实验常见问题解答汇集
BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序，为什么需要构建TA克隆后测序？由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同，未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U，而C若发生甲基化则不变，这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图，无法确定甲基化的程度，必需通过回收PCR产物，进行TA克隆，随机挑选5-10个单克隆测序的方式才能计算获得每个CG位点的甲基化情况。如何提高哺乳动物细胞的转染效率？对于生物技术科研实验，拟将外源基因（或DNA序列）导入到体外培养的细胞中（尤其是各类哺乳动物细胞），让外源基因在细胞中进行表达甚至翻译，到达预期目的，那么除了保障携带基因的质粒载体上具备高表达元件（启动子、增强子、终止子等）之外，另外一个重要因素是让外源基因的转染效率达到极高值，尤其对于基因干扰研究实验而言，达到80%以上的转染效率，是干扰评价实验顺利完成的前提保证。关于如何提高转染效率，以下是锐赛团队实践一些心得，系统......阅读全文
核酶实验——锤头型核酶实验
核酶（ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子，通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物 RNA 分子，从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中，参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法
薄层色谱实验的实验步骤
偶氮苯和苏丹Ⅲ由于极性不同，利用薄层色谱(TLC)可以将二者分离。 (1)点样。 取两块制好的薄层板，分别在距一端1 cm处用铅笔轻轻画一条横线作为起始线。取管口平整的毛细管插入样品溶液[6]中，在一块板的起点上点1%偶氮苯的甲苯溶液和混合液两个样点。在第二块板的起点线上点1% 苏丹Ⅲ 的甲
克尔效应实验的实验原理
各向同性的介质如玻璃，石蜡，水，硝基苯等，在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质，表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比，称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压，在电场作用下，由于分子的规律排列，这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质，光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电
抗球蛋白实验（直接Coombs实验和间接Coombs实验）
机体受某些抗原刺激后，可产生不完全抗体，由于这种抗体体积较小、长度短，只能与颗粒抗原一方相结合(又称单价抗体)，因而不能出现肉眼可见的凝集反应。Coombs首先根据抗体存在于球蛋白，注入异种动物的球蛋白又是抗原的原理，将含有不完全抗体的血清球蛋白免疫异种动物，获得抗球蛋白抗体，此种抗体可以起到桥梁作
克尔效应实验的实验方法
1.放入克尔盒，并转动至消光位置；2.接通克尔盒的偏转电源，即可观察到屏幕上有光亮。改变两极板之间的电压，可以观察到屏幕上的光强会随之变化；3.保持两极板之间的电压不变，旋转克尔盒，同样可以观察到屏幕上光强变化。
细胞融合实验的实验原理
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
疼痛实验动物模型制作实验
神经病理痛模型(neuropathic pain model) 组织炎症疼痛模型 疾病并发慢性痛模型 实验方法原理 疼
肥达实验，如何讨论实验结果？
肥达氏反应试验主要有“Ｏ”、“Ｈ”、“Ａ”、“Ｂ”、“Ｃ”等结果。“Ｏ”为伤寒菌体抗原，受其他因素影响较小，临床价值较大，阳性见于伤寒及一些其他细菌感染；“Ｈ”为鞭毛抗原，受防疫注射及一些自然因素影响较大，容易出现假阳性，临床诊断价值不如“Ｏ”有价值，常需反复检查，动态观察；“Ａ”、“Ｂ”“Ｃ”为副
免疫学实验动物实验介绍
动物实验介绍： 动物实验是在实验室内，为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物 进行的科学研究。动物实验必须由经过培训的、具备研究学位或专 业技术能力的人员进行或在其指导下进行。 动物实验正常值： 无 动物实验临床意义： 实验动物科学发展的最终目的，就是要通过对动
ELISA实验检测抗体的实验步骤
操作步骤： （1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 （2）加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 （3）加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2
ELISA实验检测抗体的实验步骤
（1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 （2）加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 （3）加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来确定二抗用
电子衍射实验的实验原理
波在传播过程中遇到障碍物时会绕过障碍物继续传播，在经典物理学中称为波的衍射，光在传播过程表现出波的衍射性，光还表现出干涉和偏振现象，表明光有波动性；光电效应揭示光与物质相互作用时表现出粒子性，其能量有一个不能连续分割的最小单元，即普朗克1900年首先作为一个基本假设提出来的普朗克关系E为光子的能量，
电子衍射实验的实验原理
波在传播过程中遇到障碍物时会绕过障碍物继续传播，在经典物理学中称为波的衍射，光在传播过程表现出波的衍射性，光还表现出干涉和偏振现象，表明光有波动性；光电效应揭示光与物质相互作用时表现出粒子性，其能量有一个不能连续分割的最小单元，即普朗克1900年首先作为一个基本假设提出来的普朗克关系E为光子的能量，
电子衍射实验的实验原理
波在传播过程中遇到障碍物时会绕过障碍物继续传播，在经典物理学中称为波的衍射，光在传播过程表现出波的衍射性，光还表现出干涉和偏振现象，表明光有波动性；光电效应揭示光与物质相互作用时表现出粒子性，其能量有一个不能连续分割的最小单元，即普朗克1900年首先作为一个基本假设提出来的普朗克关系E为光子的能量，
免疫学实验凝集实验介绍
凝集实验介绍： 凝集实验是血清学试验方法中的一种，血清学试验是抗原抗体在体外出现可见反应的总称，故又称抗原抗体反应。它可以用已知抗体(细菌抗血清)检测未知抗原(待检细菌);也可用已知抗原(已知病原菌)检测患者血清中的相应抗体及其效价，是临床诊断、实验室研究和细菌学鉴定的重要手段之一。凝集实验正常值
疼痛实验动物模型制作实验
实验方法原理 疼痛是一种与潜在和实际组织损伤相关的不快的感觉和情感经历。在生理情况下动物受到伤害性刺激时，通常会即刻产生快速的躲避或防御性反应行为，称为急性痛反应。实验材料 实验动物实验步骤 (1)神经瘤(neuroma)模型20世纪70年代，由Wall与其同事创建的神经病理性痛模型。其制备方法较为
肥达实验，如何讨论实验结果
肥达氏反应试验主要有“Ｏ”、“Ｈ”、“Ａ”、“Ｂ”、“Ｃ”等结果。“Ｏ”为伤寒菌体抗原，受其他因素影响较小，临床价值较大，阳性见于伤寒及一些其他细菌感染；“Ｈ”为鞭毛抗原，受防疫注射及一些自然因素影响较大，容易出现假阳性，临床诊断价值不如“Ｏ”有价值，常需反复检查，动态观察；“Ａ”、“Ｂ”“Ｃ”为副
Transwell侵袭实验总结－（2）－实验用品
我的课题涉及Transwell侵袭实验和Transwell迁移实验，其他方面的Transwell应用我不太清楚，因此这里主要谈谈Transwell侵袭实验。1．实验用品：① Transwell小室：多种厂家可提供，论坛里常用的是Costar、Corning、BD生产的小室，我们实验室用的是Chemi
凝胶迁移实验（EMSA）实验方法
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白
燃烧综合实验台热工实验教学设备实验功能
1、本生灯火焰内外锥分离的原理和方法。 2、测定射流火焰的温度分布。 3、测定层流扩散火焰长度与燃料体积流量之间的关系曲线。 4、比较射流扩散燃烧与预混合燃烧的异同。 5、观察贝克-舒曼(Burk-Schumann)火焰现象。 6、观察预混火焰的回火和吹脱现象，测定
YAC实验
1. 尽管当插入片段大于100 kb 时，YAC克隆是可供选择的基因组DNA大片段克隆方法之一，但该系统的一些特性使之很难被迅速采纳为常规克隆手段。2. 在复杂的酿酒酵母菌的基因组中，通常所用的YAC只是一个单拷贝。3. 因此在YAC文库中鉴定一个克隆，其信噪比较之在λ噬菌体载体或粘粒载体文库
实验守则
一. 上实验课必须带工作服（白大衣），教科书，实验指导，实验报告及绘图用具（文具）。二. 应做好实验前的预习，明确实验指导中所提出的目的要求。三. 要爱护显微镜，实验用具和教学标本，应按规定进行实验操作。四. 要坚持严格科学态度，耐心，细致，认真进行实验和思考。五. 损坏实验用具和教学标本
隐血实验
实验方法原理 血红蛋白中的亚铁血红素有类过氧化物E的活性．能催化H2O2放出新生态的O2将受体邻－甲苯胺氧化成邻甲偶氮而显蓝色．试剂、试剂盒 邻甲苯胺H2O2实验步骤 1、用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉杆或白瓷板上．2、滴加0.15g/L邻甲苯胺冰乙酸液2-3滴于便上．3、H2O2加2-3滴4、观察
实验电炉
实验电炉主要用于实验，多用作定量分析烧结、灰化试验用，是间歇式电阻炉的一种。当今应用于大专院校、工矿企业等实验和小批量生产之用。
实验守则
实验步骤一. 上实验课必须带工作服（白大衣），教科书，实验指导，实验报告及绘图用具（文具）。二. 应做好实验前的预习，明确实验指导中所提出的目的要求。三. 要爱护显微镜，实验用具和教学标本，应按规定进行实验操作。四. 要坚持严格科学态度，耐心，细致，认真进行实验和思考。五. 损坏实验用具和
ELISA实验
实验材料 抗原血清试剂、试剂盒 碳酸盐包被缓冲液PBSTBSA仪器、耗材 96孔酶标板4℃冰箱恒温培养箱分光光度计实验步骤 一、包被抗原 1. 用50mM 的碳酸盐包被缓冲液（pH 9.6）溶解抗原，使抗原浓度为10-20 μg/ml，加100 μl/孔到96 孔酶标板，4℃放置过夜。2. 第二天弃
萃取实验
现用CCl4从溶有碘的氯化钠溶液中萃取碘并用分液漏斗分离两种溶液。其实验操作可分解为如下几步:A.把盛有溶液的分液漏斗放在铁架台的铁圈中;B.把50 mL混合溶液和15 mL CCl4加入分液漏斗中，并盖好玻璃塞;C.检查分液漏斗活塞和上口的玻璃塞是否漏夜;D.倒转漏斗用力振荡，并不时旋开活塞放气，
核酶实验
锤头型核酶实验 发夹型核酶实验 其他类型的核酶 实验方法原理 锤头型核酶是最简单的一类核酶，而且其靶序列也比较简单。锤头型核酶发现于几种植
LCM－实验
实验方法原理 采用激光切割等技术将生物样品片子等不易观察和检测的样品进行处理的技术，具有简单快捷，效率高等特点。 实验材料 RNaseAway