细胞培养技术2
◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象，可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕，不要急于取出消毒品，可利用消毒器的余热去除物品部分湿气，待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒 这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒，一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死芽胞，达到消灭包括细菌、芽孢在内的一切微生物的目的，还可破坏热原质。消毒完毕，待烘箱内温度冷却后再开门，避免因冷空气突然进入，烘箱内温度骤降引起玻璃器皿损坏。3.紫外线消毒 紫外线直接照射消毒是各实验室常用的方法，主要用于培养室空气、操作台、塑料培养皿和培养板等表面消毒。进行室内消毒时，紫外线灯应距地面2．5米，使各处有0．06微瓦能量的照射。当室内有尘土时，杀菌能力减弱，故其消毒环境应清洁无尘，并要求消毒空气湿度小于50％，才能达到杀菌效果。紫外线消毒时产生臭氧，对身体有害，故紫外线消毒停止后30分钟才可入室工作。目前有的实验室采......阅读全文
细胞培养技术2
◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象，可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕，不要急于取出消毒品，可利用消毒器的余热去除物品部分湿气，待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒 这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒，一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死
细胞实验技术及细胞培养基本知识2
（二）人类淋巴母细胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于离心管中，加入2ml RPMI 1640。 2、混匀后沿管壁缓慢加到预置有4ml淋巴细胞分离液的液面上静置30min。 3、1500rpm，15min，吸取白细胞层（第二层）于另一离心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗涤白细胞两次。
细胞培养大攻略2
26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别？ PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用，PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养
细胞培养技术
实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染
WML2细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mLWML2细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8
2A1细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL2A1细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8m
各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10
类器官芯片技术和传统－2D－细胞培养技术有什么区别？
类器官芯片技术和传统 2D 细胞培养技术主要有以下区别：细胞生长环境类器官芯片：能够更好地模拟体内细胞的三维生长环境，包括细胞外基质、细胞间相互作用、化学梯度和物理刺激等。2D 细胞培养：细胞在平面上生长，缺乏细胞间和细胞与基质间的复杂相互作用，以及三维空间中的营养和氧气梯度。细胞形态和功能类器官芯
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不
细胞培养技术的技术分类
动物细胞培养高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯
细胞培养技术4
贴壁因子使用方法：①选择适宜的贴壁因子。②将贴壁因子贮存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀释成0．1毫克/毫升的工作液。③滤过除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培养器皿的细胞生长面。④室温静置5分钟(胶原基质延长24小时)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用灭菌三蒸水洗涤后，再经细胞培养基浸泡过渡，
细胞培养技术3
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白为淡黄色粉末，虽易潮解结块，但不影响使用。 不同批号和牌号质量有差异。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物，含有丰富的氨基酸。开始时它是专为猴肾细胞培养设计的，而实际上它对许多细胞系(株)，如Hela细胞和原代细胞都是一种优良培养基。使用时用Hanks液配制成0
细胞培养技术1
一.细胞培养的基本原理 细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液，组织培养使用的是组织块(0．5～1立方毫米)或薄片
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
平滑肌细胞培养方法2
1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠，雌雄不限，购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基，D-Hanks粉，标准胎牛血清，胰蛋白酶粉（1∶250）均购自Hy-Clone公司；青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂；鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体，购自Zymed
HepG2细胞培养的条件
HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性，还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。1.HepG2细胞的复苏条件1.1 复苏温度的选择唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏
2B4细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL2B4细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8m
LLCMK2细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mLLLC-MK2细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织，所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法，用单一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的，它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
实验技术：细胞培养基本技术
细胞培养 一、操作规程： 1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70％酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用
实验技术：细胞培养基本技术
一、操作规程：1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70％酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用70％酒精擦拭无菌操作台面,再
2A1细胞培养注意事项
1. 收到2A1细胞。后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读2A1细胞。说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。3
HePG2细胞培养注意事项
很好培养啊……你是想问这种细胞特殊的培养需要还是只是指培养细胞应注意的事项呀？就，正常操作就是，不要啥东西都用火烧一下。。。手不要碰任何瓶口，不要碰微量移液枪的插枪头的位置，手、胳膊不要从开口的东西上面经过，如果是用细胞培养瓶培养，放入培养箱速度快一点，别打开这培养箱的门，瓶盖不用拧得很松。如果是新
细胞培养常见问题与解答2
8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀？GIBICO的胎牛血清 没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白
细胞培养污染拯救及预防方法2
2、支原体污染的检测（1）相差显微镜观察直接取少许培养液滴在载物片上，再盖上盖片观察，支原体在镜下呈暗色微小颗粒，多位于细胞与细胞之间，有时可见类似于布朗运动的表现。应注意与细胞破碎溢出的内容物如线粒体等相区别。（2）荧光染色法观察用荧光染料Hoechst33258，此染料能与DNA特异地结合，可使
BV2细胞培养注意事项
BV2细胞基本信息 细胞名称：BV2(小鼠小胶质细胞) 细胞别称:BV-2 细胞货号:SNL-155 生长特性:半贴壁细胞 培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S 培养环境:空气，95%；二氧化碳(CO2)，5%；37℃ 细胞简介:BV-2细胞是由E·Blasi建立于1990
神经细胞培养基总结2
许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求，只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如，大鼠交感神经元仅需NGF即能存活，在其生存期间，这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月（即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上）。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生
脐静脉内皮细胞培养方法2
（2）术前准备取一根脐带（离体3个小时内，平均1小时，剪去夹伤部位）2个50ML注射器，1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳，2根插管，14号线2CM长，消毒巾，消毒手术刀和无菌手套手术区域准备：一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养（1）用手术刀整齐切断脐带两端（2）静脉（口径最
原代细胞培养技术分类
一、组织块直接培养法1、取材，用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶，并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转，瓶底朝上，向瓶内注入适量的培养液，将培养瓶放置在37℃恒温箱