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原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质体的首推Klercker（1892），直到1960 年英国科学家Cocking 才*次用酶法大量制备原生质体。本实验以植物的叶肉组织为材料，利用纤维素酶和果胶酶来消化细胞壁，分离细胞。 实验用品器具：显微镜、离心机、离心管、剪刀（2）、镊子（2）、吸管、小培养皿、载片、盖片。试剂：0.16mol/L CaCI.2.H2O、20%蔗糖液、酶解液材料：油菜或菠菜或烟草 实验方法步骤1、取材 根据实验目的和条件选取不同的材料2......阅读全文
原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用 由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研
摘要 本文对植物的原生质体融合技术得研究进展进行了综述。阐述原生质体制备、培养方面的研究进展，随后介绍了原生质体融合方法、融合机理和融合方式等的研究进展，最后对其今后的应用前景进行了展望，为原生质体融合技术的发展提供了参考。 关键词 原生质体 融合技术 研究进展 01 — 原生质体制
01 — 原生质体制备 1.材料的选择及预处理 许多研究表明，在原生质体分离之前，先对植物材料进行预处理能够有效提高原生质体的游离效率，在同等材料用量下可以分离出较多的原生质体。柳玉晶等[1]的研究表明，在分离百合叶片原生质体前对其进行13%甘露醇预处理和黑暗处理能显著提高原生质体产量。
微生物细胞培养，简称微生物培养，包括原核细胞培养（细菌培养）和真核细胞培养（霉菌培养和酵母培养）。这些细胞小、且具有细胞壁，细胞周期非常短，如细菌每20-30min增殖1次。植物细胞培养指原生质体培养。未考虑分离出原生质体的植物细胞培养，无论是游离的单细胞或组织块，都称作植物组织培养。动物组织细胞培
3.流式细胞术在高等植物中的应用3．1应用于植物中的特殊性由于植物细胞与动物细胞在结构上的差异，例如植物细胞具有细胞壁、特殊细胞器以及中央液泡等，因此流式细胞术应用于植物细胞时，在样品制备、染色、仪器的改造等方面都应适应植物细胞的上述特点。3．1．1制备植物染色体悬液的材料1984年De Laat和
实验概要本实验介绍了原生质体分离的方法及利用PEG原生质体融合的原理和方法。实验原理植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降
植物组织培养（Plant Tissue Culture）：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体explant），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。（主要有原生质体（Protoplast），悬浮细胞，组织（愈伤组织Callus
流式细胞术(Flow cytometry，简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质，如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术，能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于
植物原生质体是指脱去全部细胞壁由质膜包被的具有生命活力的裸露细胞。它具有细胞生命特征和全能型，是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源，同时也是植物遗传工程的理想受体和遗传改良的理想材料。酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维
二、重组DNA分子转入真核细胞1. 根癌农杆菌Ti质粒介导法农杆菌介导的Ti质粒载体转化法是目前研究最多、机制最清楚、技术方法最成熟的基因转化途径。迄今为止约8096的转基因植株都是利用农杆菌介导转化系统获得的。农杆菌是一类土壤习居菌，革兰氏染色呈阴性，能感染双子叶植物和裸子植物，而对绝大多数单子叶
植物原生质体的制备可以用于：（1）由于其具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；（2）具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；（3）通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。实验方法原理去掉植物细胞
植物体细胞杂交（plant somatic hybridization）,又称原生质体融合（Protoplast fusion ）是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有
细胞电融合的优势在于（1）融合率高（2）无毒性（3）操作简便（4）融合后的细胞继续培养成活率高等。动物的游离细胞以及植物成微生物去壁后的原生质体，在电刺激下进行细胞融合，是细胞工程手段的又一进展。实验方法原理将制备的游离细胞或原生质体，置于电融合室中，在高频交流电场的作用下，细胞被极化，成为偶极子，
实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体，置于电融合室中，在高频交流电场的作用下，细胞被极化，成为偶极子，造成细胞之间相互连接，如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用
实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体，置于电融合室中，在高频交流电场的作用下，细胞被极化，成为偶极子，造成细胞之间相互连接，如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用
原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理
原生质体融合即植物体细胞杂交，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 根据融合时细胞的完整程
植物细胞由于液泡失水而使原生质体收缩和细胞壁分离的现象。将具有液泡的细胞置于对细胞无毒害的浓溶液（如 1mol· L-1 的蔗糖溶液）中，由于外界溶液的水势低于细胞液的水势，液泡中的水分向外流，液泡体积缩小，原生质体和细胞壁也随之缩小。但由于细胞壁的伸缩性是有限的，而原生质体的伸缩性较大，因此，在
多年来，科学家们一直缺乏合适的实验工具用于植物细胞生物力学的研究。设计用于封装单个细胞的微流控装置市场已经被证实在动物研究中拥有巨大的优势，现在也在植物生物学领域显现出巨大的潜力。来自佛蒙特大学（University of Vermont）植物生物学系的研究人员正在利用这项技术加强对生物力学的研
原生质体由原生质分化形成，具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等，而细菌如核糖体、拟核等。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 将酵母菌接种于YP
通用型植物线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 通用型植物线粒体DNA萃取试剂是一种旨在通过物理或化学破膜及离心处理方法，从植物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器，然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体DNA的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制
植物细胞或原生质体线粒体DNA分离（物理法） 实验开始前，将试剂盒里的净化液（Reagent C）冻融，然后移出1毫升净化液（Reagent C）和4毫升的裂解液（Reagent B）到15毫升锥形离心管里，混匀后，标记为裂解工作液，置入冰槽里备用。然后进行下列操作。 准备5 X 107植物细胞或原
一．实验目的植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术，加深对无菌操作的了解。二．实验原理植物的全能性：植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性。植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养按其
近日海南大学热带农林学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室罗丽娟教授课题组与刘进平教授课题组合作，建立了一种成熟高效的木薯叶肉原生质体瞬时表达体系。这一研究成果公布在BMC Biotechnology杂志上。 木薯（Manihot esculenta Crantz）属于大戟科木薯属植物，起
生物是一切具有新陈代谢的物体。狭义的生物是指传统意义上独立、能自主生存的物体，包括动物、植物和微生物。生物具有遗传和变异的特征，能够进行生长、发育和繁殖，能适应一定环境和改变环境，能对外界的刺激做出反应。而细胞是大多数生物体结构和功能的基本单位。20世纪90年代发展起来的微流控芯片技术在细胞研究上有
植物组织培养（Plant Tissue Culture）是应用无菌培养的方法培养植物的一个离体部分，也即是一种将自然环境中分离出来的植物细胞或组织放入含有合成培养基的瓶中，在无菌条件下使之生长或发育的方法。这项工作自50年代后期至今巳取得了很大的进展，如诱导培养胡萝卜的体细胞分化成完整植株，由曼陀罗
1、 原理 植物 细胞的质壁分离现象与其生活的原生质特别是原生质表层的性质密切相关，质壁分离可用于研究原生质的透性，粘滞性及弹性等，在细胞生理及抗性生理上有重要作用。可用质壁分离法测细胞的渗透性，也可鉴别细胞的死活，在水分生理中也及其重要，活细胞是一个渗透系统，当与外界高渗溶液接触时，
1、 原理植物细胞的质壁分离现象与其生活的原生质特别是原生质表层的性质密切相关，质壁分离可用于研究原生质的透性，粘滞性及弹性等，在细胞生理及抗性生理上有重要作用。可用质壁分离法测细胞的渗透性，也可鉴别细胞的死活，在水分生理中也及其重要，活细胞是一个渗透系统，当与外界高渗溶液接触时，细胞内的水外渗而发
组织培养是克隆细胞和组织的过程。迄今，植物组织培养已取得了许多卓越的成果，并被广泛推广和利用。通过植物组织培养，我们可以从植物体的一部分体细胞快速培育出大量和母体植物相同的植株。另一方面，植物组织培养技术也为我们快速开发和培育新品种创造了条件。一、组织培养与植物快速繁殖组织培养是一种利用人工培养基（
1. 培养基的配制注意事项 植物组织培养最常用到MS培养基，包含十几种化合物。因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀，影响培养基的营养成分，准备MS培养基需要配制多种高倍母液。且配制母液时，尤其涉及大量元素的母液时，一定要等一种成分溶解之后，再缓慢的添加另一种成分，切记“一锅煮”，即不能将各