细胞培养基本技术概述(五)

实验用品 1. 种类︰ 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌 制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等,依实验需要使用。 1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml 1.4. 塑料离心管: 15 ml, 50 ml,均有2 种不同材质,其中polypropylene (PP) 为不透 明材质,polystyrene (PS) 为透明材质,可依实验需要而选择适合材质之离心管。 1.5. glass pastuer pipet: 9 inch,用以抽掉废弃培养液等。 1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware):100 ml, 250 ml,5......阅读全文

ncm460细胞细胞培养的基本技术(二)消毒

、消毒1. 包装 器材经清洗烤干或晾干后,先应严格包装,然后再行消毒灭菌处理,以防止消毒灭菌后再次遭受污染。包装材料常用包装纸、牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、玻璃或金属制吸管筒、纸绳等。2. 消毒 消毒灭菌随物品的不同,而采用不同的方法。(1)紫外线:主要用于消毒实验室空气、工作台面和一些不能使用其

细胞培养技术的细胞培养方式

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不

细胞培养技术的技术分类

动物细胞培养高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯

细胞培养技术4

贴壁因子使用方法:①选择适宜的贴壁因子。②将贴壁因子贮存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀释成0.1毫克/毫升的工作液。③滤过除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培养器皿的细胞生长面。④室温静置5分钟(胶原基质延长24小时)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用灭菌三蒸水洗涤后,再经细胞培养基浸泡过渡,

细胞培养技术2

◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象,可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕,不要急于取出消毒品,可利用消毒器的余热去除物品部分湿气,待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒  这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒,一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死

细胞培养技术3

◇水解乳蛋白  水解乳蛋白为淡黄色粉末,虽易潮解结块,但不影响使用。  不同批号和牌号质量有差异。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物,含有丰富的氨基酸。开始时它是专为猴肾细胞培养设计的,而实际上它对许多细胞系(株),如Hela细胞和原代细胞都是一种优良培养基。使用时用Hanks液配制成0

细胞培养技术1

一.细胞培养的基本原理  细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片

微生物学检验基本技术(五)

9.脂酶试验(1)原理:细菌产生的脂酶可分解脂肪为游离脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物,如果脂肪被分解,则维多利亚蓝释出,呈蓝色。(2)方法:将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中,置35℃孵育24h,观察结果。(3)结果:培养基变为深蓝色者为阳性,否则可呈无色或粉红色。

小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术

实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研

细胞培养的基本条

细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。以下是细胞培养的基本条件: 一、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质

细胞培养基本方法

= 细胞培养基本方法 = (一)准备和安装过滤器 (二)合成培养基的配制 (三)小牛血清的处理 (四)生长培养基的配制(五)冻存细胞的复苏  (六)传代       (七)冻存      (八)注意事项 (一)准备和安装过滤器   清洗好过滤器,干燥,放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜,用布包装好,

细胞培养基本方法

一)准备和安装过滤器  清洗好过滤器,干燥,放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜,用布包装好,15磅20 min进行高压灭菌处理。 在超净台内打开过滤器架好,胶管一端接入滤泵再插入待除菌的液体中,出口端胶管深入到已消毒好的瓶子中。用泵过滤,过滤后要检查滤膜是否完好无损。 (二)合成培养基的配制 1、根

五灵胶囊的概述

  五灵胶囊通过抑制枯否细胞释放细胞因子对肝细胞造成的损害,增加肝细胞膜的稳定性,促进肝细胞内蛋白合成,有效清除活性氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化作用,修复肝细胞损伤。抑制肝星状细胞激活,抑制基质(ECM)合成和促进基质分解,治疗肝损伤、抗肝纤维化。

血型与输血概述(五)

  (六)交叉配血  交叉配血是在输血前必做的试验,其做法系使供血者红细胞与受血者血清反应(主侧义叉配血)和受血者红细胞与供血者血清反应(次侧义叉配血),观察两者是否出现凝集的试验。其目的是检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合情况。  交叉配血中最重要的是ABO血型配合,必需ABO血型相同,

五灵胶囊的概述

  五灵胶囊通过抑制枯否细胞释放细胞因子对肝细胞造成的损害,增加肝细胞膜的稳定性,促进肝细胞内蛋白合成,有效清除活性氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化作用,修复肝细胞损伤。抑制肝星状细胞激活,抑制基质(ECM)合成和促进基质分解,治疗肝损伤、抗肝纤维化。

猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术

实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴

大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM

实用哺乳动物细胞培养手册(五)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定

关于血细胞五分类技术及其应用进展的概述

  血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,是指对一定体积内血细胞数量及异质性进行分析的仪器。20世纪90年代以来,随着电子技术、流式细胞技术、激光技术、电子计算机技术和新荧光化学物质等各种高新技术在血细胞分析仪中的应用.使血细胞分析仪的检测原理不断完善、测量参数不断增加、检测水平不断提高

原代细胞培养技术分类

一、组织块直接培养法1、取材,用Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶,并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转,瓶底朝上,向瓶内注入适量的培养液,将培养瓶放置在37℃恒温箱

什么是细胞培养技术?

  细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长,在培养的过程中细胞不再形成组织(动物)。  培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中,由于环境的改变,细胞的移动或受一些其他因素的影响,培养时间加长,传代导致细胞出现单一化型。

什么是细胞培养技术?

细胞培养技术是指在体外模拟体内环境,从机体中取出细胞,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖并维持其结构和功能的一种技术。

细胞培养技术的分类

动物细胞培养在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用

肿瘤细胞培养技术要点

取材材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。成纤维细胞排除在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同时生长,并常压过

细胞培养的基本方法(二)

第四节 细胞计数及活力测定一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分

细胞培养基本知识

一.细胞培育的基本概念体外培育(in vitro culture)包含一切构造层次的培育,即:安排培育(tissue culture)、细胞培育(cell culture)和器官培育(organ culture)。细胞培育(Cell culture)指从生物机体取出有些安排涣散成单个细胞或直接从机体

单细胞培养的基本介绍

  单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现

动物细胞培养——基本练习

实验方法原理这部分是一名实习生或学生应当首先接触的内容。大部分是简单易懂并易于操作的,为了使实验比较有趣,操作方案和备选方案以相互参考的方式详细列出。每一个操作方案中材料部分的指定数量见操作说明,但可以按比例调节。表2.1中黑体部分的练习是必需的。首先有必要参观介绍组织培养的设施,这可以使实习生.见

细胞培养基本概念和细胞培养的环境

一、细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋

概述杂交瘤技术的基本原理

  杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用