免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在就以上几点分别说明。 1、非特异性着色 非特异性着色就是在理论着色区域外的着色，这种着色与背景是有区别性的。造成非特异性着色的原因主要有： 1) 标本原因，肝肾内源性生物素含量高，与 SABC 结合导致非特异性着色，皮肤，肺组织胶原含量高，由于胶原带负电荷，易吸附试剂导致非特异性着色。 2) 切片干涸导致的边缘效应。 3) 抗体浓度过高。 4) 组织在处理中存在出血区或坏死区。 5) 洗涤不充分。 6) 显色剂氧化，显色时间长。 解决方法 ： 1) 一抗应做浓度梯度，选择......阅读全文
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在
PCR常见问题及对策
PCR常见问题及对策（一）没有得到扩增产物（1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。（2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。（3）变性温度是否准确：PCR
影响免疫组化的因素及对策
（一）免疫组化染色假阳性及其对策 1、消除内源酶的影响在涉及免疫过氧化酶的各种染色中，均用过氧化物酶来标记抗体，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，正常组织中也含有一定量的过氧化物酶，其同样也能催化底物显色，而影响免疫组化染色的特异性，因此在加入标记酶前应设法将其灭活，以保证染色反应的特异
影响免疫组化的因素及对策
（一）免疫组化染色假阳性及其对策 1、消除内源酶的影响在涉及免疫过氧化酶的各种染色中，均用过氧化物酶来标记抗体，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，正常组织中也含有一定量的过氧化物酶，其同样也能催化底物显色，而影响免疫组化染色的特异性，因此在加入标记酶前应设法将其灭活，以保证染色反应的特
血培养，临床常见问题及对策
血流感染（BSI）是指病原微生物侵入血流，随血行播散的感染，可以表现为菌血症、真菌血症、病毒血症和脓毒症。血流感染是一种全身性感染疾病，严重者可引起休克、弥散性血管内凝血和多脏器功能衰竭。 导管相关性血流感染（CRBSI）是指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时内，患者出现菌血症
胶体金试纸条常见问题及对策
1 . 胶体金试纸条背景深或者是金残留跑不动？ 原因之一：被标记蛋白复溶液中添加的某种成分不合适。 解决方法：修改复溶液配方。 2. 胶体金试纸条边缘效应如何去除？ 原因之一：金爬速过快或者过慢。 解决方法：对样品垫进行处理。 3. 胶体金标记蛋白时出现死金如何解决？或者是金标记不上？ 原因之一：被
免疫组化常见问题及解决方法
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗
PCR常见问题分析与对策
1.PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白
离子色谱常见问题及其对策
离子色谱常见问题类型主要有压力异常(偏高、波动)、漏液、保留时间漂移、基线问题(漂移、噪声)、 峰形异常等，本文主要针对这几个现象逐条分析，让你不再为使用离子色谱而烦恼。 一、压力异常 无压力，流动相不流动的可能原因： 1、保险丝断或电源问题;2、柱塞杆折断;3、泵头内有
小儿静脉留置针输液常见问题原因分析及对策
静脉留置针亦称套管针，其套管柔软，不易穿破血管，可长时间留置于血管内，既减少了患者反复静脉穿刺的痛苦，又能方便及时用药，具有传统头皮针不可替代的优势，因而被广泛应用于临床输液。由于小儿配合差，血管相对较细，静脉留置针的使用可大大减轻患儿的痛苦，也降低了护士进行穿刺时的精神压力。 但在临
雷迈分析包衣过程中常见问题及对策
机在实际操作中如遇到如下的问题： 包衣机在实际操作中如遇到如下的问题： 1、粘片多发生在包隔离层。原因是素片表面不光华，单糖浆加入过量且温度低，水分蒸发慢，搅拌不及时，彼此粘附所致。 对策：一是糖浆应控制在40℃～50℃,与素片的比例
杂交稻种子浸种催芽时常见问题及对策
现在使用的杂交水稻种子与过去使用的常舰永稻种子有差异。过去使用的常规水稻种子颖壳厚、籽粒重、吸水慢，因此，在浸种催芽中采取高温破胸、中温催芽、低温炼芽的浸种催芽技术，而现在使用的杂交水稻的种子具有颖壳薄、籽粒轻、易吸水、喜中温的发芽特点，在浸种催芽中，应实行“三浸三滤”催芽技术，可催齐壮芽。杂交稻
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染
免疫组化常见问题分析
1，石蜡切片在染色过程中出现脱片现象1）烤片时间不够，或温度不够，可以延长烤片时间和提高烤片温度；2）用含有多聚赖氨酸的玻片，可以购买到或这自己做；3）有些组织本身就容易掉片，如骨组织等，操作时冲PBS不要直接冲到组织上，冲到组织上方，让它流下冲洗组织；4）用高温修复时，温度骤冷也可能引起。2，边缘
PCR中常见问题分析与对策
PCR产物的电泳检测时间 一般认为PCR产物应在48h以内完成电泳检测，有些zui好于当日电泳检测，大于48h后带型就会出现不规则，甚至消失。 1 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节
医院细菌培养及药敏试验中常见问题调研及改进对策探讨
医院微生物室的细菌培养及药敏试验是防治感染性疾病和监测耐药菌株、防范医院感染的重要手段和方法，对临床工作应该具有准确指导作用。然而，其实存在的问题较多，根据笔者的调研和体会，当前医院细菌培养及药敏技术虽本身已普及到县级医院，但是与此相关的若干不良现状却导致了药敏试验结果难以准确指导临床合理选用抗生素
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策1
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策2
3）、DAB变质和显色时间太长：DAB最好现用现配，如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长，因为在没有酶的情况下，过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控，达到理想的
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。 ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，
IHC免疫组化常见问题分析
分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施： 常见问题一：所有切片呈阴性 原因分析：a.缓冲液内含叠氮化钠，抑制酶的活性； b.染色未完全按照操作步骤进行； c.漏加一种抗体或抗体失活； d.复染或脱水剂使用不当； e.底物中加入的过氧化氢少或失活。
核酸提取常见问题、原因分析及其对策
一、DNA提取方法简介二、DNA提取常见问题、原因分析及其对策三、RNA提取方法简介四、RNA提取常见问题、原因分析及其对策核酸提取原理及常见问题.pptx
PCR技术（五）：常见问题分析与对策
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模
免疫组化技术要点与常见问题
在免疫组化过程中，为了更好的说明问题和查找原因，最好设置阳性对照片（已知的高表达相应抗原的组织）和阴性对照组织片（不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组），所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色（按照先后顺序，先排除一些简单的原因）:
临床输血中常见问题与管理对策
输血是救治病人的重要手段之一，然而输血不当，可产生严重的输血不良反应、输血传染病和同种免疫反应，重者危及患者生命。临床输血安全是每个医务工作者必须考虑，并严肃对待的问题，应切实做好防范工作。根据部分医院资料分析表明，输血引发的问题，80%以上发生在血站外，而护士责任性差错占全部差错的50%以上。周慧
免疫组化常见问题及其解决办法
1、 一抗从4度拿出后，为什么要进行37度复温？（1）一方面，防止切片从4度直接放入PBS易脱片；（2）另一方面，使抗原抗体结合更稳定。一般不需要，但对表达较弱的抗原可能有用，4度和37度时分子运动方式不同，前者分子碰撞机率和运动速度小于后者，后者结合更快，但敏感性也提高了并易造成非特异染色。（3）