凋亡试剂盒V13241和V13245检测步骤

实验方法该实验采用的是经过优化的喜树碱诱导Jurkat细胞系凋亡实验条件。其他类型的细胞需做相应调整。该试剂盒在传统及Attune™声波聚焦流式细胞仪上验证过,使用Attune™声波聚焦流式细胞仪时,各种流速(25 μL/min 到 1,000 μL/min)都可以。1.用有效方法诱导凋亡;设一不加诱导的阴性对照。2.孵育之后收集细胞并用冷的PBS洗涤。3.制备1×annexin V 结合缓冲液:按10次分析的量计算,加1 mL试剂C到4ml的去离子水中。4.制备100μg/mL的PI工作液:用45μl 1×annexin V 结合缓冲液稀释5μl试剂B,剩余可保存备用。5.再次离心步骤2中收集的细胞,弃去上清,重悬在1×annexinV 结合缓冲液。计数并用上述缓冲液稀释至约1 × 106 ......阅读全文

凋亡试剂盒V13241和V13245检测步骤

实验方法该实验采用的是经过优化的喜树碱诱导Jurkat细胞系凋亡实验条件。其他类型的细胞需做相应调整。该试剂盒在传统及Attune™声波聚焦流式细胞仪上验证过,使用Attune™声波聚焦流式细胞仪时,各种流速(25 μL/min 到 1,000 μL/min)都可以。1.用有效方法诱导凋亡;设一不加

生物凋亡试剂盒AP101检测步骤

联科生物凋亡检测试剂盒(Annexin V/PI apoptosis kit,Cat#:AP101)是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪,荧光显微镜或其他荧光检测设备进行检测。本试剂盒还提供了碘化丙啶(P

TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤

  凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法)   细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶

TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤

凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3羟基在末断转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下,与生物素或

TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤

  凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法)   细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3羟基在末断转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用

TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤

凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法)细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用

细胞凋亡,细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

  一、形态学观察方法   1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。   2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧

细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法

细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小

细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法,应用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂的DNA 3’-

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(一)

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。第一种 细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1 光学显微镜和倒置显微镜

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤介绍

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。   第一种 细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(二)

第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。线粒体

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(三)

第六种  Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(四)

方法:1 、悬浮细胞的染色;(1)收获正常和诱导凋亡的细胞(0.5~1′106),PBS洗2次,1000rpm′10min。(2)3%多聚甲醛冰浴10min,PBS洗2次,1000rpm′10min。(3)加入PBS-T溶液,37℃孵育15min,PBS洗2次,1000rpm′10min。(4)加入

2-TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明

DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUT

凋亡聚焦:invivo凋亡检测

  目前市场上凋亡检测的产品真不少,但大多数是针对细胞。若想开展in vivo的凋亡检测,自然要花费一番功夫寻找产品。   Caspase检测   赛默飞世尔科技推出了DyLight 690和DyLight 747细胞凋亡体内检测试剂盒,为活体的凋亡检测提供了准确的方法。试剂盒包含DyLight

细胞凋亡的细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

细胞凋亡的细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

检测凋亡和其他形式的细胞死亡

实验步骤基本方案1 用活细胞或荧光染料定量细胞活性显微镜观察是一种简单且准确的检测凋亡的方法。凋亡的标志性特征包括细胞核浓缩 、细胞膜完整但出现发泡现象,以及清晰的胞质。材 料 (带7 项 目 见 附 录 1)V 染料混合剂P B S 的 细 胞 悬 液 (附 录 1)9 6 孔圆底板显微镜用的载玻

山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤

  山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤:   1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀

细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

细胞凋亡检测

实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时,细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期,位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V(

细胞凋亡检测方法总览(早期检测、晚期检测和mRNA水平)

细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚期检测1、TUNEL2、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测)当

TUNEL-法测凋亡技术操作步骤

一、TUNEL检测原理      TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。     其原理是细胞凋亡发生时,内源性核酸酶激活,

TUNEL-法测凋亡技术操作步骤

   TUNEL 法测凋亡操作步骤   一、TUNEL检测原理    TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。   

TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法

原理 在细胞凋亡的过程中,基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段,这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端,来标记缺口。酶底物显色后,可以光镜检查被染色的细胞。

TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法

       细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。      

hoechst-和tunel法检测细胞凋亡的区别

hoechst法看凋亡,主要是看sub-G1期的细胞数量。原理就是凋亡的细胞,由于DNA正在降解,所以含量比正常细胞要少。在以PI荧光强度(代表DNA量)为横坐标的柱状图上,一般会有2个峰,G1和G2,G1就是正常细胞,G2是正在分裂的2倍体。2者间是S期细胞。如果有凋亡的细胞,在G1前会有细胞出现

人PKC-elisa检测试剂盒操作步骤

人PKC elisa检测试剂盒操作步骤:1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出