体内荧光成像技术的进展(二)

可激活定靶探针可激活定靶探针一般用于酶活的功能成像。它们往往含有两个以上的等同或不同的色素团,两个色素团通过酶特异性多肽接头彼此紧密相连。这类探针主要呈黑色,没有或者很少发射荧光,这主要是由于非常相近(等同色素团)或者共振能的转移(不同色素团 )所造成的淬灭效应所致。多肽接头的切除,使它们的荧光团释放出来,荧光发射于是得以恢复。因此,可激活探针的背景信号通常很低,但造影和检测的灵敏性却高于活性探针。一些可激活探针见于本文文献和某些综述。酶靶点主要限于蛋白酶,包括组织蛋白酶、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶、基质金属蛋白酶、凝血酶、HIV 和 HSV蛋白酶以及尿激酶类血纤维蛋白溶酶原激活剂,等等新荧光探针小有机荧光团化学家不断地研发着具有改良的荧光量子产量、高化学和光学稳定性、低聚合性和低细胞毒性的新NIR荧光色素。例如,Dehaen等利用钯催化的偶联反应合成了数个BODIPY衍生物,发射光范围从绿色到近红外不等。Zhao等......阅读全文

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(二)

1.3定量方法在real-timeQ-PCR中,模板定量有两种策略:相对定t和绝对定。相对定t指的是在一定样本中靶序列相对于另一参照样本的f的变化。绝对定t指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的to1.3.1标准曲线法的相对定f由于在此方法中f的表达是相对于某个参照物的f而官的,因此相对定f的标准

叶绿素荧光成像技术应用—水稻胁迫响应分析

水稻生长过程中,易遭受各种非生物胁迫(如干旱、盐碱)与生物胁迫(稻瘟病、白叶枯病等),从而严重影响水稻生产。针对上述胁迫对水稻产生的影响进行精准可重复的表型分析是一项严峻挑战。植物吸收的光能主要用以进行光化学反应、热耗散及发出叶绿素荧光,三种途径互为竞争,此消彼长。胁迫可能引起植物光反应系统中的捕光

植物多光谱荧光成像系统UV紫外光激发多光谱成像技术

  UV紫外光激发多光谱荧光成像技术:长波段UV紫外光(320nm-400nm)对植物叶片激发,可以产生具有4个特征性波峰的荧光光谱,4个波峰的波长为蓝光440nm(F440)、绿光520nm(F520)、红光690nm(F690)和远红外740nm(F740),其中F440和F520统称为BGF,

膜片钳技术的应用进展(二)

2.3  实验的一般操作步骤     ①拉制微电极和充灌微电极;②将预先处理的实验标本置于显微镜载物台上的灌流槽内;③于显微镜低倍镜下,用微操纵器将电极移动到浴液上方,换用高倍镜按一 定标准选择合适的细胞,然后接近靶细胞或组织,完成电极与标本的封接;④给予钳位电压或电流等指令条件并分别记

Celigo成像分析技术在细胞杀伤中的应用(二)

这么好的方法当然需要一个强大的检测仪器来支撑 – Celigo成像细胞定量分析仪:● 明场+四色荧光● 全孔成像,图片清晰,适用于6-1536孔板● 定量分析全孔细胞数目● 软件自带流式设门分析功能● 高速同步成像和分析,15分钟内完成一块96孔板的免疫杀伤检测现在小编就以NK细胞的ADCC(抗体依

活体动物体内光学成像(九)

关于活体成像系统常见问题解答1. 关于小动物活体成像技术的起源与发展活体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cy5及Cy7等)进行标记。该技术最初是由美国斯坦福大学的科学家采用了世界上最优秀

活体动物体内光学成像(十)

3. 关于CCD的“背部薄化、背照射”与“冷”的确切含义是什么?之所以叫冷CCD,是由于CCD的芯片温度下降到零下70℃或110℃,可以降低噪音,提高检测的灵敏度。Cryogenic 的制冷技术可以使CCD的温度达到-70℃到 -110℃,那样的温度可以使背照射冷CCD的暗电流减少到可忽略不

活体动物体内光学成像(三)

(2) 免疫学与干细胞研究将荧光素酶标记的造血干细胞移植入脾及骨髓,可用于实时观测活体动物体内干细胞造血过程的早期事件及动力学变化。有研究表明,应用带有生物发光标记基因的小鼠淋巴细胞,检测放射及化学药物治疗的效果,寻找在肿瘤骨髓转移及抗肿瘤免疫治疗中复杂的细胞机制。应用可见光活体成像原理标记细胞,建

活体动物体内光学成像(五)

3. 底物荧光素(Luciferin)是如何进入小鼠体内的?需要多少? 荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。 大部分发表的文章中,荧光素的浓度是150mg/kg (见下图)。20克的小鼠需要3毫克的荧光素,价钱约两到三美元。常用方法是腹腔注射,扩散较慢

活体动物体内光学成像(六)

17. 标记好的细胞的荧光素酶是随机还是插入固定的位点? 插入的位点是随机的,但每一个构建好的细胞株我们都做过详细的分析,与其母细胞株进行详细的比较,证明荧光素酶的插入对细胞的各种特性(包括生长周期, 成瘤性等)没有造成影响。18. 能标记病毒吗?能标记病毒的某一个基因吗? 可以标记病毒,由于病毒在

活体动物体内光学成像(四)

3. 标记细菌(1) 细菌侵染研究可以用标记好的革兰氏阳性和阴性细菌侵染活体动物, 观测其在动物体内的繁殖部位、数量变化及对外界因素的反应。(2) 抗生素药物利用标记好的细菌在动物体内对药物的反应,医药公司和研究机构可用这种成像技术进行药物筛选和临床前动物实验研究。4. 基因表达和蛋白质相互作用(1

活体动物体内光学成像(七)

关于生物发光与荧光及其它技术的比较 34. 荧光检测与生物发光检测的优势与劣势比较如何?  荧光发光需要激发光,但生物体内很多物质在受到激发光激发后,也会发出荧光,产生的非特异性荧光会影响到检测灵敏度。特别是当发光细胞深藏于组织内部,则需要较高能量的激发光源,也就会产生很强的背景噪音。作为体内报告源

活体动物体内光学成像(一)

活体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cy5及Cy7等)进行标记。该技术最初是由美国斯坦福大学的科学家采用了世界上最优秀的高性能CCD研发与生产制造商Roper scientific公司最

活体动物体内光学成像(八)

关于技术应用42. 可以用荧光素酶基因标记干细胞吗?如何标记? 可以,标记干细胞有几种方法。一种是标记组成性表达的基因,做成转基因小鼠,干细胞就被标记了,从此小鼠的骨髓取出造血干细胞,移植到另外一只小鼠的骨髓内,可以用该技术示踪造血干细胞在体内的增殖和分化及迁徙到全身的过程。另外一种方法是用慢病

实验离心技术新进展(二)

1964~1966 年:Anderson 等开始建立转子区带离心技术并开发了低、高、超速区带转头 (MSE)。在此基础上,各种转速的连续流离心分离也逐渐被利用和完善。(8) 1959 年:干涉光学系统(Richard 等),吸收光学系统(Nichols,)等方法被用于分析超 离心技术。(9)(10)

药物分析新技术和进展(二)

1.以TLC,HPLC等分离制各为基础的分析方法这一类方法主要包括代谢物的分离,检测,纯品制备与结构鉴定几方面的工作.药物的分离检测,主要方法有柱色谱,TLL,Gc与叩凹 叩比常用于药物及其代谢产物的同时分离与检测.根据药物代谢的一般规律,代谢物的极性较原药大,所以在反相叩比系统中代谢物一般

如何利用免疫荧光技术检测某个蛋白质在体内的含量

  方法:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)检测77份肺癌以及140份不同年龄段正常人血清中自身抗体。提取人喉癌上皮细胞(Hep-2)蛋白抗原,采用蛋白质印迹法对81份肺癌患者及52份正常人血清进行分析。结果:肺癌组和对照组的...

有机双光子荧光染料在生物成像中的应用取得新进展

  传统的荧光分子多数会有聚集诱导淬灭效应(Aggregation Caused Quenching, ACQ),限制了其应用。聚集诱导发光(Aggregation Induced Emission, AIE)荧光分子不同于传统的荧光分子,在聚集的条件下产生荧光,具有生物相容性好、背景荧光较低等特点

有机双光子荧光染料在生物成像中的应用取得新进展

  传统的荧光分子多数会有聚集诱导淬灭效应(Aggregation Caused Quenching, ACQ),限制了其应用。聚集诱导发光(Aggregation Induced Emission, AIE)荧光分子不同于传统的荧光分子,在聚集的条件下产生荧光,具有生物相容性好、背景荧光较低等特点

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(二)

图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。(a)示意图,用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。(b)COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记(绿色),溶酶体用lysosometracker(红色)标记。(c)对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦

荧光化学发光凝胶成像系统的技术参数

  1、CCD检测器:分辨率达1600 x 1200,200万像素科研级CCD,数据输出为16Bit,半导体制冷.绝对-28°C.不受环境温度影响。量子效率(峰值&425m处):56% & 50%,像素合成1x1至8x8。  2、F1.2高透光度全自动变焦镜头12.5-75mm,加配F0.95化学发

化学所在光学探针与活体荧光成像分析方面取得新进展

  性能优良的光学探针是构建高灵敏度、高时空分辨能力的光学传感与活体成像分析方法的物质基础,其发展一直受到人们的关注。中国科学院化学研究所活体分析化学实验室马会民课题组长期从事该方面的研究,并取得了一系列的成果 (Angew. Chem. Int. Ed., 2012, 51, 6432; Anal

化学所在超高分辨荧光成像应用研究方面取得系列进展

  超高分辨率荧光显微镜是近年来兴起的新技术,它可以超越远场光学显微镜的分辨率极限,即阿贝极限(200纳米左右),直接检测到几十纳米的精细结构。与能达到相同或更高分辨率的X光显微镜、各类电子显微镜及原子力显微镜相比,超高分辨荧光成像的优势是在常温常压和基本不损伤生物样本活性的条件下,获得其纳米尺度的

化学所新型光学探针与活体荧光成像分析研究获进展

  性能优良的光学探针是构建光学传感与活体成像分析方法的物质基础,其发展一直受到人们的关注。中国科学院化学研究所活体分析化学实验室课题组长期从事该方面的研究,并取得了一系列的成果 (Angew. Chem. Int. Ed., 2012, 51, 6432; Chem. Commun., 2013,

新成像技术“透视”晶体内部结构,为开发新光子材料开辟新路

新技术使科学家能够看到构成胶体晶体的每个粒子并创建动态三维模型。图片来源:美国纽约大学  美国纽约大学研究人员开发了一项创新技术。该技术使人能够以前所未有的方式窥视晶体结构,仿佛赋予人眼X射线般的超能力。这项名为“晶莹剔透法”的新技术,将透明粒子、显微镜与激光技术相结合,使科学家能够看到构成晶体的每

PerkinElmer-活体荧光成像:全新生物相容性分析技术!

  我们最新的出版附注中介绍了麻省理工学院研究人员近期的一篇论文。了解科学家如何使用 PerkinElmer 的活体荧光成像探针,快速且无创伤性的验证生物材料的活体生物相容性并进行准确定量。  阅读全文    

新技术实现溶酶体功能超分辨荧光成像“精准定量”

近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员徐兆超团队发展双色单分子闪烁比率成像技术(2C-SMBR),在单溶酶体水平同步实现纳米级结构成像与腔内pH准确定量。相关成果发表在《德国应用化学》。溶酶体作为细胞的“化工厂”与“信号枢纽”,其功能高度依赖于腔内pH的精确调控。传统观点认为,溶酶体是均质的酸性细

FluorCam多光谱荧光成像技术应用案例——植物干旱响应表...

FluorCam多光谱荧光成像技术应用案例——植物干旱响应表型研究植物对干旱的响应过程非常复杂,同时植物也有多样的应答机制来回避和耐受干旱胁迫并维持生长。光合系统被认为是对干旱极为敏感的,因此FluorCam叶绿素荧光成像系统从问世起就被广泛应用于植物干旱胁迫的研究。美国怀俄明大学将芜菁Brassi

FluorCam多光谱荧光成像技术应用案例——藻类病害表型研究

2019年中国海洋大学装备了国内首套海洋生物表型组学光学成像分析系统,这一系统包含以下子系统:lFKM多光谱荧光动态显微成像系统lFluorCam多光谱荧光成像系统lFluorCam叶绿素荧光成像系统lSpecim IQ 高光谱成像仪lMC1000 8通道藻类培养监测系统             

FluorCam叶绿素荧光成像技术应用案例土壤污染与土壤...

FluorCam叶绿素荧光成像技术应用案例--土壤污染与土壤修复检测评价土壤是人类赖以生存的基础,土壤环境直接影响到农产品质量与粮食安全、生态安全和人居环境安全。如何检测和评估土壤污染,并对土壤修复进行监测评估,具有特别重要的现实意义。植物包括藻类是土壤污染的直接“感知者”,FluorCam叶绿素荧