利用iPSC衍生的肝细胞进行多参数高内涵肝细胞毒性检测

药物引发的肝毒性是造成肝损伤和急性肝衰竭的重要原因之一。因此如何高效的检测药物的有效性和安全性对于促进药物研发和减少药物消耗至关重要。人诱导的多功能干细胞(iPSC)衍生的肝细胞具有典型的成熟细胞的特征和代谢形式,这对于我们用高内涵筛选药物是非常理想的。虽然对于如何利用高内涵进行药物筛选已经有了很多标准的程序,但是对于如何通过图像分析评估不同毒性却仍然非常复杂且大多依靠经验。本文中我们阐述了如何利用ImageXpress® Micro XL系统对多参数肝毒性进行分析。每一个孔或者细胞都会产生多种化合物诱导的细胞反应,而这些反应可以用MetaXpress® 5软件的自定义模块进行分析。从标准活性检测中获得更多信息活性染色(例如Calcein AM)可以用来粗略的检测活细胞中的化合物毒性。首先用各种化合物对肝细胞进行72小时处理并染色。通过ImageXpress Micro XL 系统的10倍物镜我们可以得到肝细胞的......阅读全文

利用iPSC衍生的肝细胞进行多参数高内涵肝细胞毒性检测

药物引发的肝毒性是造成肝损伤和急性肝衰竭的重要原因之一。因此如何高效的检测药物的有效性和安全性对于促进药物研发和减少药物消耗至关重要。人诱导的多功能干细胞(iPSC)衍生的肝细胞具有典型的成熟细胞的特征和代谢形式,这对于我们用高内涵筛选药物是非常理想的。虽然对于如何利用高内涵进行药物筛选已经有了很多

诱导多能干细胞毒性实验(一)

优势:1.  简易、快速的通过检测细胞贴壁面积进行96或384孔板细胞毒性筛选2.  按照一般微孔读板机的简单流程3.  具有细胞影像数据,增加数据可信性药物引起的组织毒性是候选药物未能进入市场的一个重要原因,因此,安全性和有效性试验的高度预测分析是提高药物开发和降低候选药物抗药性的关键。人源诱导多

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(二)

评价化合物对心机细胞毒性的作用评价心肌细胞毒性影响,使用各种不同的心肌细胞毒性化合物处理 24 小时,然后活细胞通过 Hoechst 核染料分子标记后,MitoTracker Orange 染料标记和 AF-488 连接的鬼笔环肽染料来检测细胞骨架的完整性。利用 ImageXpress Pi

Molecular-Devices使用多能诱导干细胞(iPSC)来源的肝...(一)

Molecular Devices使用多能诱导干细胞(iPSC)来源的肝细胞球进行高内涵3D毒性分析特点:使用人类多能诱导干细胞来源的肝细胞形成肝细胞球对体外筛选的3D模型进行肝毒性评价3D图像分析过程中对目标样品进行识别和分割,以达到最佳分割效果背景介绍:在发育生物学和组织生物学中,3D细胞球建模

肝细胞的溶酶体

  DeDuve于1955年首次在大鼠肝细胞匀浆超速离心后的各组成分中发现溶酶体的存在,后经电镜观察证实。溶酶体是由单层界膜围成的颗粒,其大小形态以及内部结构均极不一致。由于所有溶酶体均含有酸性水解酶,故将此酶作为溶酶体的标志酶。溶酶体借助其所含50多种酶消化、分解各种内生性或外源性物质,因此,可将

肝细胞的简介

  人肝细胞切片 HE染色 LM10*40倍  肝细胞hepatocyte,hepatic cells,liver cellsLM(光镜):多面体形;核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核;胞质嗜酸性,含弥散分布的嗜碱性团块EM(电镜):(1)有三种功能面→血窦面→胆小管面→细胞连接面:

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(一)

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基于细胞实验的表型分析简介当需要持续获得高质量、高精确的数据时,那么迫切需要一台全自动基于细胞检测实验的多参数分析系统。一台紧凑的,全自动微孔板图像分析系统可用于多参数实验,如利用诱导多功能干细胞 (iPSC) 分化为心肌细胞,神经细胞和肝细胞研究中。

预测细胞毒性新方法——多种药物研发早期预测细胞毒性...

预测细胞毒性新方法——多种药物研发早期预测细胞毒性的解决方案在体外快速的、高效的、可靠的早期预测毒性对药物研发、减少药物临床试验风险至关重要。利用现代生命科学的新进展,建立和应用新药临床前安全性评价和毒理学机制研究的新技术、新方法和新模型成为当今国际新药研发的新趋势。高内涵筛选(HCS)系统可以说是

如何检测干细胞向肝细胞分化

用携带CTLA4Ig基因的重组腺病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMMSCs),体外向肝细胞诱导分化,并检测其免疫抑制功能.用含有HGF等细胞因子培养液诱导重组腺病毒Ad-CTLA4Ig感染大鼠BMMSCs向肝细胞分化.诱导后的细胞可

术语解析和区别:高内涵成像、高内涵筛选和高内涵分析

本文浅析了高内涵成像(HCI)、高内涵筛选(HCS)、高内涵分析(HCA)等术语间的区别,将这些基于图像的自动化高通量技术逐渐用于生成数据,可对临床前研究和下游Go/No-go决策提供支持。引言显微镜技术在过去几十年所取得的惊人进步,使得HCI(高内涵成像,High content imaging)

中国科学家利用新技术发现新生肝细胞来源

肝脏是人体内重要的代谢器官,主要功能细胞是肝细胞。肝脏一旦受损,需要“新生”肝细胞才能完成功能修复。因此,肝脏疾病治疗中寻找新生肝细胞的来源是科学家致力解决的问题。近日,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌研究组开发了一种可以长时间不间断捕捉细胞增殖的新技术——Pro

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗

肝细胞正常代谢功能

肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小叶结构,以及肝细胞中富含线粒体、内质网、核蛋白体和大量酶类,因而能完成复杂多样的代谢功能。每个肝细胞平均约含400个线粒体,呈圆形、椭圆形或棒形。

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材聚

肝细胞正常代谢功能

肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小叶结构,以及肝细胞中富含线粒体、内质网、核蛋白体和大量酶类,因而能完成复杂多样的代谢功能。 每个肝细胞平均约含400个线粒体,呈圆形、椭圆形或棒

肝细胞性黄疸的简介

  在病毒性肝炎、钩端螺旋体病、败血症、肝脓肿或磷中毒等情况下,所发生的黄疸都是肝细胞性黄疸。未受损害或损害较轻的肝细胞仍能形成结合胆红素,但所形成的结合胆红素有一部分可反流入血,因此血中也有结合胆红素。另外,肝细胞肿胀、门脉区炎性渗出物以及小胆管中胆栓之存在,都可妨碍胆汁排出,而促使结合胆红素反流

肝细胞正常的代谢功能

肝细胞的正常代谢功能是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的生化检验知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助!肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小

肝细胞正常的代谢功能

肝细胞的正常代谢功能是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的生化检验知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助! 肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的

关于肝细胞肝癌的简介

  原发性肝细胞肝癌远较ICC常见,绝大多数的肝细胞癌病例有乙肝/丙型肝炎的证据(90%左右) ,以及有肝硬化表现(80%左右) ,多数有AFP升高。CT平扫绝大多数病灶为低密度,边界较清,病灶内出现钙化极为少见;增强扫描,特别是螺旋CT双期扫描具有特征性,在动脉期表现为高密度,而在门脉期则为低密度

肝细胞性黄疸的概述

  黄疸症可根据上述的血红素代谢过程分为三类:溶血性黄疸,梗阻性(阻塞性)黄疸,肝细胞性黄疸  肝细胞性 黄疸hepatocellular jaundice,  是由于肝细胞病变,对 胆红素摄取、结合和排泄功能发生障碍,以致有相当量的 非结合胆红素(UCB)潴留于血中,而未受损的肝细胞仍能将非结合胆

肝细胞性黄疸的概述

  黄疸症可根据上述的血红素代谢过程分为三类:溶血性黄疸,梗阻性(阻塞性)黄疸,肝细胞性黄疸  肝细胞性 黄疸hepatocellular jaundice,  是由于肝细胞病变,对 胆红素摄取、结合和排泄功能发生障碍,以致有相当量的 非结合胆红素(UCB)潴留于血中,而未受损的肝细胞仍能将非结合胆

肝细胞性黄疸的介绍

  肝细胞性黄疸(hepatocellular jaundice)是由于肝细胞病变导致胆红素的摄取、转化和排泄能力降低所致的,为临床最常见的黄疸类型。黄疸为各种疾病引起的胆红素浓度升高,为一种临床症状。而凡是能够造成肝细胞功能障碍,影响胆红素摄取、结合和排泄的疾病均可引起肝细胞性黄疸。本症状常见于各

肝细胞中的多倍性

  多肝细胞是多倍体,含有4倍、8倍、16倍或更多倍的单倍体染色体组,尽管这一现象的重要性并不清楚。    现在,用小鼠所进行的一项研究表明,肝细胞在活体中既可增加也可降低它们的多倍性。多倍性逆转以前被认为是减数分裂所*的,但这项工作表明,它也可出现在正常体细胞中。    多倍性的增加是通过失败的胞

肝细胞癌的病理特征

如同任何其他癌症一样,当细胞机制发生突变导致细胞以更高的速率复制和/或导致细胞避免凋亡时,肝细胞癌就会发展。 特别地,乙型肝炎和/或丙型慢性感染可以通过反复引起机体自身的免疫系统攻击肝细胞,其中一些被病毒感染,其他细胞的无视有助于肝细胞癌的发展。 虽然修复后的这种不断的损伤循环可能导致修复期间的错误

肝细胞的次级溶酶体的简介

  此类溶酶体内除含有水解酶外,还含有相应的作用底物,以及由此形成的消化产物。由于所含底物的不同和消化程度的差异,构成了次级溶酶体形态的多样性。根据消化底物来源的不同,又可将次级溶酶体分为自生性、异生性和兼性三种。未被消化的物质残存在溶酶体中形成残质体,又称后溶酶体。

关于肝细胞的线粒体的介绍

  肝细胞的线粒体很多,每个细胞大约有1000个左右,遍布于胞质内。肝小叶不同部位肝细胞内线粒体的大小和形态不完全一致,在正常生理条件下,多为圆形和卵圆形,直径0.4-0.8μm。线粒体的共同基本形态结构特征是外被双层界膜--外界膜和内界膜,内界膜向线粒体内部伸展转折,形成许多嵴。内界膜将线粒体分隔

大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA检测法

大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 HGF 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 HGF与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠HGF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Stre

小鼠肝细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基

肝细胞对胆红素分泌障碍

肝细胞对胆红素分泌障碍肝细胞内结合胆红素是与胆固醇、胆汁酸盐、卵磷脂、水及电解质组成肝胆汁,通过高尔基复合体和微绒毛,分泌到毛细胆管的。“单纯的”或选择性胆红素分泌障碍是很少的。杜宾—约翰森(Dubin-Johnson)综合征和罗特(Rotor)综合征,是两种很相似的慢性特发性黄疸,可发生在同一家族

小鼠肝细胞原代培养

实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验