免疫学技术:放射免疫对流电泳

(一)原理将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线,作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经过显影把“像”显示出来。这样,能检出肉眼看不见的沉淀线,从而提高反应的敏感性,这种方法可应用于凝胶中的所有反应。(二)材料1、放射性同位素标记的抗原或抗体2、X—射线胶片或全色胶片3、显影液与定影液4、其它同对流免疫电泳(三)操作方法1、按对流免疫电泳制备凝胶板并打孔。2、加样阴极端孔内加抗原,阳极端孔内加抗体。在加被检抗体样品时,迅速加入标记抗原(2 000~3 000cpm),并使之混合,勿使抗原吸收后再加标记抗原,以免由于标记原的滞面而形成假阳性。3、电泳电流2.6cm×7.5cm的小板用4mA。4、电泳后,平板浸在3%HCl中漂洗8h,换液2次。5、用流水漂洗过夜。6、干燥室温或鼓风机吹干。7、曝光在暗室将胶片切成与平板一......阅读全文

放射免疫测定法介绍

放射免疫测定法是用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术。该法结合了放射性核素高灵敏性和抗原抗体反应的特异性,使检测的灵敏度达到pg水平。常用于标记的放射性核素为125碘和131碘,分为液相和固相两种方法。该法常用于胰岛素,甲状腺素,生长激素和IgE等微量物质的测定。

放射免疫电泳的概念

中文名称放射免疫电泳英文名称radioimmunoelectrophoresis定  义抗原或抗体带放射性标记的一种免疫电泳,以提高检测的灵敏度。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

放射免疫分析的原理(三)

  RIA法的影响因素  pH和离子强度;反应温度,温度一般为37℃,也有45℃,室温,4℃ 冰箱;反应时间,操作中的注意事项:戴手套、防护镜等,将试剂盒从冰箱中取出,室温下放置30 min方可使用。  (1)编号:第一排是标准管:根据标准品浓度由低到高A,B,C,D,E,F,G……;第二排是被测样

放射免疫沉淀法

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

放射免疫治疗的方法介绍

中文名称放射免疫治疗英文名称radio-immunotherapy定  义应用放射性核素标记的单克隆抗体治疗肿瘤的方法。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),肿瘤免疫(三级学科)

著名免疫学家发表突破性技术:实时成像免疫应答

  科学家们开发了一种新技术,能够不进行抽血或者组织活检,实时成像免疫系统对肿瘤的应答。这一成果发表在本周的美国国家科学院院刊PNAS杂志上,是诊断癌症和监控治疗效果的一大突破。  “每一个免疫学家都希望能够监控免疫应答的进行,我们有哪些选择呢?”这项研究的领导者,Whitehead研究所的著名免疫

免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)

基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm

免疫学技术专题:中性粒细胞吞噬功能的测定

中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等,是机体天然免疫力的重要组成部分。试剂及材料1. 白色葡萄球菌2. 肉汤培养基3. 硷性美蓝液操作方法1. 菌液的制备  将白色葡萄球菌接种于中,放37℃温箱内培养12h左右;置水浴中加热10

免疫学实验基因诊断技术检测梅毒螺旋体介绍

  基因诊断技术检测梅毒螺旋体介绍:  基因诊断技术检测梅毒螺旋体是利用基因诊断技术对是否被感染梅毒进行鉴别的检查方法。  基因诊断技术检测梅毒螺旋体正常值:  试验呈阴性,即是未检出有梅毒螺旋体DNA。  基因诊断技术检测梅毒螺旋体临床意义:  非梅毒螺旋体抗原血清试验目前一般作为筛选和定量试验,

胶体金标记技术在免疫学中的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫学检测技术在临床的应用研究有哪些?

  免疫学是研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的生物-医学科学。免疫应答是机体对抗原刺激的反应,也是对抗原物质进行识别和排除的一种生物学过程。  随着生物医学的研究进展,免疫学以其独特的优势有力的推动了医学和生物学中各个领域的发展,人们对免疫的本质有了更加全面的认识。目前,免疫学已经成为医学和生

免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

  第一节  免疫细胞的分离  一、外周血单个核细胞的分离  将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。  主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释

免疫学词汇免疫学检测的临床意义

异常结果:在临床上常表现为各种免疫疾病:免疫缺陷病,自身免疫疾病,细菌入侵,病毒感染和肿瘤等。需要检查的人群:有免疫缺陷和免疫力低下的人群。

检测细胞因子的方法

  目前检测细胞因子的方法主要有生物学测定、免疫学测定、分子生物学技术和流式细胞仪等。生物学测定也叫生物活性测定,主要根据各种细胞因子的不同生物活性检测。免疫学测定是目前使用最为广泛的方法,主要利用细胞因子蛋白或多肽的抗原性,获得特异性抗血清或单克隆抗体,利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定

关于链球菌性肺炎的检查方式介绍

  1、链球菌性肺炎的血象检查:全身感染时血白细胞可明显增高达(20~30)×109/L,中性粒细胞占90%左右。老年人及免疫功能低下者则白细胞增高不明显,但分类中性仍占80%以上。  2、链球菌性肺炎的细菌学检查:患者化脓病灶处分泌物(如痰、脓、脑脊液)涂片革兰染色查找细菌,并做细菌培养,发热患者

化学发光技术

放射免疫分析法有很高的灵敏度,但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来,许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中,在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法,由于这种方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单

放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)及其在检验医学中的..

放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)及其在检验医学中的应用放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和 Berson创立,并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法

免疫学技术:悬浮细胞的免疫荧光标记实验

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验方法基本方案实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒

流式细胞免疫学技术质量控制的知识点

(一)细胞悬液免疫荧光染色的质量控制1.荧光染料浓度的控制。2.温度对荧光染色的影响。3.pH对荧光发射强度的影响。4.固定剂对免疫荧光染色的影响。(二)单细胞悬液制备的质量控制1.温度与pH。2.采用适当的制备方式。3.用溶血剂处理红细胞。4.实体组织来源标本在制备单细胞悬液过程中,最好采用机械法

放射免疫分析法的原理

使放射性标记抗原和未标记抗原(待测物)与不足量的特异性抗体竞争性地结合,反应后分离并测量放射性而求得未标记抗原的量。用反应式表示为:*Ag为同位素标记的抗原,与未标记的抗原Ag有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与抗体Ab结合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab复合物,在一定反应时间后达到动态平衡。如果反

放射免疫分析的临床意义

  激素类检测:  1、在垂体性腺激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成激素(LH),睾丸酮(T),雌二醇(E2),孕酮(P),催乳素(PRL),人生长激素(HGH),人绒毛膜促性腺激素(HCG),人胎盘催乳素(HPL)等。  2、甲状腺腺激素。  肿瘤类检测:  甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA)

放射免疫分析法的应用

  此法用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。在临床免疫学上测定免疫球蛋白G、免疫球蛋白E及抗脱氧

放射免疫分析的检查过程

  从检验者处得到血液样本后,送放射检验科进行检验。具体过程:分别在一定数量的试管中加入不同浓度的血液样品,每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后进行分离,测量放射性强度,由放射性强度比量制出标准曲线,即可从标准曲线上查出未知样品量。  放射受体分析(radi

放射免疫测定仪器的应用

  1. 用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。  2. 在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。  3. 在临床免疫学上测定免疫球蛋白G

放射免疫分析法的原理

  使放射性百标记抗原和未标记抗原(待测物)与不足量的特异性抗体竞争性地结合,反应后分离并测量放射性而求得未标记抗原的量。用反应式表示为:  *Ag为同位素标记的抗原,与未标记的抗原Ag有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与抗体Ab结合,形成度*Ag-Ab或Ag-Ab复合物,在一定反应时间后达到动态

放射免疫分析的临床意义

  激素类检测:  1、在垂体性腺激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成激素(LH),睾丸酮(T),雌二醇(E2),孕酮(P),催乳素(PRL),人生长激素(HGH),人绒毛膜促性腺激素(HCG),人胎盘催乳素(HPL)等。  2、甲状腺腺激素。  肿瘤类检测:  甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA)

放射免疫分析法的原理

  使放射性标记抗原和未标记抗原(待测物)与不足量的特异性抗体竞争性地结合,反应后分离并测量放射性而求得未标记抗原的量。用反应式表示为:  *Ag为同位素标记的抗原,与未标记的抗原Ag有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与抗体Ab结合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab复合物,在一定反应时间后达到动态平衡

放射免疫测定仪器的应用

  1. 用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。  2. 在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。  3. 在临床免疫学上测定免疫球蛋白G

关于放射免疫测定的内容介绍

  放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA) RIA是最敏感的免疫标记技术,精确度高且易规格化和自动化。但由于放射性同位素有一定的危害性,使其临床应用受到一定限制。目前主要应用于激素(如HCG、胰岛素)和药物浓度的检测。  ①液相放射免疫分析:为经典的放射性同位素标记技术(radio

放射免疫分析法的应用

  催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。在临床免疫学上测定免疫球蛋白G、免疫球蛋白E及抗脱氧核糖核酸抗体;进一步的应用包括甲状腺球蛋白抗体、类风湿因子、补体及抗