细胞计数及活力测定实验

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力,了解冻存和复苏的效果。用台盼兰染细胞,死细胞着色,活细胞不着色,从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应,也可测定细胞相对数和相对活力。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品:普通显微镜、血球计数板、试管、吸管、酶标仪(或分光光度计)2、试剂:0.4%台盼兰,0.5%四甲基偶氮唑盐(MTT)、酸化异丙醇3、材料:细胞悬液三、操作步骤(一)细胞计数1、将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。3、静置3分钟。......阅读全文

TTC法根系活力的测定实验

实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延

TTC法根系活力的测定实验

实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延

TTC法根系活力的测定实验

实验方法原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、

细胞色素c活力测定方法概况

  细胞色素c氧化晦 (Cytochrome e oxidase,COX)亦称细胞色素氧化酶,存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化。COX单体为2-亚铁血红素,23)铜蛋白,相对分子质量为150~200kuKD)COX的每个单体由至少13条不同的

白细胞计数实验

实验方法原理血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。用具及试剂:白细胞稀释液(0.38ml)试管一支,显微镜,盖玻片,血红蛋白吸管,小玻璃棒,小手巾,计数板。实验步骤1.用血红蛋白吸管吸血20mm3刻度处,拭去管尖血渍。2.将管内血液放入盛有白细胞稀释液的小试管内

白细胞计数实验

            实验方法原理 血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。用具及试剂:白细胞稀释液(0.38ml)试管一支,显微镜,盖玻片,血红蛋白吸管,小玻璃棒,小手巾,计数板。 实验步骤

红细胞计数实验

实验方法原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数地中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算示得每升血液内的红细胞数。试剂、试剂盒赫母代氏红细地稀释液氯化钠结晶硫酸钠氯化高汞蒸馏水柠檬进盐甲留盐水仪器、耗材显微镜血红蛋白吸管计数板盖玻片实验步骤三、实验试剂:l、赫母(Hayem)代氏红细地

白细胞计数及白细胞分类计数

  白细胞计数及白细胞分类计数参考值为:  白细胞分类计数:  (1)中性粒细胞,杆状核0.0l~0.05,分叶核0.5~0.7  (2)嗜酸性粒细胞0.005~0.05  (3)嗜碱性粒细胞0~0.0l  (4)淋巴细胞0.3~0.4  (5)单核细胞0.03~0.08  临床意义如下:  (1)

用血细胞计数板进行细胞计数实验

            实验方法原理 用胰蛋白酶消化单层培养,或从悬浮培养中取样;准备一张盖玻片,将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞,计算细胞浓度。 实验步骤 材

用血细胞计数板进行细胞计数实验

实验方法原理用胰蛋白酶消化单层培养,或从悬浮培养中取样;准备一张盖玻片,将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞,计算细胞浓度。实验步骤材料无菌:D-PBSA、0.25% 粗制胰蛋白酶、生长培养基、移液器黄吸头非无菌:移液器,20ul 或 100ul 可调式、血细胞计数板(改良的 Neub

用血细胞计数板进行细胞计数实验

实验方法原理 用胰蛋白酶消化单层培养,或从悬浮培养中取样;准备一张盖玻片,将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞,计算细胞浓度。实验步骤 材料无菌:D-PBSA、0.25% 粗制胰蛋白酶、生长培养基、移液器黄吸头非无菌:移液器,20ul 或 100ul 可调式、血细胞计数板(改良的 Ne

微生物细胞大小测定实验原理及显微镜直接计数

微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,由于菌体微小,只能在显微镜下测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺(图示)是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10mm长度刻成100等分。测量时,将其放在接目镜中的隔板上,此处正好与物镜放大的中间物像重迭

α-萘胺法植物根系活力测定实验

实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也

α-萘胺法植物根系活力测定实验

实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也

α-萘胺法植物根系活力测定实验

实验方法原理 吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色

细胞计数实验——光电比浊计数法

实验方法原理当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出(图 VIII-4)。因此,可用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度。作出光密度--菌数标准曲线。然后,以样品液所测得的光密

细胞计数实验——光电比浊计数法

实验方法原理当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出(图 VIII-4)。因此,可用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度。作出光密度--菌数标准曲线。然后,以样品液所测得的光密

白细胞分类计数实验

实验方法原理把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),经观察数量、形态和质量的变化,对疾病有辅助诊断意义。仪器、耗材推玻片一块干净玻片数块消毒针头75%酒精棉球蜡笔擦镜纸显微镜瑞氏染液蒸馏水显微镜油二甲苯实验步骤一、 血涂片制作1.

白细胞直接计数实验

实验方法原理用稀醋酸液,将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池,在显微镜计数一定体积内的白细胞计数,,经换算求得每升血液中的白细胞数,常用有以下两种方法:l%盐酸;2%醋酸实验材料血液试剂、试剂盒稀醋酸液盐酸仪器、耗材显微镜微量吸管计数板盖玻片实验步骤1. 取小试管二支,加白细胞稀释液0.38ml

白细胞分类计数实验

白细胞分类计数实验             实验方法原理 把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),经观察数量、形

外周血细胞瑞氏(Wright)染色及计数实验

实验方法原理 瑞氏染料中有美蓝和伊红两种成分,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,使其显现出不同的色调。血细胞核由去氧核糖核酸和强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白。这种强碱性的物质与瑞氏染料中的酸性染料伊红有亲和力,所以染成红色;核蛋白中还有少量的 弱酸性蛋白,它们又

外周血细胞瑞氏(Wright)染色及计数实验

涂片法             实验方法原理 瑞氏染料中有美蓝和伊红两种成分,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,使其显现出不同的色调。血细胞核由去氧核糖

外周血细胞瑞氏(Wright)染色及计数实验

涂片法             实验方法原理 瑞氏染料中有美蓝和伊红两种成分,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,使其显现出不同的色调。血细胞核由去氧核糖

荧光法测定种子生活力实验

实验方法原理植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很容

荧光法测定种子生活力实验

实验方法原理:植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很

荧光法测定种子生活力实验

实验方法原理 植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很

如何利用酶标仪进行细胞增殖与活力测定

  酶标仪在细胞生物学与药物筛选方面有着非常高的使用频率,而在各种细胞检测实验中,细胞增殖能力的检测是最为常见也是最基础的检测之一。   ●为什么要检测细胞状态呢?    细胞状态是直接反应细胞生理状态的重要指标,通过监测细胞在各种化合物刺激作用下的反应状态,从而确定测试分子是否对细胞增殖有影

细胞计数实验_显微镜直接计数法

细胞计数实验可以用于:(1)细胞悬液制备后,计算悬液中所含细胞数量;(2)检查细胞活力。实验方法原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有:血细胞计数板。Peterof

血清ALP活力测定

在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。 1.血清ALP活性升高: 见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。 2.血清ALP活性降低: 比较少见,主要见于呆小病,磷酸酶过少

血清ALP活力测定

在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。1.血清ALP活性升高:见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。2.血清ALP活性降低:比较少见,主要见于呆小病,磷酸酶过少症,维生素