免疫组化专题:流式细胞仪检测技术实验(二)

⑤主机设定:一般是已设定好的适合测定淋巴细胞的条件,包括探测器的电压。探测器的电压是调空光电倍增管所能检测荧光密度的范围。⑥选择检测的波长和表达方式(plot):如果用一种荧光抗体,一般选直方图(histogram);如果用两种荧光抗体,常选点状二维图(dot plot)或轮廓线图(contour plot)表 CD69分子表达检测直方图的数值说明 b.abti-CD3(2 ng/ml)检测结果 c.abti-CD3(10 ng/ml)检测结果 CD4及CD8细胞点状二维图结果 不同的荧光物要求选择不同的激发波长,参见下表 (2)细胞的吸入:将装有细胞的FACS测定管放置到机器吸管孔处。先预检测样品,然后进行实际检测。可根据细胞的浓度选择测定的速度(低、中或高)。所有的数据将自动存入微机。3.使用后的......阅读全文

免疫学技术专题:雌二醇的免疫胶体金试纸法检测

雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕

CBIFS-2017专题论坛:-农兽药残留检测技术

  2017年4月7日,由中国检验检疫学会、太平洋国际展览联合举办的“CBIFS2017第十届中国国际食品安全技术论坛”在杭州国际博览中心召开。本届会议邀请了食品行业内著名专家学者和仪器厂商,开展了80余场大会报告和专题报告,其中包括快速检测、分析方法、食源性微生物、农兽药残留、真菌毒素、实验室建设

免疫组化技术典型实验案例学习1

案例一:DAB染色后切片着色一片黄/背景深背景:奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比

免疫组化技术典型实验案例学习2

7、我做了两张切片:一张用老试剂盒内还剩下一点的血清而另一张用新试剂盒内的封闭血清,其余试剂(二抗、SP)均用新试剂盒提供的,结果是前一张效果很好,而后一张能够看到特异性染色,但背景太深,拍照效果不佳。--看来封闭血清也是罪会祸首之一。结果分析显示:抗体稀释液的PH值偏低和封闭血清的失效导致了我的免

免疫组化技术典型实验案例学习3

6、以上原因,都是针对实际中常见原因来进行分析的,前提是排除操作者的操作错误而引起阴性结果,这就需要新手还是要设置阳性对照以排除方法的问题。还有抗体稀释液的PH值过低等其它原因的干扰。总之,要想把免疫组化做好,可能每一个环节都很重要,但也存在主次之分,出现问题了,需要通过先排除主要的,再依次排除次要

实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验

流式细胞仪检测细胞凋亡可以:鉴定细胞凋亡形态;可以准确的进行凋亡细胞的计数;可以进行特异的定性分析和定量分析。实验原理细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这

细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬

细胞技术专题:大鼠肝星状细胞培养实验

实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC,通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB

基因技术专题1

专题一:RNA干扰技术(RNAi)1995年,康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现,反义和正义RNA都阻断了基因的表达,他们对这个结果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究证明,在正义RNA也阻断了基因表达的试验中,真正起作用的是双链RNA。这些

基因技术专题2

RNAi技术RNA干扰(RNA interference, RNAi)是近年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,它利用了由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物细胞内同源基因的特异性沉默(silencing)现象,其本质是siRNA与对应

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

  流式细胞仪检测细胞凋亡可以:  鉴定细胞凋亡形态;  可以准确的进行凋亡细胞的计数;  可以进行特异的定性分析和定量分析。  实验原理  细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征

细胞凋亡:流式细胞仪检测实验

用次GoZG1 DNA峰值计算细胞凋亡 用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞 通过TUNEL组织切面中的凋亡细胞的原位杂交             实验方法原理

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面: 1.  细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变zui具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性

细胞凋亡:流式细胞仪检测实验

实验方法原理 实验材料 要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒 FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一

免疫组化实验

实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水

PCR实验技术(二)

【方法】方法一、基本的PCR方法下面介绍的基本PCR方法可作为任何PCR扩增的一般指导和出发点。由于各种PCR反应条件(如PCR扩增次数、温度、Taq DNA聚合酶的浓度、引物、氯化镁以及模板DNA)变异极大,应根据具体情况,对各种PCR反应条件进行相应调整。1.按以下次序,将各成分加入0.2 ml

免疫组化检测技术共识【完整版】(一)

免疫组化检测技术共识【完整版】

成分输血专题讲座(二)

血小板输注血小板输注的适应症:(1)血小板减少(常

实验室HIV检测技术概述及进展(二)

       2.1  HIV抗体、抗原检测       HIV抗体一般在人感染后几周逐渐出现,可延续至终生,血清学试验分为初筛和确认试验。最常用的初筛试验和确认试验分别是酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验(WB)。常规实验方法:酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验(WestBlot)、间接免疫荧光法

细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。  实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B

细胞技术专题:大鼠肝星状细胞原代培养实验

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠

蛋白质技术专题:蛋白等电聚焦凝胶电泳技术(二)

  1) 若产生模糊条带则证明聚焦不完全,这可能是由于电泳中的问题或大分子蛋白质限制了其在凝胶中的迁移能力。若聚焦时间过长或过短,条带的分辨率会下降。增加电压梯度可以使带形更加锐利。高分子量蛋白质在琼脂糖凝胶中可以聚焦的更好。   2) 产生歪斜的条带通常由于不正确的pH梯度,检查电极是否洁净,是