使用超高效合相色谱(UPC2)分析短杆菌肽(二)
为了分离短杆菌肽物质,对酸性改性剂的影响进行了研究,结果表明:使用三氟乙酸(TFA)可得到稍好的峰形,提高了短杆菌肽A和短杆菌肽C之间的分离度,结果如图2所示。已知TFA会抑制质谱电离,但每种物质的信号都足以定量检测治疗制剂,后续将对此进行讨论。对于要求更高灵敏度的应用,可能需要降低TFA浓度或使用甲酸,以达到希望的检测限值。 图2.酸性改性剂对分离短杆菌肽的影响。 当设置好合适色谱条件后,通过减少梯度时间优化分离过程,结果如图3所示,我们能够在1.5分钟时间内使每种短杆菌肽组分的分离度达到1.4或更高,在相同流速下通过减少运行时间增加梯度斜率,不但实现有效分离,同时还将短杆菌肽A的信噪比从336提高至605。 图3.UV 280-nm痕量检测优化分离短杆菌肽A、B和C。 我们测试了最佳分离条件,能够使用单四极杆质谱(SQD)检测每种物质,图4显示:每种物质都被质谱良好分离和检测到,另外每......阅读全文
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
如何分析高效液相色谱图
色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。和实验相关的参数:1、保留时间-也就是可以定性的数据参数如果使用同样的色谱柱,同样的流
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
如何分析高效液相色谱图
色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。和实验相关的参数:1、保留时间-也就是可以定性的数据参数如果使用同样的色谱柱,同样的流
如何分析高效液相色谱图
色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。和实验相关的参数:1、保留时间-也就是可以定性的数据参数如果使用同样的色谱柱,同样的流
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
利用超高效合相色谱系统分离氯菊酯非对映体异构体
一、目的 使用沃特世(Waters®)ACQUITY UPC2™系统成功开发非对映体超高效合相色谱(UltraPerformance Convergence Chromatography™,UPC2™)方法,用于四种氯菊酯异构体的基线分离。 二、背景 公众对杀虫剂使用的关注日益
利用超高效合相色谱系统分离氯菊酯非对映体异构体
一、目的使用沃特世(Waters®)ACQUITY UPC2™系统成功开发非对映体超高效合相色谱(UltraPerformance Convergence Chromatography™,UPC2™)方法,用于四种氯菊酯异构体的基线分离。二、背景公众对杀虫剂使用的关注日益增长。目前使用的杀虫剂有25
合相色谱法鉴别香草提取物(二)
为检测掺杂物,将此方法用于筛选来自不同地理区域的香草提取物(包括标记为“纯品”和“仿制品”的样品)(图3)。使用乙醇对香草提取物进行十倍稀释(样品混溶),并在分析前过滤。来自美国的香草提取物仿制品(A)的分析结果显示:同时存在有合成香草醛(乙基香草醛)和香草醛。由于此样品中不存在其他的天然香料成分,
使用配备PDA检测器的UPC2系统同时测定婴儿配方奶粉中...
使用配备PDA检测器的UPC2系统同时测定婴儿配方奶粉中的维生素A和E目的 用UtraPerformance Convergence Chromatography™(UPC2™)同时测定婴儿配方奶粉中维生素A和E的可行性确定。背景 测定食品中脂溶性维生素的传统步骤包括:首先进行繁琐的样品制备(如皂化
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因: 残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附
Waters超高效合相色谱获得Pittcon-2012-撰稿人金奖
UPC2系统扩展了液相色谱LC和气相色谱GC的分离范围,为实验室攻克分析挑战提供了新选择。 佛罗里达州奥兰多市- 2012年03月15日—沃特世公司(WAT: NYSE) 以其新的Waters® ACQUITY UPC2系统获得了著名的2012 Pittcon撰稿人金奖 ,在
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因:残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附,使键合相的分离性能改变。二、方
高效液相色谱仪键合相为什么要封端
高效液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前,键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si-O-Si-C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2,由于空间位阻效应,不可能将较大
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因:残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附,使键合相的分离性能改变。二、方
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下:1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3).打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4).进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5).有一段时间没用,或者换了
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下:1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3).打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4).进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5).有一段时间没用,或者换了
高效液相色谱柱使用心得
柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配 色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。 溶剂的匹配转换 色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂,如果和流
高效液相色谱柱使用心得
高效液相色谱柱使用心得:柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。溶剂的匹配转换色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留
高效液相色谱柱的正确使用
1.加装保护柱 保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污然,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等
极性键合相色谱仪分析技术
极性键合相色谱仪是以硅胶表面键合极性有机基团的键合相作为固定相的液相色谱仪。一、分离机制:分离机制有分配作用和吸附作用两种说法。1、分配作用:把硅胶表面键合的极性基团视为一层液膜,样品组分分子在流动相和极性液膜之间进行分配,按分配系数的差别而实现分离。2、吸附作用:把极性键合相视为一种弱吸附剂,样品
利用超高效合相色谱系统分离氯菊酯非对映体异构体
目的使用沃特世(Waters®)ACQUITY UPC2™系统成功开发非对映体超高效合相色谱(UltraPerformance Convergence Chromatography™,UPC2™)方法,用于四种氯菊酯异构体的基线分离。背景公众对杀虫剂使用的关注日益增长。目前使用的杀虫剂有25%为手性
正相键合相色谱法
键合相色谱法正相键合相色谱法 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似,也是烷烃(常用正已烷等)加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似,但极性小于硅胶,即用相同的流动相及其它条件相同时,同一组分的保留时间将小于硅胶
高效液相色谱分析原理
高效液相色谱和气相色谱在基本理论方面没有显着不同,它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。 高效液相色谱分析原理: 一、高效液相色谱分析的流程:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行
高效液相色谱分析原理
高效液相色谱和气相色谱在基本理论方面没有显着不同,它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。 高效液相色谱分析原理: 一、高效液相色谱分析的流程:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色
超高效液相色谱(UPLC)在现代分析检验中的应用(二)
2 实现超高效液相色谱的技术条件 为了使液相色谱的分离效率和分离速度等性能上达到新的高度,UPLC在多项色谱技术方面进行了改进与创新。 1)应用杂化颗粒技术合成了新型全多孔球形117μm反相固定相色谱填料,并采用新型的装填技术,制备了高柱效的色谱柱。 2)制造超高效液相
使用ACQUITY-UPC2系统测定氨苯砜片(Dapsone)的色谱含量
使用ACQUITY UPC2系统测定氨苯砜片(Dapsone)的色谱含量 一、目的 使用沃特世Waters®))ACQUITY UPC2™系统将药典中氨苯砜含量的正相HPLC测定方法转换为超临界流体色谱(SFC)方法。 二、背景 目前,美国药典(USP)规定了含有氨苯砜(4,4’-二氨基二苯砜,C