1mol/LTris的配制
在800ml水中溶解121.1gTris碱,加入浓HCl调节pH至所需值。pH HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值,加水定容至1升,分装后高压灭菌。......阅读全文
1mol/LTris的配制
在800ml水中溶解121.1gTris碱,加入浓HCl调节pH至所需值。pH HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值,加水定容至1升,分装后高压灭菌。
1mol/L-HEPES配制方法
将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/LMgCl2的配制
在800ml水中溶解203.3gMgCl2?6H2O,用水定容至1升,分装成小份并高压灭菌备用。
1mol/LCaCl2的配制
用20ml0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09gDTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine)配制方法
溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L亚精胺(Spermidine)配制方法
溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L氯化钾(KCl)配制方法
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT)配制方法
在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
分子生物学常用试剂的配制
1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract)5g细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10gNaCl10g摇动容器直至溶质完全溶解,用5mol/LNaOH(约0.2
分子生物学常用试剂的配制
1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制 配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入: 细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g 细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g NaCl 10g 摇动容器直至溶质完全溶解,用5mo
Western-Blot主要试剂
主要试剂 1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O**100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.
Western-Blot详解-主要试剂
主要试剂1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O至100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以
PAGE胶制备方法实验
实验试剂1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯
PAGE胶制备方法
实验试剂1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯
SDSPAGE胶制备
一. 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)实验原理和操作步骤
实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶
Western免疫印迹(Western-Blot)实验原理和主要试剂
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。实验原理与Southern或 Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电
Western-Blot的原理和所用试剂汇总
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物
Western-Blot的原理和所用试剂汇总
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被
PAGE胶制备方法
实验概要SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中
SDSPAGE凝胶电泳凝胶的制备方法
SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸 ,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一. 实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子 量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部
Western-Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)1
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、 分类i.放射自显影ii.底物化
Western-Blot的原理和所用试剂汇总
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blo
Western-Blot的原理和所用试剂汇总
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blo
RNA-反转录
实验材料 poly(A)+RNA反转录酶鼠源反转酶 或禽源反转录酶试剂、试剂盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin实验步骤 一材料与设备1)p
RNA-反转录
实验材料 poly(A)+RNA 反转录酶 鼠源反转酶 或禽源反转录酶 试剂、试剂盒 oligo
酚的配制
酚:氯仿:把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/LTris?Cl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/LTris?Cl(pH7.6)液层,保存于4℃。
天然培养基配制实验_胶原的配制
实验方法原理胶原是细胞生长良好的基质,它是从动物特定组织中用人工法提取出的,利于组织和细胞的固定,亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着,能改善细胞表面性质,促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等,其中以鼠尾胶原最为常用和制备简便,可配制成0.1%—1%的醋酸溶液,实验材料鼠
平衡盐溶液配制实验——BSS-的配制实验
实验方法原理BSS 是从Ringer 生理盐水发展起来的,主要由无机盐和葡萄糖组成。BSS 中的无机离子不仅是细胞生命所需成分,而且对维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度方面,起着重要作用。BSS 内含少量的酚红,作为溶液酸碱度变化的指示剂;溶液变酸时呈黄色,变碱时呈紫红色,中性时呈桃红色,借此易于观
sdspage凝胶电泳怎么制备
SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一.实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结