用介绍
如今,超高效液相色谱仪主要应用于 (1)药物分析 如天然产物中复杂组分的分析 (2)生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品 (3)食品分析 如食品中农药残留的检测 (4)环境分析 如水中微囊藻毒素的检测 (5)其他 如化妆品中违禁品的检测 超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发