Tris硼酸电泳缓冲液(5′TBE)使用说明
产品简介： Tris-硼酸电泳缓冲液简称 TBE。0.5´TBE 工作液中含有 45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。TBE 是常用的 DNA 电泳缓冲液。一般情况下，DNA 电泳常使用 0.5´TBE工作液，Tris-乙酸电泳缓冲液的优点：缓冲能力弱，适宜分离相对较小(小于 2000bp)的DNA 片段。亦可以使用 0.5～1´TBE 工作液，该工作液缓冲能力相对较强。 Tris-硼酸电泳缓冲液是 10 倍浓缩的 TBE， 主要由 450mM Tris-硼酸， 10mM EDTA 等组成。使用时需用蒸馏水或去离子水稀释为 0.5´TBE 后使......阅读全文
RTPCR原理与实验操作步骤2
二、实验器具的处理与准备1、塑料制品：（包括枪头、EP管、匀浆管等）先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中，其中小枪头需要吸管打入DEPC水，过夜，然后高压，再烤干备用，实验前将枪头等放入吸头台，再高压一次（EP管）2、玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，蒙锡纸烤干备用（DEPC水泡）
硼酸
性状本品为无色微带珍珠光泽的结晶或白色疏松的粉末,有滑腻感;无臭;水溶液显弱酸性反应。本品在沸水、沸乙醇或甘油中易溶,在水或乙醇中溶解。鉴别本品的水溶液显硼酸盐的鉴别反应(通则0301)。检查酸度取本品1.0g,加水30ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为3.5~4.8溶液澄清度与颜色取
RtPCR实验准备及与操作步骤
一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP 管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）1个125m
RtPCR实验准备及与操作步骤1
一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP 管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）1个125m
垂直板式和卧式电泳的区别
垂直板式电泳一般用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，既可用于分离蛋白质，此时的电泳缓冲液为Tris－甘氨酸缓冲系统；也可用于分离核算，详尽的操作可以参考百度百科http://baike.baidu.com/view/807193.htm?fromId=320392。卧式电泳一般用于琼脂糖凝胶电泳，通常用于分离核
单头昆虫基因组DNA的提取
实验概要一种简单快速提取单头小型昆虫基因组DNA的方法。主要试剂1. 蛋白酶K[美国Merck公司]2. 三羟甲基氨基甲烷(Tris)[美国Amresco公司]3. Taq DNA聚合酶及dNTP[NEB公司]4. 琼脂糖及溴化乙锭(EB)[美国Amresco公司]5. 乙二胺四乙酸钠(Na2EDT
琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）检测DNA
原理： 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，可作为电泳支持物，适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离，与标准DNA片段进行对照，就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中，由于各种因素的影响，使质粒DNA呈现超螺旋的共
RtPCR经验总结
Rt-PCR实验步骤一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，
分子生物学常用试剂的配制
1．LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制配制每升LB培养液，应在950ml去离子水中加入：细菌培养用酵母提取物（bacto-yeastextract）5g细菌培养用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10gNaCl10g摇动容器直至溶质完全溶解，用5mol/LNaOH(约0.2
分子生物学常用试剂的配制
1．LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制 配制每升LB培养液，应在950ml去离子水中加入： 细菌培养用酵母提取物（bacto-yeastextract） 5g 细菌培养用胰化蛋白胨（bacto-tryptone）10g NaCl 10g 摇动容器直至溶质完全溶解，用5mo
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水 242g57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L）200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）补足1L 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲
核酸的电泳与检测
【实验目的】（1）了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序。（2）对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳，核酸分子是两性解离分子，在pH8.0时，DNA
琼脂糖凝胶电泳检测DNA
目的：学习水平式琼脂糖凝胶电泳，检测质粒DNA的构型、分子量的大小。原理： 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，可作为电泳支持物，适用于分离大小范围在0.2～50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离，与标准DNA片段进行对照，就可获知该样品分子量大小。
SDSPAGE－蛋白质样品的制备
SDS-PAGE 蛋白质样品的制备 试剂、试剂盒 SDS-PAGE Loading Buffer ddH2O
用RNA的免疫沉淀rPCR方法进行体内分离核糖核蛋...（一）
用RNA的免疫沉淀-rPCR方法进行体内分离核糖核蛋白复合体实验实验方法原理 RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。实验材料 载体酵母 tRNARQ1 DNA 酶糖原小牛肠碱性磷酸酶T4 DNA 连接酶JMJ09 感受态细菌试剂、试剂盒 PBSNET
硼酸介绍
性状本品为无色微带珍珠光泽的结晶或白色疏松的粉末,有滑腻感;无臭;水溶液显弱酸性反应。本品在沸水、沸乙醇或甘油中易溶,在水或乙醇中溶解。鉴别本品的水溶液显硼酸盐的鉴别反应(通则0301)。检查酸度取本品1.0g,加水30ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为3.5~4.8溶液澄清度与颜色取
硼酸溶液
性状本品为无色的澄清液体。鉴别本品显硼酸盐的鉴别反应(通则0301)。检查pH值应为4.0~5.0(通则0631)其他应符合涂剂项下有关的各项规定(通则0118)。含量测定精密量取本品25ml,加中性甘油(对酚酞指示液显中性)25ml与酚酞指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)滴定至显粉红
DNA酶切及凝胶电泳
一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶
补骨脂素介导光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作用
实验材料 蛋白酶K 试剂、试剂盒 变性胶电泳缓冲液 非变性胶电泳缓冲液 结合缓冲液
补骨脂素介导光交联反应研究RNA与蛋白质分子间作用实验
基于补骨脂素光化学反应的 RNA-蛋白分子复合物分析法，能够在数据相对缺乏的情况下分析生理条件下的 RNA-蛋白复合物的拓扑构象。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验材料蛋白酶K试剂、试剂盒变性胶电泳缓冲液非变性胶电泳缓冲液结合缓冲液水解缓冲液丙烯酰胺储存液RNA 洗脱缓冲液四甲基乙
补骨脂素介导的光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作...
补骨脂素介导的光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作用实验实验材料 蛋白酶K试剂、试剂盒 变性胶电泳缓冲液非变性胶电泳缓冲液结合缓冲液水解缓冲液丙烯酰胺储存液RNA 洗脱缓冲液四甲基乙二胺过硫酸铵AMV 反转录酶及反应缓冲液磷酸钠8-羟基补骨脂素13-二碘丙烷碳酸钾丙酮石油醚乙酸乙酯硫酸钠硅胶三氟乙
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（有机溶剂抽提）
实验方法原理 羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目，并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这 一特性构成了从凝胶中回收及操作 DNA 的基础（Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。实验材料
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（有机溶剂抽提）
实验方法原理 羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目，并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这 一特性构成了从凝胶中回收及操作 DNA 的基础（Wielander 1979;
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理、仪器试剂和操作步骤
一、原理DNA在碱性的溶液中带有负电荷，因此，在电场作用下朝正极移动。在琼脂糖凝胶中电泳时，由于琼脂糖凝胶具有一定孔径，长度不同的DNA分子由于所受凝胶的阻遏作用大小不一，迁移的速度不同，从而可以按照分子量大小得到有效分离。溴化乙锭可插入到DNA分子的双链中。在紫外光的照射下，插入溴化乙锭的DNA呈
内切酶的特性、酶解与琼脂糖凝胶电泳
学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法，理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具，琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具，所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等
电泳缓冲液的概述
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成， 是电泳场中的导体，也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率，应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子，防止电泳时激
电泳缓冲液的配制
Tris-乙酸（TAE）：50×浓贮存液（每升）：242g Tris 碱5 7.1ml 冰乙酸100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释50倍。
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（有机溶剂抽提）
羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目，并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这一特性构成了从凝胶中回收及操作 DNA 的基础（Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。 本实验来源「分子克隆实验指南
逆转录PCR的实验步骤
一、实验器具与材料： 1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖
逆转录PCR的实验步骤
一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）；1个125m