细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料小鼠试剂、试剂盒1640 培养基 小牛血清 双抗 台盼兰仪器、耗材手术器械 一次性注射器 眼科镊 眼科剪 96 孔板 CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 如果采用刺激物,则可在实验前三天腹腔注射3%巯基乙醇酸钠每只2 mL,获得的巨噬细胞数要多一些。不采用刺激物,直接开始下面的步骤。 2. 拉颈处死小鼠,在75%酒精浸泡1-2 分钟,移入超净台中,仰卧位固定于解剖板上,碘酒消毒腹部皮肤,酒精绵球脱碘。用手术直剪充分剪开腹部皮肤,暴露腹部肌层,再用酒精绵球消毒腹部肌层。 3. 用......阅读全文
细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬
小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。 实验材料
小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实
小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
腹腔取材法 实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法腹腔取材法实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
腹腔取材法 实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞
小鼠腹腔巨噬细胞培养
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验——腹腔取材法
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗研究。实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养
实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309
小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
目的要求1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨
小鼠腹腔巨噬细胞收集及形态观察
实验原理巨噬细胞(MΦ)发育:骨髓多能干细胞→定向干细胞(髓样干细胞)→单核母细胞→前体单核细胞→单核细胞→血液→组织(分化为巨噬细胞) MΦ分布:单核细胞主要于血液中,巨噬细胞几乎存在于所有表皮和黏膜下组织。 MΦ形态:有伪足,马蹄状单核,细胞形体大。 MΦ分离纯化:小鼠和大鼠腹腔内有丰富
细胞技术专题:肿瘤细胞原代培养实验
肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
细胞技术专题:大鼠肝星状细胞培养实验
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC,通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
药物对动物腹腔巨噬细胞的影响实验(一)
实验方法原理 红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用,还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞,在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。实验材料 小鼠试剂、试剂
药物对动物腹腔巨噬细胞的影响实验(二)
4. 采用免疫荧光微球法检测(1)实验设对照组、LPS+IFN-γ组、不同浓度的Sal组和Sal+LPS+IFN-γ组,每组设3个复孔。(2)将密度为2×109个细胞/L的腹腔巨噬细胞接种到24孔培养板中,每孔加500 μL RPMI1640基础培养基,并加入10 μL 不同浓度的Sal(终浓度为
细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。 实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B
细胞技术专题:大鼠肝星状细胞原代培养实验
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠
小鼠巨噬细胞的活化
基本方案 小鼠巨噬细胞的活化材料小鼠巨噬细胞,静 息 状 态(单 元 6.1)D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸庆大霉素的 D M E M培 养 基(G I B C O /B R L )辅助方案炎性小鼠巨噬细胞的
小鼠巨噬细胞的分离
基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁 净 环 境 中 饲 养(最好置层流柜中饲养)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤(Brewerthioglycollate medium,分离炎性腹腔巨嗤细胞用)7
小鼠巨噬细胞的活化
巨噬细胞的活化经历两个阶段:致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 (致敏并且激活),本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导 后 (48〜72h) ,可 检 测 巨 噬 细 胞 对 病 原 体 (如寄生虫或细菌;单 元 6. 5 和 6. 6)的杀伤作用或所合
细胞技术专题:细胞传代实验
根据细胞生长的恃点,传代方法有3种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW
巨噬细胞的腹腔中分离方法介绍
1、取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。 2、如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从一步开始。放血处死动物,以减少腹腔中的红
吞噬功能实验_小鼠巨噬细胞吞噬功能测定
实验材料小鼠试剂、试剂盒生理盐水淀粉溶液鸡红细胞肝素瑞士-姬姆萨染液仪器、耗材注射器毛细管显微镜离心机实验步骤一、操作过程小鼠腹腔注射10 g/L 淀粉溶液2 ml↓ 24 h 后,小鼠腹腔注射2%鸡红细胞1 ml↓30 min 后,小鼠脱臼处死,腹腔内注射0.2 ml 肝素注射液,揉动腹部↓毛细管
细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(三)
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层,是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间,见消化液混浊、组织块呈絮状,或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(一)
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8