表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用(一)
应用领域结合特异性、抗体选择、抗体质控、疾病机制、药物发明、生物治疗、生物处理、生物标记物、配体垂钓、基因调控、细胞信号传导、亲和层析、结构-功能关系、小分子间相互作用等检测原理表面等离子共振(SPR)是一种光学现象,可被用来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用。这种方法对生物分子无任何损伤,且不需任何标记物。先将一种生物分子(靶分子)键合在生物传感器表面,再将含有另一种能与靶分子产生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流经生物传感器表面。生物分子间的结合引起生物传感器表面质量的增加,导致折射指数按同样的比例增强,生物分子间反应的变化即被观察到。这种反应用反应单位(RU)来衡量:1 RU = 1pg 蛋白/mm2 = 1 x 10-6 RIU(折射指数单位)。分析物在被注入的过程中,由对流和扩散流经相互作用表面而与靶分子形成复合物,......阅读全文
GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验
实验材料 进行转染的细胞株 按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞 试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸
GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验
我们将方案分成三个阶段: 第一阶段介绍蛋白质的制备及蛋白质的荧光染料标记;第二阶段,通过转染或微注射将适当的探针成分导入细胞;第三阶段,图像的收集和分析过程。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备
新一代SPR-技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(一)
EF手性对突变钙调蛋白与一氧化氮合酶结合域肽段相互作用研究一氧化氮合酶(NOS)是一种非常重要的生物小分子NO合成催化酶,一氧化氮合(NOS)包括三个同型酶:神经酶(nNOS), 和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。每种酶产生的NO分别用于神经传递、血管舒张和免疫应答
喷雾干燥技术在大豆分离蛋白中的应用
大豆分离蛋白(Soy Protein Isolate,简称 SPI)是指干基蛋白质含量≥90%的粉状大豆制品,大豆分离蛋白的制取工艺有多种,如碱溶酸沉法、膜分离法等,其中碱溶酸沉法生产大豆分离蛋白是目前世界上最常用的工艺,它以低温脱脂脱溶豆粕为原料,通过碱溶及等电点沉淀将脱脂豆粕中的可溶性和不溶
蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用
【关键词】 蛋白质芯片;卵巢癌;前列腺癌;肿瘤;临床检验 蛋白质芯片技术在肿瘤研究领域中进展最快。随着肿瘤细胞的发生,肿瘤患者体内某些蛋白质会发生上调或下调,或产生新的与肿瘤关联的异常蛋白,而蛋白质芯片技术可以描绘出患者体液中所有蛋白质表达情况。根据正常与异常的蛋白质表达谱的差异,从而建立肿瘤的指
GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验-2
16. 标记反应以后,采用下述公式计算标记率: Aλ X M / [ ( A280-ƒ X Aλ ) X ελ ]式中 Aλ是染料在其最大吸收波长λ处的吸收度,A280 是蛋白质在 280nm 的吸收度,M 是以
GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验-1
实验材料 进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸消化缓冲液NN-二甲基甲酰胺磷酸钠磷酸盐缓冲溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 单功能硫代吲哚花菁琥珀酰亚胺酯抗体SDS-聚丙烯酰胺凝胶明胶溶液聚-L-赖氨酸质粒 DNAGFP 融合载
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...(二)
材料和方法 对照血清(绵羊)和病毒抗原购自英国NIBSC,除了B/Brisbane/3/2007血清和抗原来自荷兰Solvay Phormaceuticols,PR/B/34血清(鸡)和病毒是购自美国Charles River Laboratories。重组的全长HA蛋白(A/H1N1
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...(三)
表1 计算浓度和变异系数,以分析B/jiangsu/10/2005(图3) SRID 血清以Cy3-染料标记。未标记的血清和Cy3-标记的血清(小于总血清量的0.5%;证实不会干扰沉淀)与熔化的琼脂糖混合,浇铸在模中,以形成凝胶中的孔。样品和参照抗原在加入凝胶孔之前,用1%的两性洗涤
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...(四)
为了扩展特异性研究,对27种不同的血清与固定了HA/H3N2的表面之间的结合进行分析(图5、表2)。结果显示只有特异针对H3N2亚型的血清才能与表面明显结合。抗-B和抗-H1N1血清显示出低的结合水平。相应地,利用50 mM HCl、0.05% P2O再生后,也开展了27种血清与固定了HA/
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...(六)
讨论在本文中,我们展示了一种新颖的定量HA的生物传感器方法的开发和初步结果,它利用了与SRID方法相同的参照抗原和血清,再加上固定的HA。来自不同供应商的重组HA蛋白经过固定化的测试,并根据固定性质(如活性和直接稀释到固定缓冲液的高浓度)进行挑选(数据未显示)。挑选出的蛋白可利用标准的氨基偶联步骤,
一种利用表面等离子共振定量流感病毒的新方法...(五)
表3:添加剂对回收的影响。参照抗原B/Jiangsu/lO/2005(5 ug/ml)与添加剂混合,并在B表面上分析样品。结果与HBS-EP+缓冲液中无添加剂的对照样品进行比较。 工艺样品的分析 为了测试生物传感器方法的性能,对流感疫苗纯化过程中不同阶段的样品进行了分析,从收集的细胞
融合蛋白技术的临床应用
1、DNA疫苗目前,疫苗已经经历了三代:第一代疫苗是用减毒或杀死的病原体来激活机体免疫系统;第二代疫苗是用生物技术和重组DNA技术研制的组分疫苗注射机体诱导免疫应答; 第三代疫苗是直接注射基因重组的抗原基因来激活人体免疫系统,即DNA疫苗。DNA疫苗与传统疫苗相比有着明显的优势,如易于生产,稳定性强
中性蛋白酶在大豆分离蛋白的应用
能水解大豆分离蛋白成小分子肽,大大提高了大豆分离蛋白的生物效价,使其易为人体消化吸收,同时还提高了溶解,降低了粘度,改善了大豆分离蛋白的功能特性。
血浆蛋白在饲料中的应用
畜禽血液饲料,80年代前利用形式主要是蒸煮血粉或压榨血粉80年代初期一些科研单位和企业,开始联合研制发酵血粉。如武汉肉联厂同中国科学院武汉病毒研究所,研制的“喂壮—W发酵血粉”;80年代中期杭州商学院试制成功酶化猪血粉。
表面等离子体共振OpenSPR改进肽筛选研究方法
在任何治疗开发项目的第一阶段,有必要使用一个完善的模型系统来审查比较新的治疗药物。用一个稳定的模型系统来比较新的治疗方法。建立模型系统将为有效的筛选分析提供基础,从而使研究者能够有效地比较和对比他们感兴趣的治疗剂的各种生物学变化。重要的是,透明质酸介导的运动受体,也被称为RHSMM,通常在乳腺癌,结
Gradiflow-技术在蛋白质分离研究中的应用(二)
2. 蛋白质组预分离2DE是研究者常用的蛋白质组分析方法,这种方法很有用,但是它的限制因素在实验过程中逐渐呈现出来,比如一些膜蛋白,高分子量和低分子量的蛋白质,就很难用2DE检测出来。特别是一些蛋白样品中包含高丰度的蛋白质,这样就很有可能将研究者感兴趣的蛋白质掩盖,在2DE图谱上体现不出来,从而减少
质谱技术在蛋白组研究中的应用(二)
6 质谱仪的最新进展 用质谱检测蛋白,首先考虑到用PMF与 MALDI-TOF联用,如果无法检测,下一步就用ESI-MS/MS创建序列标签。在PMF分析中,MALDI的平板中只需一小部分样本就足以检测,剩下的样本就可以用来创建序列标签。并且,在MALDI-TOF仪器上,用一种叫做“源后延迟”
离心机在血清脂蛋白分离上的技术应用
血清脂蛋白是由血液中脂质与某些特异的蛋白质组成的一类不均一的复合物。因其所含脂与载脂蛋白的比例不同,其密度范围在0.96g/ml或更低至1.21g/ml之间。纸电泳中显示四条带即:乳密颗粒,极低密度脂蛋白,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白。每种脂蛋白还可以分为更多的亚组分。 用电泳法分离含载脂蛋白
相互作用蛋白鉴定实验——相互作用蛋白捕获
实验方法原理实验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有 LexA 融合探针、报道基因和插入PJG4-5(见图19.1.6)的 GAL 启动子控制下的 cDNA 表达文库。最近,已有可供用于这个系统的文库。实验材料携带适当质粒组合的酵母菌试剂、试剂盒完全(CM)缺失成分液体培养基含有如下指
冷冻电镜结合-Nanodisc在膜蛋白研究的应用(一)
细胞生物膜所含的蛋白称为膜蛋白,其参与和行使了众多细胞功能,包括细胞与外界进行物质运输、信息传递、能量交换等。膜蛋白担任了各种神经信号分子、激素和其他底物的受体,构成了各种离子跨膜的通道,以及构成各类转运蛋白。在人体蛋白中,有大约 30% 是膜蛋白。FDA 批准的新药中,绝大多数都以膜蛋白为靶点
中国表面等离子共振技术引领者英柏生物完成PreA轮融资
近日,中国表面等离子共振(SPR)技术平台引领者英柏生物宣布完成Pre-A轮融资,本轮融资由金坛资本投资,浩悦资本担任本轮融资的独家财务顾问。本轮融资将助力英柏生物的商业化装机、量产、市场推广与销售,建设实验室以扩大产能,以及持续性的新产品研发投入。 英柏生物成立于2013年,致力于表面等离子
等离子表面清洗机清洗什么?等离子体在汽车制造中应用
等离子表面清洗机清洗什么?等离子体在汽车制造中的应用,等离子设备在汽车内饰制造工艺中的应用,等离子表面处理器在车灯生产中的实践。低温等离子体在汽车车灯制造工艺中的应用:一:热熔胶与冷胶的特点: 热熔胶的特点在一定熔解温度下处于流体状态,由自动涂胶机自动注入灯体上胶槽,冷却速度快,生产效率占有及大优
新一代SPR-技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用(二)
蛋白结合分析:将NOS固定OpenSPR的纳米金芯片表面,并对CaM做浓度梯度检测,结果导入TraceDrawer分析。(图4 )OpenSPR实时检测,梯度稀释后不同浓度检测出野生型CaM对nNOS(红线)和eNOS 肽(紫红线)的结合情况,观察结合、解离及再生的整个过程,结果显示实验曲线稳定及信
中性蛋白酶在大豆分离蛋白中的应用
大豆分离蛋白的应用:能水解大豆分离蛋白成小分子肽,大大提高了大豆分离蛋白的生物效价,使其易为人体消化吸收,同时还提高了溶解,降低了粘度,改善了大豆分离蛋白的功能特性。
研究蛋白质相互作用的新技术
近期,来自多伦多大学Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute (LTRI)和Donnelly中心的一组研究人员,开发出一种新技术,可以将细胞内的DNA条形码拼接在一起,以同时搜寻数百万个蛋白质配对,用以分析蛋白质相互作用。相关研究结果发表在4月22日的《Mol
等离子体技术在恶臭净化中的应用
恶臭气体种类繁多、分布广泛。污水处理中产生的恶臭成分是由于蛋白质、脂肪、碳水化合物被微生物呼吸或发酵所形成的产物和不完全产物。根据臭气物质的化学组成,可将其分为4类:第1类是含硫化合物,如硫化氢、硫醇、硫醚以及噻吩等;第2类是含氮化合物,如氨、胺、酰胺以及吲哚等;第3类是烃类化合物,如烷烃、烯烃、炔
全自动表面等离子体共振成像仪的优异功能
1.阵列式检测,同一芯片可同时获得多达400种相互作用 创新的阵列式芯片设计,同一芯片可同时分析超过400组相互作用,与传统的通道-技术相比,所需时间缩短百倍,并节约试剂和人力成本,特别适用于快速筛选。 2.无标记,实时生物分子相互作用分析与成像 基于SPR技术、新型的生物传感技术,
Nature:利用几何指纹解开蛋白表面相互作用之谜
在一项新的研究中,来自瑞士生物信息学研究所的研究人员使用一种生成蛋白表面“指纹”的几何深度学习工具来描述对蛋白-蛋白相互作用至关重要的几何和化学特征。他们指出,他们假设的“指纹”导致了分子识别和新蛋白相互作用的重要方面的新见解。相关研究结果发表在2023年5月4日的Nature期刊上,论文标题为“D
plasma等离子清洗机在金属表面的处理应用
金属表面常常会有油脂、油污等有机物及氧化层,在进行溅射、油漆、粘合、键合、焊接、铜焊和PVD、CVD涂覆前,需要用等离子处理来得到洁净和无氧化层的表面。 在这种情况下的等离子处理会产生以下效果: a、灰化表面有机层 被有机物污染表面会受到化学轰击;在真空和瞬时高温状态下,污染物部分蒸发;在