凋亡试剂盒V13241和V13245检测步骤

实验方法该实验采用的是经过优化的喜树碱诱导Jurkat细胞系凋亡实验条件。其他类型的细胞需做相应调整。该试剂盒在传统及Attune™声波聚焦流式细胞仪上验证过,使用Attune™声波聚焦流式细胞仪时,各种流速(25 μL/min 到 1,000 μL/min)都可以。1.用有效方法诱导凋亡;设一不加诱导的阴性对照。2.孵育之后收集细胞并用冷的PBS洗涤。3.制备1×annexin V 结合缓冲液:按10次分析的量计算,加1 mL试剂C到4ml的去离子水中。4.制备100μg/mL的PI工作液:用45μl 1×annexin V 结合缓冲液稀释5μl试剂B,剩余可保存备用。5.再次离心步骤2中收集的细胞,弃去上清,重悬在1×annexinV 结合缓冲液。计数并用上述缓冲液稀释至约1 × 106 ......阅读全文

人PKC-elisa检测试剂盒操作步骤

人PKC elisa检测试剂盒操作步骤:1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出

简述细胞凋亡检测

  细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技

细胞凋亡的检测

早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期

细胞凋亡的检测

早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法)实验步骤展开晚期细胞凋亡检测(TUNEL法)实验步骤晚晚期细胞凋亡检测(DNA含量分析法)实验步骤展开 

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

细胞凋亡检测方法

细胞发生凋亡时,不同区域内(如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等)会发生不同的生理生化改变。因此,针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡检测原理:Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白,正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl

细胞凋亡mRNA检测

研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们

细胞凋亡的检测

早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

细胞凋亡检测实验

实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和

流式细胞术做凋亡的操作步骤和注意事项

流式样品的准备:DNA含量的测定:用本法可以测定细胞周期、细胞倍体和凋亡,在样品的制备中存在的问题主要是细胞的聚集和碎片,建议在固定细胞时加入3%小牛血清。1 培养或分离的细胞约110 6,离心沉淀后用0.3ml含10%小牛血清的PBS悬浮,移入1.5mlEP管中,加入0.7ml无水乙醇,置-20摄

流式细胞术做凋亡的操作步骤和注意事项

流式样品的准备:DNA含量的测定:用本法可以测定细胞周期、细胞倍体和凋亡,在样品的制备中存在的问题主要是细胞的聚集和碎片,建议在固定细胞时加入3%小牛血清。1 培养或分离的细胞约110 6,离心沉淀后用0.3ml含10%小牛血清的PBS悬浮,移入1.5mlEP管中,加入0.7ml无水乙醇,置-20摄

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)实验步骤

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

小鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒

小鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒  (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)   原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 sFas 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sFas与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sFas,形成免疫复合物连接在板上,辣

豚鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒

豚鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒  (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内)   原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗豚鼠 BAX 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BAX与单抗结合,加入生物素化的抗豚鼠BAX,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧

人凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒

人凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 sFas 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sFas与单抗结合,加入生物素化的抗人sFas,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Str

人凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒

人凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 BAX 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BAX与单抗结合,加入生物素化的抗人BAX,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strept

小鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒

小鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 BAX 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BAX与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠BAX,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Str

野兔热(Tul)核酸检测试剂盒实验步骤

  野兔热(Tul)核酸检测试剂盒实验步骤:   ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。   ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合

细胞凋亡实验步骤及注意事项

一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的

早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别

细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。

早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别

细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。

早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别

细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。

早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞的区别

细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。

细胞凋亡的检测方法

(一)   测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。(二)   用价值流式细胞仪检测有下列特点:(1)检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡

几种检测凋亡的方法

一、形态学观察方法(一)HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。(二)丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。(三)台盼蓝染色:如果细胞膜

细胞凋亡的早期检测

1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都

细胞凋亡的检测方法

(一) 测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。(二) 用价值流式细胞仪检测有下列特点:(1)检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比

几种检测凋亡的方法

一、形态学观察方法(一)HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。(二)丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。(三)台盼蓝染色:如果细胞膜