微生物学技术:用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
(一)实验目的了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。(二)实验原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期,各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。比浊法是根据细菌悬液细胞数与混浊度成正比,与透光度成反比关系,利用光电比色计测定细胞悬液的光密度(即OD值),用于表示该菌在本实验条件下的相对生长量。实验设正常生长、加酸抑制和加富培养等三种处理,以了解细菌在不同生长条件下的生长情况。(三)实验器材 (1)活材料:大肠杆菌(E.coli)。(2)培养基和试剂:牛肉膏蛋白胨液体培养基14支(每支10mL),浓缩5 倍的牛肉膏蛋白胨培养基1支。无菌酸溶液(甲酸:乙酸:乳酸=3:1:1)。&n......阅读全文
免疫比浊法分类
1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成
免疫比浊法分类
1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被 免疫复合物吸收。 免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与 免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与
免疫比浊法原理
免疫比浊法(Immunoturbidimetric Assays)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性 免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固
改良硫酸钡比浊法测定硫酸铬的注意事项
①也可用聚乙烯醇溶液代替明胶溶液,结果相似。②配制方法:称取2.0g聚乙烯醇,加入150ml水,在70℃水浴上不断搅拌加热溶解。另称取59g氯化钡溶解于300ml水中,边搅拌边加热混合两种溶液,冷却。再加入15ml浓盐酸,最后滴加数滴二甲苯。放于冰箱中可保存一个月以上。
微生物比浊法测定仪的相关内容
1、集恒温、振摇、培养及在线检测等多种功能为一体,全自动操作;每个培养箱内可置放两套拉丁方阵,共计40支试管,可同时在3~4个小时内完成两种或两组抗生素效价测定。 2、智能化终点判断,保证测定结果的准确性。 3、实时监控细菌生长,自动绘制细菌生长曲线。 4、效价计算结果符合2005版《中华
硫酸钡比浊法测定锂化合物中的硫
一、方法要点采用硫酸钡比浊法测定硫酸根含量。加入甘油和乙醇作为稳定剂,氯化钡作为反应剂,在一定的酸度下,利用固体氯化钡溶解速度来控制硫酸钡悬浮液生成的速度,用2cm比色皿,在波长430nm处测量吸光度,方法的灵敏度为1×10-3%。二、试剂与仪器(1)甘油和乙醇的混合液(1+2):以1份甘油和2份乙
细胞技术专题:细胞生长曲线实验
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指数生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部
改良硫酸钡比浊法测定硫酸铬所需仪器和试剂
仪器①容量瓶:100ml、1000ml。②烧杯:50ml。③分光光度计。④磁力搅拌器。⑤秒表。试剂①硫酸盐标准贮备液:见铬酸钡二苯碳酰二肼分光光度法试剂①。②硫酸盐标准使用液:吸取硫酸钾贮备液10.00ml于100ml容量瓶中,用水稀释至标线。此溶液每毫升含100μg硫酸根。③0.30%(m/V)明
光扫描比浊法的概念
光扫描比浊法(scanning turbidimetry),是测定粉状物料颗粒组成的一种方法。
光扫描比浊法的原理
利用悬浮液中颗粒浓度不同、透过光强不同这一原理。
免疫比浊测定的影响因素
抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。当抗原过量时,形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测定
免疫比浊法的发展历程
早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低,而且时间一般要
关于比浊法的应用简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光
免疫比浊法的发历程
早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如 免疫扩散、 免疫电泳、血凝试验、补体结合等。 上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。 70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低
比浊测定的作用和原理
中文名称比浊测定英文名称nephelometry test定 义一种定量检测抗原的试验。即抗原与抗体在液相中结合而形成可见的复合物,在测定仪中光线〔激光或红外光〕照射下,发生光散射〔散射比浊〕或光通量减少〔透射比浊〕。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
免疫比浊法的发展历程
早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低,而且时间一般要
免疫比浊法的方法介绍
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。
免疫比浊法的发展历程
早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低,而且时间一般要
免疫比浊法的发展历程
早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如 免疫扩散、 免疫电泳、血凝试验、补体结合等。 上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。 70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低
免疫比浊法的原理简介
免疫比浊法(Immunoturbidimetric Assays)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性 免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固
免疫比浊法的方法分类
1. 透射免疫比浊法:通过检测光被吸收、衍射、反射和折射后光线减弱的变化,来定量抗原抗体的复合物。2. 散射免疫比浊法:通过检测光折射和衍射而形成的散射光强度来定量抗原抗体的复合物。3. 免疫胶乳比浊法:是以胶乳作为载体对小分子免疫复合物进行微量测定,进一步提高了免疫浊度测定的灵敏度。
比浊法的术语基本介绍
比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。 是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。 本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质
在蛋白检测上透射比浊法与散射比浊法的优缺点
透射比浊与散射比浊是免疫比浊的常见的两种方法,其反应的原理一样,只是检测的光信号与仪器的检测器有区别。两者各有优缺点,简述如下:1、透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的周期较长。2、散射比
分析试验比浊法简介
比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。 是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。 本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质
比浊法相关术语简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强
麦氏比浊管简介
在微生物学中,通过比对溶液浊度,麦氏比浊管常用来校对细菌悬浮液至某个特定浓度。例如在医药学领域常见的微生物抗药物敏感性试验中,用来测量最小抑菌浓度。 最初的麦氏比浊管是通过混合特定浓度的氯化钡和硫酸,从而形成硫酸钡悬浮液。例如0.5号麦氏比浊管是由0.05毫升1%氯化钡溶液加9.95毫升1 %
免疫透射比浊法
一、原理当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。这一方法早于1959年Schultre和Schuick等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物,导致浊度的改变,再进行透射比浊测定,一般采用抗体对
什么是免疫比浊法?
免疫比浊法(Immunoturbidimetric Assays)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性 免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固
散射比浊法与透射比浊法哪个与浓度呈负相关
在比浊分析中,一种是光直线通过,测定光直射后的吸收量,称直射比浊法。 另一种利用光入射后,遇到溶液产生的漫散射,测定其散射光量。因不受色度影响,这种方法测定浊度要比直射更为精确。 在比色分析中,常用终点法。原理是加入试剂后,终点反应显色(或产生浊度)不再变化,利用散射光比色的一种定量检测方法。 速率
散射比浊法与透射比浊法哪个与浓度呈负相关
在比浊分析中,一种是光直线通过,测定光直射后的吸收量,称直射比浊法。 另一种利用光入射后,遇到溶液产生的漫散射,测定其散射光量。因不受色度影响,这种方法测定浊度要比直射更为精确。 在比色分析中,常用终点法。原理是加入试剂后,终点反应显色(或产生浊度)不再变化,利用散射光比色的一种定量检测方法。 速率