高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理

尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MALDI-TOF-MS鉴定收集的组分,从而在两种细胞中的差异表达中对蛋白质进行定量分析。多维液相色谱作为一种新型分离技术,不存在相对分子质量和等电点的限制,通过不同模式的组合,消除了二维凝胶电泳的歧视效应,具有峰容量高、便于自动化等特点。二维离子交换-反相色谱(2D-IEC-RPLC)是蛋白质组学研究中最常用的多维液相色谱分离系统。......阅读全文

高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理

尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong等使用HPLC/质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC分离蛋白质,并用MALDI-

高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理

尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MAL

高效液相色谱技术

高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场

色谱技术方法高效液相色谱

高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,

变性高效液相色谱技术

变性高效液相色谱 (denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)是一项在单链构象多态性 (SSCP)和变性梯度凝胶电泳 (DGGE)基础上发展起来的新的杂合双链突变检测技术,可自动检测单碱基替代及小片段核苷酸的插入或缺失。DHPL

高效液相色谱(HPLC)常见问题

1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。检测

高效液相色谱(HPLC)常见问题

1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。检测池

高效液相色谱原理

以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以

高效液相色谱原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱原理

采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测

高效液相色谱原理

采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测

高效液相色谱原理

高效液相色谱(HPLC)的原理:以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气

高效液相色谱原理

以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以

高效液相色谱原理

色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动,称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质

高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求

高效液相色谱(HPLC)流动相溶剂具有粘度低、与检测器相容性好、产品易得、毒性低等特点。选择填料(固定相)后,强溶剂对填料表面溶质的吸附降低,相应的容量因子K降低。然而,较弱的溶剂增加了溶质在填料表面的吸附,相应的容量因子k也增加了  因此,k值是流动相组成的函数  塔板数n通常与流动相的粘度成反比

高效液相色谱(HPLC)柱子的清洗和再生

1. 柱子的清洗 即使样品和流动相已做过前处理,也仍难以完成避免柱子受到污染,因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行,如果在短期内分析许多样品,则以每日清洗一次为宜,至少也应一周一次,防止有太多的杂质在柱上堆积。 反相柱的常规洗涤办法是:分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积(既对于一根4

土霉素的高效液相色谱HPLC检测方案

简介:高效液相色谱HPLC检测土霉素的方法,首页要了解土霉素是什么和分子式等,然后通过制定高效液相色谱检测方案,最后通过仪器与试剂等硬性条件进行土霉素检测。【土霉素】土霉素:抗菌谱和应用与四环素相同。本品对肠道感染,立克次体病,包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、落基山热、恙虫病和Q热,支原体属感染

离子色谱与高效液相色谱(HPLC)有什么不同

离子色谱和HPLC本质上是一样的,结构几乎一样,只是离子色谱用于测试阴阳离子,液相色谱用于测试有机物,色谱分离系统有些差异,IC用离子交换柱,LC用吸附柱。

离子色谱与高效液相色谱(HPLC)有什么不同

离子色谱和HPLC本质上是一样的,结构几乎一样,只是离子色谱用于测试阴阳离子,液相色谱用于测试有机物,色谱分离系统有些差异,IC用离子交换柱,LC用吸附柱。

简介高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求

  (1)流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。  (3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收

高效液相色谱分析的技术动态

  液相色谱和质谱连接,可以增加额外的分析能力,能够准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液,血液,血浆,尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物。高效液相色谱质谱系统(ABSciex Eksigent LC / MS和LC / MS / MS)提供了一些独特的优势,包括:  快速分析和流转所需的最少样品准

反相高效液相色谱的原理

在反相液相色谱中,固定相的极性小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性,疏水性强的保留时间长!

Alliance-HPLC高效液相色谱溶剂管理是如何的?

  Alliance HPLC高效液相色谱该单元的溶剂管理系统最多对四路色谱溶剂进行脱气并以精确的比例混合,并无脉动地平稳输送溶剂;   Alliance HPLC高效液相色谱有下述特征:   仅配备两个入口阀的串行流路可降低复杂性,并大程度缩短故障停机时间   自动化溶剂压缩性(无错溶剂

Alliance-HPLC高效液相色谱溶剂管理是如何的?

  Alliance HPLC高效液相色谱该单元的溶剂管理系统最多对四路色谱溶剂进行脱气并以精确的比例混合,并无脉动地平稳输送溶剂;   Alliance HPLC高效液相色谱有下述特征:   仅配备两个入口阀的串行流路可降低复杂性,并大程度缩短故障停机时间   自动化溶剂压缩性(无错溶剂

Alliance-HPLC高效液相色谱溶剂管理是如何的?

  Alliance HPLC高效液相色谱该单元的溶剂管理系统最多对四路色谱溶剂进行脱气并以精确的比例混合,并无脉动地平稳输送溶剂;   Alliance HPLC高效液相色谱有下述特征:   仅配备两个入口阀的串行流路可降低复杂性,并大程度缩短故障停机时间   自动化溶剂压缩性(无错溶剂

高效毛细管电泳技术和高效液相色谱技术的区别

高效毛细管电泳法高(HPCE)又称毛细管电泳(CE),高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)又称“高压液相色谱”高效毛细管电泳法。CE和HPLC相比,其相同处在于都是高效分离技术,操作均可自动化,且有多种不同分离模式。差异在于:(1)CE用

高效毛细管电泳技术和高效液相色谱技术的区别

毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转

高效毛细管电泳技术和高效液相色谱技术的区别

毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转

高效毛细管电泳技术和高效液相色谱技术的区别

高效毛细管电泳法高(HPCE)又称毛细管电泳(CE),高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography , HPLC)又称“高压液相色谱”高效毛细管电泳法。CE和HPLC相比, 其相同处在于都是高效分离技术, 操作均可自动化, 且有多种不同分离模式。差异在