高效液相峰分不开的原因都在这里
在液相色谱分析中,我们经常会遇到两个化合物无法得到基线分离或分离度差。液相色谱中流动相条件,色谱柱选择以及系统硬件的设置都会影响分离度。我们可以从以下几个方面考虑: 1.流动相 a. 流动相中有机溶剂的类型和比例,会影响色谱分离的选择性。对于反相色谱模式,常用的有机溶剂有甲醇、乙腈和四氢呋喃。我们可以通过改变流动相中的有机相种类或调整其比例,来改变选择性和分离度。 b.流动相的pH值和缓冲盐的添加也会影响分离度。对于中性的化合物,无论是极性还是非极性的,流动相pH值的改变不会对其选择性有太大的影响;对于可解离的化合物,pH的改变会产生较大的影响。对于酸性化合物,比如苯甲酸,其pKa为4.2,当流动相pH值大于5.7(pKa+1.5),则苯甲酸以离子型态存在,则与反相固定相之间的作用较弱,保留时间较短,当流动相pH值小于2.7 (pKa−1.5),则苯甲酸以分子形态存在,则与反相固定相之间有更强的保留作用,保留时间更长。......阅读全文
高效液相不出峰怎么回事
洗脱剂有机相比例不够 加很大 看看是不是有东西出来 尤其你用异丙醇就出峰 有可能是极性问题 波长当然有关系了 查查紫外吸收曲线 大于0.5 比较合适 堵了就卸下来 用甲醇超超声 但是我认为堵的可能性比较低。
高效液相有包峰怎样处理
一般来说有三种可能性,也是三种解决方法。确实是两种物质,极性相近,保留时间相近。如果是这样的话只能是调整试验方法,把他们分开。比如调整有机相比例,调整水相pH值等。不行的话还需要跑梯度或者更换色谱柱。色谱柱不行了。色谱柱使用时间久了,里面的填料就脏了。有时候会出现类似于包峰的肩峰。你可以换一根新的色
高效液相不出峰怎么回事
洗脱剂有机相比例不够 加很大 看看是不是有东西出来 尤其你用异丙醇就出峰 有可能是极性问题 波长当然有关系了 查查紫外吸收曲线 大于0.5 比较合适 堵了就卸下来 用甲醇超超声 但是我认为堵的可能性比较低。
高效液相有包峰怎样处理
一般来说有三种可能性,也是三种解决方法。确实是两种物质,极性相近,保留时间相近。如果是这样的话只能是调整试验方法,把他们分开。比如调整有机相比例,调整水相pH值等。不行的话还需要跑梯度或者更换色谱柱。色谱柱不行了。色谱柱使用时间久了,里面的填料就脏了。有时候会出现类似于包峰的肩峰。你可以换一根新的色
高效液相色谱峰面积比是什么
含量是不变的,不管你用什么方法积分算,你算出来的那个叫纯度。色谱归一法都是是按面积积分也就是半峰高对峰宽。
高效液相峰面积偏差太大的原因
是否柱子平衡时间不够?系统压力是否正常?检测器氘灯有没有问题?
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
高效液相测定时有峰没有峰面积怎么求含量
没有峰面积是不可能计算出含量的。你现在就是要弄清楚为什么这个色谱峰没有积分。两个原因,一个是忘了积分了,那就手动积分,然后用峰面积去计算。一个是这个峰太小了,在限度范围外。比如杂质,限度是0.05%,那么低于这个限度的就不用积分了。到时候就说:这个杂质未检出。
高效液相的色谱峰出现峰裂是什么原因
1.样品体积过大 : 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强 : 采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道 : 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效 : 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏 : 更换进样器转子
高效液相法影响出峰时间的因素
首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。
高效液相法影响出峰时间的因素
首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。
高效液相色谱已知峰面积怎么求含量
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份的峰面积。然
高效液相色谱出峰时间晚的原因
是和标准样品比较出峰晚,还是同一待测样自身重现性实验时出峰晚
高效液相色谱已知峰面积怎么求含量
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份的峰面积。然
高效液相法影响出峰时间的因素
首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。
高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。
高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。峰高和峰面积的选择
高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。峰高和峰面积的选择
高效液相色谱图中峰面积、峰面积比都是代表什么呢?
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。峰高和峰面积的选择
高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。峰高和峰面积的选择
高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确。峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确。峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%。峰高和峰面积的选择
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以
高效液相色谱,出峰时间太久,可否流速加倍
如果你调节流速,应该是可以减少出峰时间没有问题的。不过你先得看一下你的压力是多少。一般压力控制在18MPa以下比较好,就是说你调节方法之后,压力最好不要超过180bar。不然对仪器损伤比较大。再有,我个人建议是调节有机相比例。如果你是反相的仪器,加大有机相比例,色谱峰就会前移。当然这肯定比调节流速麻