免疫组化染色具体操作步骤
免疫组化染色具体操作步骤介绍 (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例) 1、石蜡切片脱蜡至水。 2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。 5、 5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。 6、PBS冲洗,5分钟×3次。 7、滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或滴加第二代生物素标记二抗工作液,37℃或室温孵育......阅读全文
免疫组化染色具体操作步骤
免疫组化染色具体操作步骤介绍 (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例) 1、石蜡切片脱蜡至水。 2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。 5、 5~10%正常山羊血
免疫组化染色具体操作步骤
免疫组化染色具体操作步骤介绍 (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例) 1、石蜡切片脱蜡至水。 2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。 5、 5~10%正
免疫组化具体操作步骤
免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞
免疫组化具体操作步骤
免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技
免疫组化染色步骤
石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理: 抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等几种试剂,对已清洗的载玻
石蜡切片免疫组化染色步骤
1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1
石蜡切片(paraffin-sections)免疫组化染色步骤
1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:(1)APES:现用现配。将洗净的玻片
免疫组化步骤
1。4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后; 2。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5m
频闪仪的具体操作步骤
1) 先估测图案的运动频率。频闪仪在测量直线工作的物体,如印刷机及检品机等的操作上,并非是用来测量“印刷滚筒或马达”的转速,而是希望获得同步静止画面,以监控其印刷品质.换言之,欲调整频闪仪闪光速率时,应依据“每分钟拉出多少张画面”的频率来调整,而非依据“每分钟拉出多少米”调整。在实务上我们以印刷机为
western-blot-具体操作步骤
什么是Westernblot?最佳答案Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western
western-blot-具体操作步骤
什么是Westernblot?最佳答案Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western
western-blot-具体操作步骤
什么是Westernblot?最佳答案Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western
western-blot-具体操作步骤
什么是Westernblot?最佳答案Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western
免疫组化主要步骤
免疫组化主要步骤1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上
免疫组化步骤设计
你的一抗的生产商应该提供有实验方法,按照他们优化过的步骤来做最为明智。也可以网上搜索到标准的免疫组化步骤,但是所用抗体及封闭等试剂的浓度,孵育时间长度等还是要靠自己摸索,麻烦多多。如果样品是胰脏一般很容易得到阳性结果。
什么是免疫组化染色?
免疫组化染色是一种利用抗原-抗体反应和组织化学方法来检测和定位特定蛋白质在组织细胞中的表达情况的技术。 具体来说,免疫组化染色的步骤包括: 制备组织切片:将组织样本切成薄片,放置在载玻片上。 阻断内源性过氧化物酶:为了减少非特异性染色,需要用含有过氧化物酶阻断剂的溶液处理组织切片。 抗原
石蜡切片免疫组化染色
实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理,常用酶消化,抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理 1) APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱
常用免疫组化染色方法
常用免疫组化染色方法,真空负压免疫荧光染色法染细胞培养片。1. 将细胞爬于载玻片或盖玻片的片子用生理盐水浸洗数次,彻底洗去蛋白液。2.纯丙酮固定5-10分钟。3.PBS浸洗3次,每次1分钟。4.加入选用的第一抗体孵育真空负压处理15分钟。5.PBS洗3次,每次2分钟。6.加入荧光抗体孵育真空负压处理
什么是免疫组化染色
是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态
什么是免疫组化染色
是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态
石蜡切片免疫组化染色
实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理,常用酶消化,抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理 1) APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱
噪音计的具体操作步骤
噪音计使用正确与否,直接影响到测量结果的准确性。因此,有必要介绍一下噪音计的使用。1、噪音计使用环境的选择:选择有代表性的测试地点,声级计要离开地面,离开墙壁,以减少地面和墙壁的反射声的附加影响。2、天气条件要求在无雨无雪的时间,噪音计应保持传声器膜片清洁,风力在三级以上必须加风罩(以避免风噪声干扰
数字钳形表的具体操作步骤
数字钳形表的具体操作步骤1、交流电流测量①将开关旋至ACA1000A挡。②保持开关处于放松状态。③按下扳机打开钳口,钳住一根导线,如果钳住两根以上,测量无效。④读取数值,如果读数小于200A,开关旋至ACA200A挡,以提高准确度,如果因环境条件限制,如暗处无法直接读数,按下保持键,拿到亮处读取。2
解剖镜的具体操作步骤
具体操作步骤:安装好后,在确保供电电压与显微镜的额定电压一致后可插上电源插头,打开电源开关。对标本调焦,此时应用上光源调节螺栓调节如射光的方向,使之照亮标本。用适当的倍率观察标本,必要使调节照明亮度。结束观察时,应将光源亮度旋转调节至zui小,并关掉电源,移走标本,清理干净,zui后用防尘罩将显微镜
细胞复苏的具体操作步骤
细胞复苏操作要点:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫组化SP法步骤
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法.按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二
免疫组化SP法步骤
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二
石蜡切片免疫组化步骤
实验概要石蜡切片免疫组织化学染色主要试剂染色缸;染色架;保湿盒;晾片盘;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟;2. 脱蜡和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95
免疫组化的操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,