Tris硼酸电泳缓冲液(5′TBE)使用说明

产品简介: Tris-硼酸电泳缓冲液简称 TBE。0.5´TBE 工作液中含有 45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。TBE 是常用的 DNA 电泳缓冲液。一般情况下,DNA 电泳常使用 0.5´TBE工作液,Tris-乙酸电泳缓冲液的优点:缓冲能力弱,适宜分离相对较小(小于 2000bp)的DNA 片段。亦可以使用 0.5~1´TBE 工作液,该工作液缓冲能力相对较强。 Tris-硼酸电泳缓冲液是 10 倍浓缩的 TBE, 主要由 450mM Tris-硼酸, 10mM EDTA 等组成。使用时需用蒸馏水或去离子水稀释为 0.5´TBE 后使......阅读全文

逆转录PCR的实验

 一、实验器具与材料:1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头:1ml、200μl、20μl3、匀浆管:5ml4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶:2个60ml的棕色试剂瓶(广口,带盖);1个125

核酸电泳的步骤方法介绍

 核酸电泳是进行核算研究的重要手段,常用于和琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶两种,凝胶电泳操作简单,是分离鉴定和纯化核算的一种常用方法,那么核酸电泳的步骤有哪些的呢?琼脂糖凝胶电泳的步骤:用透明胶将玻璃板或电泳装置所配备的塑料盘的边缘圈封,制成胶模,置水平工作台上;(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加

硼酸软膏

性状本品为淡黄色或黄色软膏鉴别取本品约0.5g,加水4ml,在水浴上加热,搅拌使硼酸溶解,放冷,水溶液显硼酸盐的鉴别反应(通则0301)检查应符合软膏剂项下有关的各项规定(通则0109)。含量测定取本品约2g,精密称定,加甘露醇3g与新沸过的冷水20ml,置水浴上加热,搅拌使硼酸溶解,放冷,加酚酞指

硼酸溶液介绍

性状本品为无色的澄清液体。鉴别本品显硼酸盐的鉴别反应(通则0301)。检查pH值应为4.0~5.0(通则0631)其他应符合涂剂项下有关的各项规定(通则0118)。含量测定精密量取本品25ml,加中性甘油(对酚酞指示液显中性)25ml与酚酞指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)滴定至显粉红

RNase-A/Tl保护和-RNase-H-聚焦法实验——RNase-H-聚焦法

实验方法原理RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比,它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA 丰度的方法

为什么在电泳中使用TBE缓冲液?

很多朋友想了解电泳缓冲液的知识,为什么在电泳中使用TBE缓冲液?因为限制性缓冲液将pH保持在适合酶活性的范围内,并提供催化所需的盐辅助因子。由于不同的限制性内切酶需要不同的盐条件和pH,因此可以使用单一的折衷缓冲液,其在各种限制性内切酶优选的条件之间达成平衡。

5吨防爆电子地秤使用说明

防爆电子地秤分为隔爆型和本安型两种,二者防爆等级不同,适合在不同的防爆区域,上海越衡实业有限公司生产销售电子地秤的厂家,多种规格功能的地秤可以根据用户需要定制。5吨防爆电子地秤工作原理:当环境中同时存在氧气(空气)、爆炸性物质、引爆源(如电火花、灼热表面)时即会引起爆炸,防爆衡器必须至少控制器中的一

琼脂糖胶和PAGE胶制备方法

一、琼脂糖凝胶的特点天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与

琼脂糖胶和PAGE胶制备方法

一、琼脂糖凝胶的特点    天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)使用说明书

    甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 用于细胞核染色、肥大细胞染色,规格为100ml,属细胞染色液类,有效期12个月.   【信息说明】   产品名称:甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)   供应商:远慕染色液厂家   规格:100ml   分类:细胞染色   储存条件:室温,避光,12个

大鼠白介素5(IL5)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IL-5 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 IL-5与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠IL-5,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测

人白介素5(IL5)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 IL-5 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 IL-5与单抗结合,加入生物素化的抗人IL-5,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD

质粒DNA的提取方法总共有哪些

(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结

质粒DNA的提取方法总共有哪些

(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结

质粒DNA的提取与鉴定

本实验采取碱裂解法的方法来提取质粒 ,之后经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA。质粒DNA 的提取与鉴定(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变

台式高速离心机DNA酶切及凝胶电泳

 一、DNA的限制性内切酶酶切分析    限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,

DNA酶切及凝胶电泳之一:概述

一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶

琼脂糖凝胶电泳技术

  一、琼脂糖凝胶的特点    天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,

分子生物学试验方法探讨二-琼脂糖凝胶电泳技术

  分子生物学试验方法探讨二-琼脂糖凝胶电泳技术   分子生物学试验方法探讨二-琼脂糖凝胶电泳技术、琼脂糖凝胶的特点    天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼

琼脂糖凝胶电泳技术概述

一、琼脂糖凝胶的特点天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与

分子生物学试验方法探讨:琼脂糖凝胶电泳技术

分子生物学试验方法探讨二-琼脂糖凝胶电泳技术分子生物学试验方法探讨二-琼脂糖凝胶电泳技术、琼脂糖凝胶的特点天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧

常见实验用溶液的配制方法(二)

  Tris缓冲液(Tris-HCl buffer)   将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积(ml)

关于DNA测序技术的试剂的介绍

  (1)SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。  (2)丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉双丙烯酰胺溶于140ml 双蒸水中,定容至250ml,0.45mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周

DNA测序非同位素银染色法的试剂准备

  1. SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。  2. 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95 g丙烯酰胺,5 g甲叉双丙烯酰胺溶于140 ml 双蒸水中,定容至250 ml,0.45 mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃冰箱

细胞系的多位点DNA指纹检测

细胞系 Southern 印迹 DNA 的制备 经标记的 M13 噬菌体 DNA 的制备 杂交             实验方法原理 细胞中提取的 DN

细胞系的多位点DNA指纹检测——细胞系-Southern-印迹-DNA-制备

实验方法原理细胞中提取的 DNA 经限制性酶消化,利用 Southern 印迹技术将消化产物固定在尼龙膜上 [ Ausubel et al.,1996,2002 ],与来自 M 13 噬菌体的标记 DNA 进行杂交。实验材料D-PBSHinfI酶及其缓冲液琼脂糖凝胶5×TBE储存液EDTA二钠盐6×

凝胶电泳操作注意事项

  1.选用优质的琼脂糖:不同品牌的琼脂糖在质量上有较大的差异。劣质琼脂糖会导致DNA条带模糊,甚至条带缺失。因此请尽量选择质量稳定可靠的品牌。   2.选择适当的凝胶浓度:   琼脂糖凝胶的线性DNA分辨范围    3.凝胶制备:配制凝胶和电泳应选用相同的1x缓冲液;使用的容器体积至少是凝胶

凝胶电泳操作注意事项

1.选用优质的琼脂糖:不同品牌的琼脂糖在质量上有较大的差异。劣质琼脂糖会导致DNA条带模糊,甚至条带缺失。因此请尽量选择质量稳定可靠的品牌。2.选择适当的凝胶浓度:琼脂糖凝胶的线性DNA分辨范围3.凝胶制备:配制凝胶和电泳应选用相同的1x缓冲液;使用的容器体积至少是凝胶溶液的3倍,以免溶液沸腾时溢出

蛋白质凝胶电泳凝胶的制备

【材料与试剂】(1)30%的丙烯酰胺:分别称取29g 丙烯酰胺,1g N,N -亚甲双丙烯酰胺加温热的去离子水60ml,加热至37℃溶解,补加水至终体积为100ml,过滤,即配成30%(w/v)丙烯酰胺贮存溶液。丙烯酰胺和双丙烯酰胺在贮存过程中缓慢转变为丙烯酸和双丙烯酸,这一脱氨基反应是光催

蛋白质凝胶电泳凝胶的制备

【材料与试剂】(1)30%的丙烯酰胺:分别称取29g 丙烯酰胺,1g N,N -亚甲双丙烯酰胺加温热的去离子水60ml,加热至37℃溶解,补加水至终体积为100ml,过滤,即配成30%(w/v)丙烯酰胺贮存溶液。丙烯酰胺和双丙烯酰胺在贮存过程中缓慢转变为丙烯酸和双丙烯酸,这一脱氨基反应是光催化或