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如何设置一个PCR体系?

一般分为8步:1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。3、退火:温度自定,30s~2min。4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。5、循环数:一般25~35个循环。6、最终延伸:72℃,5~15min。7、保存:10℃,时间设为0。8、END。......阅读全文

如何设置一个PCR体系?

一般分为8步:1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。3、退火:温度自定,30s~2min。4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。5、循环数:一

如何建立一个PCR实验室?

为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施:1)PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2)组织培养物、组织标本和血清样品都带进

如何评价一个食品微生物快速检测体系?

  食品中的微生物尤其是致病菌具有检出率高但是含量低的特点,故检测方法的灵敏度和限量要求之间有着很大的差异。因此,一个好的检测系统应该包括一个好的增菌培养方法和一个好的检测方法,二者要综合起来一起评价。一个好的增菌培养方法要满足以下条件:微生物的复苏能力要强,生长速度要快,选择性要好,产量要高;而一

如何设置梯度PCR

  1、打开PCR仪,再找到一个普通PCR程序,以备改动(也可以自行重新编辑)  2、按enter键打开PCR普通程序,按”编辑“进入程序编辑状态,按“Tab”键将编辑区域调节至右侧选择是否进行梯度PCR选项,选择“是”  3、选择梯度PCR后按Tab键回到左边程序,点击下一步进行编辑,此时可看到整

一个新手如何看懂卡尺

  一个新手可以通过学习卡尺说明书来看懂卡尺,标卡尺是一种测量长度、内外径、深度的量具。游标卡尺由主尺和附在主尺上能滑动的游标两部分构成。游标卡尺的主尺和游标上有两副活动量爪,分别是内测量爪和外测量爪,内测量爪通常用来测量内径。

一个防御蛋白如何“叛变”致癌

  癌症是由携带DNA突变(DNA复制过程中发生的“复制错误”)的异常细胞增殖引起的。如果这些错误经常发生而对生物没有任何破坏性影响,那么其中一些就会影响基因组的特定部分,并引起突变细胞的增殖,然后侵入机体。即便一个小小的单碱基突变,也会导致癌症,例如,2015年11月,儿童肿瘤学研究人员发现了一个

建立一个实时 PCR 定量分析实验

对于一个新的靶分子建立实时 PCR 定量分析的过程包括:①设计步骤一 PCR 引物和探针的选择;②根据特定分析的要求,选择实时 PCR 的检測方法。使用 SYBRGreen 的实时 PCR 通常被用于优化引物,且被主要用于在研究中检测 PCR 产物 TaqMari 探针和分子信号提供了更好的特异性。

建立一个实时 PCR 定量分析实验

            试剂、试剂盒 MgCl2 探针 HotStmMix 正向和反向扩增引物 模板 DNA

定量PCR熔解曲线为何不止一个主峰

1.引物设计不够优化。应避免引物二聚体和发夹结构的出现。2.引物浓度不佳。适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。3.镁离子浓度过高。适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。4.模板有基因组的污染。RNA提取过程中避免DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。

核酸分析仪和pcr是一个东西吗

不一样。1、核酸分析仪是能自动进行核酸序列分析的仪器。实则为一种自动凝胶扣描仪。它 集一个电泳系统、一个激光激发系统、一个荧光检测系统、一 台电脑图像、数据处理机及一台彩色激光打印机于一身.采 用四种不同的荧光素来代替传统的同位素测序检测。这四种 互不相关、具有各自特异的激发和发射波长约荧光素标记的