芯片分离蛋白

尽管现在所有的注意力都集中到了蛋白芯片的研究上,蛋白质组研究实验室的主流技术还是双向凝胶电泳。双向凝胶电泳在历史上由于其低通量、低重复性以及对于少量蛋白不易检出的特性,其应用受到限制,这些少量蛋白通常是人类蛋白质组中最重要的疾病相关蛋白。然而,双向凝胶电泳技术的优势又继续推动了日益进展高通量模式的细化与开发。数码蛋白质组芯片是Protein Forest公司的微化芯片,用于通过电荷和分子量大小在混和物中分离蛋白。在第一维分离中采用的等电点分离可被有效地数字化,在第二维采用的标准电泳中避免了在线型梯度中常常会出现的模糊现象。公司首席执行官Russell Garlick说:“采用等电点分离,精度的提高是关键所在,这样就可以提高可重复性。” 通过微芯片进行分离只需要几分钟的时间,可以明显的提高产量。芯片具有的灵敏度可以用来鉴定低丰度或者迁移率比较特殊的蛋白质。蛋白质可以被量化,从而在一种芯片格式中可以显示蛋白质组范......阅读全文

芯片分离蛋白

尽管现在所有的注意力都集中到了蛋白芯片的研究上,蛋白质组研究实验室的主流技术还是双向凝胶电泳。双向凝胶电泳在历史上由于其低通量、低重复性以及对于少量蛋白不易检出的特性,其应用受到限制,这些少量蛋白通常是人类蛋白质组中最重要的疾病相关蛋白。然而,双向凝胶电泳技术的优势又继续推动了日益进展高通量模式的细

芯片等电聚焦分离

芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同,都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,

蛋白芯片制作与应用(4)-液态芯片

液态芯片原理编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码

蛋白芯片检测Hp

大渊幽门螺旋杆菌(HP)IgG抗体蛋白芯片检测系统(PBT-HP-01-A型芯片)是一种定性的蛋白芯片,共放有细胞毒素相关蛋白(CagA),尿素酶C(ureC)二个指标,采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为免疫金标记。  大渊幽门螺旋杆菌(HP)现症蛋白芯片鉴定检测系统(PBT-HP-02

蛋白芯片检测ENA

 大渊自身抗体九项IgG抗体蛋白芯片检测系统是一种定性的蛋白芯片,共集合有抗dsDNA抗体、抗Histone抗体、 抗Smith抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体、抗Rib-P抗体、抗RNP抗体九个指标。采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为胶体金标

芯片二维电泳分离

芯片毛细管电泳应用的成功促进了高速高效的芯片二维电泳技术的发展。对于多组分的复杂蛋白质样品,采用传统的一维分离方法通常无法满足要求,需要采用二维分离技术来提高分离效率,增加峰容量。与传统的毛细管电泳系统相比,在芯片上进行二维电泳分离,可以通过设计芯片通道结构实现通道的直接交叉或连通,而无需制作复杂的

蛋白质分离实验_分离未知-pI-蛋白质

用 CE 进行 IEF分离是选择随后用于在非衍生毛细管柱上分离蛋白的缓冲液系统的有效的第一步。如果没有检测到蛋白质,可能是被吸收到柱的硅表面。在离子去垢剂如 SDS 存在的情况下重复分离过程,这样就会用负电荷包被蛋白质从而阻止吸收。但是,这意味着蛋白质只能依据大小的不同而进行分离。知道蛋白质的 pI

蛋白质芯片技术固体芯片的构建方法

常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。

蛋白芯片制作与应用(1)-液态芯片原理

液态芯片原理编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码

外在蛋白的分离

  由于其溶于水,所以可以用高浓度的盐溶液或某些化学物质将许多周边蛋白从膜上除去,高盐溶液可以破坏离子键,所以不需要用后垢剂溶解。

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

膜蛋白分离方法

1 细胞质膜资料1895 年 ,Overton 从研究细胞透性得出 " 细胞膜由连续的脂类物质组成 " 。1925 年 Gorter&Grendel: 用脂单分子膜技术测定细胞膜中脂分子的总面积,提出: "细胞膜是由双层脂分子组成 " 。1935 年 Danielli&Davson :从测定膜的表面

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

蛋白质分离实验_分离已知pI-的蛋白质

实验材料含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒缓冲液(pH>pI)仪器、耗材50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 (V/F) 稀释蛋白质样品,使蛋白质(终浓度 = 1.0 mg/ml) 产生电荷

蛋白芯片检测心梗

一、什么是心肌梗塞?   心肌梗塞(acute myocardial infarction,AMI)是由于冠状动脉急性闭塞引起部分阶段心肌缺血性坏死。临床常表现为剧烈而持久的胸痛,血清心肌酶活力增高,以及反映心肌急性损伤、缺血和坏死一系列特征性心电图衍变。常并发心律失常及急性循环功能障碍。属冠心

蛋白芯片技术的原理

蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生

蛋白质芯片的制备

固体芯片的构建常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。探针的制备低密度蛋白质芯片的探针包括特定的抗原、抗体、酶、吸水或疏水物

什么是蛋白质芯片?

蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与蛋白质的相互作用,甚至DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用,筛选药物作用的蛋白靶点等。

蛋白质芯片的种类

蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。

蛋白质芯片的特点

⒈ 直接用粗生物样品(血清、尿、体液)进行分析⒉ 同时快速发现多个生物标记物⒊ 小量样品⒋ 高通量的验证能力⒌ 发现低丰度蛋白质⒍ 测定疏水蛋白质: 与“双相电泳加飞行质谱”相比,除了有相似功能外,并可增加测定疏水蛋白质⒎ 在同一系统中集发现和检测为一体 特异性高 利用单克隆抗体芯片,可鉴定未知抗原

蛋白芯片技术解析(二)

蛋白芯片应用:蛋白芯片检测蛋白芯片检测技术按照模式和应用的不同可以分为:正相和反相检测技术。目前广泛使用的是正相蛋白芯片分析技术,它利用不同样品与固定在芯片上的大量已知捕捉分子的相互作用,来同时进行多参数的检测分析。这项技术包括了用于识别和定量目标蛋白的抗体芯片技术和用于分析蛋白和固定结合分子相互作

蛋白芯片技术解析(一)

人类基因组测序计划完成之后,科学家们凭借良好的DNA芯片及坚实的生物信息学平台可以全面地了解生命细胞系统。然而在不同的细胞生理  状态下,细胞内蛋白表达及蛋白的功能存在着差异,细胞蛋白质组存在着差异。而且多种因素影响着细胞在不同环境下的生理状态,比如,细胞信号分子,细胞间及细胞与基质的相互作用

蛋白芯片的主要类型

蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。

蛋白质芯片技术特点

⒈ 直接用粗生物样品(血清、尿、体液)进行分析⒉ 同时快速发现多个生物标记物⒊ 小量样品⒋ 高通量的验证能力⒌ 发现低丰度蛋白质⒍ 测定疏水蛋白质: 与“双相电泳加飞行质谱”相比,除了有相似功能外,并可增加测定疏水蛋白质⒎ 在同一系统中集发现和检测为一体 特异性高 利用单克隆抗体芯片,可鉴定未知抗原

蛋白质芯片技术简介

由于利用了DNA与互补的DNA或RNA结合的典型性质, DNA 芯片在短时间内就取得了成功. 然而, 已经有关于mRNA 和蛋白质之间数量关系上的争论, 而且实际上在细胞中参与各种不同反应的都是蛋白质. 因此, 如果能制造出蛋白质芯片而不是DNA芯片, 而且如果蛋白质表达强度和键合物能被发现, 就有

蛋白质芯片的原理

蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生

蛋白芯片的主要种类

蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。蛋白质微阵列哈佛大学的Macbeath和SchreiberL等报道了:通过点样机械装置制作蛋白质芯片的研究,将针尖浸入装有纯化的蛋白质溶液的微孔中,然后移至载玻片上,在载玻片表面点上1nl的溶液,然后机械手重复操作,点不同的蛋白质

分离纯化蛋白质的分离方法介绍

  * 透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。  * 超滤法,应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液的目的。  *丙酮、乙醇等有机溶剂沉淀法,可破坏蛋白质的水化层,在0~4℃低温下,使蛋白质沉淀。环境温度高等不良因素影响下,有

蛋白质分离纯化

蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法。

IEF分离蛋白质

实验概要等电点聚焦电泳(IEF)就是在电泳胶中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质在此体系中泳动时,不同的蛋白质即聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开,由于I