免疫组化实验防脱片的处理方法
脱片是免疫组织化学中经常遇到的问题(尤其是脑组织冰冻切片)，一般来说脱片主要有以下几种原因：1. 组织固定、脱水、透明不充分2．组织切片过厚3．组织切片有折叠4．过度的热抗原修复(高压、微波、水煮)处理或抗原修复液的pH偏高5．操作过程中，冲洗方法不正确等在实际操作的过程中，除了要注意以上几点之外，防脱片的应用是很有必要的，市售的防脱载玻片一般为正电荷玻片，不同品牌之间品质存在差异，而即使是较好的PREMIER玻片其防脱效果有时也不能令人满意，而且假货较多，因此，实验室常常需要自己处理防脱载玻片，步骤如下：1. 玻片的酸处理使用实验室常用的次强酸清洁液（重铬酸钾120g，浓硫酸200ml，蒸馏水1000ml）浸泡玻片24小时，流水充分冲洗后在用蒸馏水冲洗三遍，置于95%乙醇中浸泡12小时，取出放烘箱中烤干或自然风干。2. 黏附剂的使用目前常用的黏附剂有三种：明胶-硫酸铬钾，APES（3—氨丙基—乙氧基甲硅烷）......阅读全文
免疫组化技术规范
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标
免疫组化实验原理和步骤（二）
免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 ：
免疫组化实验原理
首先来谈一下免疫组织化学（IHC, Immunohistochemistry）、免疫细胞化学（ICC, Immunocytochemistry）和免疫荧光(IF, immunofluorescence technic )的共通之处和区别。 平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织
实验室防倒吸的方法和使用技巧
实验室真空抽滤和废液抽吸的用户再使用操作的时候往往会碰到一个难题，进入到集液瓶中的液体很容易倒吸抽入真空泵内。造成的后果轻则需要拆开泵体进行清洗，更换进出气阀片，严重的甚至会直接损坏电机。 很多设计较为优良的过滤和吸液产品会在先期就考虑到防倒吸的功能，比如圣斯特FS3310真空抽滤装置、BV24
旋转蒸发仪的防垢处理
旋转蒸发器主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂。尤其对萃取液的浓缩和色谱分离时的接收液的蒸馏，可以分离和纯化反应产物。旋转蒸发器的基本原理就是减压蒸馏，也就是在减压情况下，当溶剂蒸馏时，蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶，通过一高度回流蛇形冷凝管与减
免疫组化的实验试剂及实验步骤
一、试剂（1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。（2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。（3）0.
锅炉专用软水处理防垢剂使用方法
锅炉软水剂作用：磷酸钠水解后形成来磷酸钠，与钙镁离子形成络合物。起到软化水中钙镁离子、硫酸盐、硅酸盐，改变水的硬度和防垢的作用。锅炉软水剂用量：根据客户水质硬度而定，通常每吨水加200~500克，水质硬度高可加大用量。使用时候要定期排污，观察水位。补水时按照补水量添加相对量的药剂。锅炉专用软水处理防
解析免疫组化染色出现无色片的原因及解决方法
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
实验数据与处理方法
实验数据为美国加州圣地亚哥北部岛屿某海军飞机场的AVIRIS高光谱影像数据，如图8.2所示。该数据光谱范围是0.4～1.8μm，像元分辨率为3.5m，共有137个波段，有效波段126个。该影像区域内人工建筑占主导地位，相对比较规整。实验的编程环境为Matlab2010，进行高光谱影像的SVM分类时，
蒙脱石分散片介绍
性状本品为灰白色或类白色片,味香甜鉴别取本品适量研细,进行以下试验。(1)取本品细粉和氟化钙各0.5g,置同一铂坩埚内,加硫酸lml润湿,用已加水1滴的表面皿盖住坩埚,如必要可缓缓加热,在水滴表面有白色胶体生成。(2)取本品细粉适量,置于载样架上,将载样架放入干燥器(含饱和氯化钠溶液,20℃时相对湿
免疫组化实验原理和步骤（三）
免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所
酶切片断的脱磷实验
实验材料 DNA片段试剂、试剂盒 碱性磷酸酶酚氯仿EDTASDSTE缓冲液电泳缓冲液NH4AC仪器、耗材 离心机恒温设备真空干燥机取液器实验步骤 1. 在实验四所得DNA限制性内切酶片段中加入（1）10×碱性磷酸酶缓冲液 10 μl（2）碱性磷酸酶（0.01 u/pmol ends） 1-2
酶切片断的脱磷实验
基本方案 实验材料 DNA片段 试剂、试剂盒
细胞爬片的免疫组化染色鉴定
实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS，0.5%Triton X-100(DPBS配)，3%H2O2，封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液)，一抗(PBS配，滴度1：200，湿盒)，二抗工作液(湿盒)，C液(湿盒)，DAB显色液，苏木素，树胶主要设备20m
细胞爬片的免疫组化染色鉴定
实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS，0.5%Triton X-100(DPBS配)，3%H2O2，封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液)，一抗(PBS配，滴度1：200，湿盒)，二抗工作液(湿盒)，C液(湿盒)，DAB显色液，苏木素，树胶主要设备20m
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
石蜡切片免疫组化实验
实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头
蒙脱石的检查方法
检查粒度照粒度和粒度分布测定法(通则0982第三法)( Malvern Mastersizer2000或性能相当的激光粒度分析仪),取本品约0.12g,使检测器遮光率在8%~20%范围,加水800ml,以每分钟3000转的转速搅拌15分钟或以每分钟3000转的转速搅拌,并同时超声2~3分钟(超声功率
脱核的概念和方法
又称脱核。是指人工将核从细胞中除去。（1）利用离心力使海胆卵的核或变形虫的核靠向一边，然后把细胞从中心部切成两段，再用微量吸管将核吸出；（2）用紫外线或射线照射核的部位，把核杀死；（3）对于伞藻（Acet－alularia）那种的大形细胞，因核位于细胞的一端，所以可把核所在的那一端的细胞部分切去。去
蒙脱石的检查方法
粒度照粒度和粒度分布测定法(通则0982第三法)( Malvern Mastersizer2000或性能相当的激光粒度分析仪),取本品约0.12g,使检测器遮光率在8%~20%范围,加水800ml,以每分钟3000转的转速搅拌15分钟或以每分钟3000转的转速搅拌,并同时超声2~3分钟(超声功率16
常用免疫组化方法
目前几种常用免疫组化方法简单介绍1）免疫荧光方法是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可
实验室废液的处理方法
实验室废液处理方法有机类实验废液的处理方法注意事项1).尽量回收溶剂，在对实验没有妨碍的情况下，把它反复使用2).为了方便处理，其收集分类往往分为：a)可燃性物质b)难燃性物质c)含水废液d)固体物质等。3).可溶于水的物质，容易成为水溶液流失。因此，回收时要加以注意。但是，对甲醇、乙醇及醋酸之类溶
ELISA实验样本前期的处理方法
ELISA试剂盒检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。实验样本的处理可谓是ELISA实验的关键步骤之一，所以科研朋友一定要多加注意。一、均质①组织样本：肉、肝食品类切细，用绞肉机反复绞碎，混合均匀。②水产样本：去除样品的
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法2
3、操作流程（1）脱蜡和水化脱蜡前，应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。1）组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟；2）无水乙醇中浸泡5分钟；3）95%乙醇中浸泡5分钟；4）70%乙醇中浸泡5分钟；（2）抗原修复用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片。1）
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法1
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋
免疫组化的经验总结（1）－常见问题
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞
免疫组化染色结果容易受哪些因素影响
众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律，进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用，因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来，尤其是免疫组化染色实验，其结果很容易受某些因素影响。那么，免疫组化染色结果容易受哪些因素影响？ 专家指出：免疫组化染色的结果，与组织的固定、抗原的修复、抗体的保