高效液相色谱仪为什么在使用前要排气泡

气泡—对于液相色谱系统来说可谓是头号敌人,如果系统中混入了较多的气泡,往往会造成压力不稳定、基线跑不准、尖锐的噪声峰、分析灵敏度下降等负面影响,让实验操作者苦不堪言。那么这些气泡是从哪来的?有什么危害?我们该如何处理呢? Where—气从哪里来 一般来说,液相色谱中的气泡来自于流动相 液体对于气体都有一定的溶解度 好比一瓶碳酸饮料,打开瓶盖,压力降低,会有气泡产生 如果加热或者搅拌,也会有气泡产生 所以对于流动相也一样, 如果温度升高、剧烈震动、压力降低等都会产生气泡 还有一种情况,两种不同的溶剂混合,热力学体积会发生变化 如在水中加入乙醇,会发现有较多的气泡溢出 因此在两相混合时也容易产生气泡,尤其在梯度变化时更为明显 除了流动相外,吸滤头、泵头受到污染也可能导致气泡的产生 此外如果是手动进样,则需要排除样品注射器中的空气 Why—气泡的危害 气泡具有可压缩性,导致系统压力波动和流速不稳 出现......阅读全文

液相色谱质谱仪液相部分的维护

液相部分的维护  要求使用220V单相交流电。如发生断电,不管任何原因造成的,首先关闭仪器面板左下角的开关,等待供电恢复10分钟以上再开启电源,否则有可能烧毁电路板。  仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气,输出压力为0.6~0.7MPa。  实验开始前先检查液氮罐液体存量是否充足。 

高效液相过滤头和通道都没有气泡

你先用粘度小的乙腈排气,再用你的缓冲盐来排气泡。个人认为,是因为泵里面有气泡,水的粘度太大,泵产生不了足够的吸力,将水从流动相瓶中吸进仪器中。个人见解。

液相泵进了气泡泵不出液体了怎么办

首先,把单向阀卸下来超声。单向阀有两个,注意超声的时候千万别倒了。卸下来的时候是什么方向,超声的时候就是什么方向。纯净水中超声15min,然后甲醇中超声15min。然后排气,把色谱柱卸下来,排气。排气时间长一点,10min左右吧。然后关上排气阀,用甲醇水把系统整个先冲一遍,如果你之前用过流动相的话可

液相管路从排气阀出气泡怎么办

既然从排气阀走,那就应该是没有进泵。没关系,多排一会儿。一般排气5-10min就足够将气泡全都排掉。如果还是有,那可能是单向阀或者插在流动相里面的过滤头堵住了。过滤头可以拆下来,用纯甲醇超声一下。单向阀也可以超声,就是注意方向。也可以把过滤头拔下来,然后用针头针管代替,在排气的状态下推一管甲醇或者甲

液相色谱和气相色谱有哪些不同

气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后,被载气带入色谱柱进行分离,各组分先后进入检测器,用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的

液相色谱和气相色谱有哪些不同

气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后,被载气带入色谱柱进行分离,各组分先后进入检测器,用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的

液相色谱与气相色谱的比较

  液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。此外,液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气

液相色谱和气相色谱有何异同?

  色谱法是一种常见的分离技术,其原理是利用欲分离组分在两相间具备不同的分配系数,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中的不同物质以不同速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。   按两相的物理状态,可以分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC),在现代样品分析中,气相色谱和液相色谱都是普遍

液相色谱流动相不过滤

因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。

液相色谱流动相走空

泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。

液相色谱流动相的脱气

HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果

液相色谱流动相的滤过

流动相的滤过所有溶剂使用前都必须经0.45µm(或0.22µm)滤过,以除去杂质微粒,色谱纯试剂也不例外(除非在标签上标明“已滤过”)。用滤膜过滤时,特别要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁用

液相色谱流动相的特征

流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求:(1)能溶解样品,但不能与样品发生反应。(2)与固定相不互溶,也不发生不可逆反应。(3)粘度要尽可能小,这样才能有较高的渗透性和柱效。(4)应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时,溶剂要不吸收紫外光。(5)容易精制、纯化、毒性小,不易着火,价格尽量低等

液相色谱流动相的特点

  液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:  (1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。  (2)流动相与样品不产生化学反应  (3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的

液相色谱流动相的贮存

流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应

液相色谱流动相的贮存

流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液

液相色谱流动相的选择

在化学键合相色谱法中,溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中,溶剂的强度随极性的增强而增加;在反相色谱中,溶剂的强度婕缘脑銮慷跞酢?BR>正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性

液相色谱流动相的贮存

液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸

高效液相色谱流动相选择

流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察

高效液相色谱流动相选择

       流动相的性质要求        一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。       流动相选择        1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况

色谱泵气泡的产生

  脱气不佳,有气泡在溶剂中为气泡产生的原因,对这样的溶剂直接使用时,就会从溶液中逸出气泡,特别是低压混合系统,气泡很容易产生并聚集在泵头,流动相可能在泵头释放出气泡以便吸液时泵头有负压产生。  除此以外,泵头内会陷入泵入口管路而形成的非常微小的气泡,大气泡会由这些小气泡聚成,从而使压力产生波动。如

液相色谱保养知识

1、  色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死(如ACN适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相)2、  对于手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。3、流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。4、带seal-wash的1100,

Waters液相色谱教程

本资料来自于Waters中国有限公司培训中心 包括4个文件: 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识A 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识B 液相色谱教程(三)液相色谱实验操作 液相色谱教程(四)液相色谱柱基础知识   下载:Waters液相色谱教程

液相色谱柱通论

选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱      了解色谱填料的物理和化学性

高效液相色谱分类

按照分离原理分类,大概可以分为:1.吸附色谱:基于各组分对固定相的吸附能力不同而实现分离的方法。比较常见的色谱柱是火星硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于测定结构异构体。2.分配色谱:基于样品在流动相和固定相之间溶解度不同的原理实现分离。比较常见的正相氰基柱(正相)和极为普遍的C18色谱柱(

液相色谱基线噪音

对的,虽然理论上分析纯试剂可以上HPLC的,但很多国产的达不到要求,会使仪器噪音高很多但,你可以分析一下噪音的来源1,换100%纯水,不接柱子,当基线平稳时,进空针(就是什么都不进,走一次方法)。如果这时基线同样出现之前的情况,那么应该是仪器本身的问题,联系工程师解决吧(如果用的等度洗脱,这步省略)

液相色谱柱种类

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱

液相色谱柱种类

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱

液相色谱柱种类

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱