单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液TBE 电泳缓冲液限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶人类基因组 DNA正向引物和反向引物[a-32P]dCTP丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸胺甘油TEMED仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 沸水浴电泳板、破璃和 0.4 mm 隔条干胶设备玻璃毛细管 Hamilton 注射器微量离心管可调式移液器热循环仪水浴Whatman3 MM 滤纸实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的成分请参阅附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。10x 扩增缓冲液含 4 种 dNTP, 每种浓度为1mml/L(PH7.0) 的 dNTP 混合溶液(PCR 级)甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液(缓冲液类型 I)10XTBE 电泳缓冲液用 1X 工作强度的 TBE(89 mmol/L Tris-硼酸盐,2 mmol/L EDTA) 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。1xTBE 浓度能提......阅读全文

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液TBE 电泳缓冲液限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶人类基因组 DNA正向引物和反向引物[a-32P]dCTP丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸胺甘油TEMED仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 沸水浴电泳板、破璃和 0.4 mm 隔

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液TBE 电泳缓冲液限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶人类基因组 DNA正向引物和反向引物[a-32P]dCTP丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸胺甘油TEMED 仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 沸水浴电泳板、

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

险测突变的目的主要是为弄懂人类遗传性疾病的分子机制,以便有效的针对这些疾病进行预防、诊断和治疗,但更多的是用于分析不同生物体基因型与表型之间的关联。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

            试剂、试剂盒 扩增缓冲液 dNTP 混合溶液 甲酰胺上样缓冲液 蔗糖凝胶缓冲液 TBE 电泳缓冲液 限制性内切酶 热稳定 D

通过单链构象多态性分析检测基因突变实验

实验材料人类基因组 DNA试剂、试剂盒矿物油PCR引物A和B多核苷酸激酶和10 X 缓冲液4dNTP 混合液Tag DNA 聚合酶10 X PCR 扩增缓冲液低胶凝 溶点琼脂糖二甲基二氯硅烷丙烯酰胺原溶液10 X TBE 缓冲液过硫酸铵EDTA2 X 甲酰胺加载缓冲液仪器、耗材水浴锅循环变温加热器D

异源双链分析的方法和应用

中文名称异源双链分析英文名称heteroduplex analysis;HA定  义一种测定基因突变的方法。即依据野生型和突变型DNA分子经加热变性和复性后产生异源双链,在非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳,同源双链和异源双链的泳动性不同。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

单链构象多态性

单链构象多态性(signle strand conformation polymorphism,SSCP)是指单链DNA由于碱基序列的不同可引起构象差异,这种差异将造成相同或相近长度的单链DNA电泳迁移率不同,从而可用于DNA中单个碱基的替代、微小的缺失或手稿的检测。用SSCP法检查基因突变时,通常

单链构象多态性的实验步骤

利用PCR从提取出的DNA中扩增16S rRNA基因。利用λ-外切核酸酶消化掉一条链(其中一个PCR引物被磷酸化,这条链将被去除)。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。

单链构象多态性的实验步骤

利用PCR从提取出的DNA中扩增16S rRNA基因。利用λ-外切核酸酶消化掉一条链(其中一个PCR引物被磷酸化,这条链将被去除)。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。

单链构象多态性简介

  单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的

异源双链分析的定义和应用

中文名称异源双链分析英文名称heteroduplex analysis;HA定  义一种测定基因突变的方法。即依据野生型和突变型DNA分子经加热变性和复性后产生异源双链,在非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳,同源双链和异源双链的泳动性不同。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

异源双链分析的原理和特点

中文名称异源双链分析英文名称heteroduplex analysis;HA定  义一种测定基因突变的方法。即依据野生型和突变型DNA分子经加热变性和复性后产生异源双链,在非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳,同源双链和异源双链的泳动性不同。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

PCR单链构象多态性分析

  PCR -单链构象多态性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR -SSCP 技术凭借突变可引起单链DNA三级构象改变,通过观察单链DNA在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率漂移

异源双链分析的概念

中文名称异源双链分析英文名称heteroduplex analysis;HA定  义一种测定基因突变的方法。即依据野生型和突变型DNA分子经加热变性和复性后产生异源双链,在非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳,同源双链和异源双链的泳动性不同。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

单链构象多态性的原理

单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中的迁

单链构象多态性的原理

单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中的迁

单链构象多态性的应用

单链构象多态性可用于预筛选克隆文库。可对其中的某一个条带进行测序,并与数据库中已知序列比对。

单链构象多态性的结构特点和作用

单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的,当

单链构象多态性分析(SSCP)技术

SSCP是一种简便快速的检测DNA或cDNA突变的技术。        其技术原理和过程是:将PCR扩增到的待测DNA或cDNA片段变性,成为单链DNA,在一定条件下,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳将单链DNA变性。        由于单链DNA的空间构象与分子内碱基组成密切相关,一个碱基的差异即可形成不同

单链构象多态性的应用介绍

单链构象多态性可用于预筛选克隆文库。可对其中的某一个条带进行测序,并与数据库中已知序列比对。

单链构象多态性的原理简介

  单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中

分子生物学技术的分类

目前,常用的分子生物学技术有如下几种 : PCR- 单链构象多态性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR- SSCP 技术凭借突变可引起单链DNA三级构象改变,通过观察单链DN

分子生物学技术的分类

  目前,常用的分子生物学技术有如下几种[1]:  PCR单链构象多态性分析  PCR-单链构象多态性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR -SSCP 技术凭借突变可引起单链

P53基因缺失怎么回事

  基因突变的研已成为当今生命科学研究的热点之一,检测方法也随之迅速发展。人类细胞癌基因的突变类型已如上所述,对于基因突变的检测,1985以前,利用Southern印迹法,可以筛选出基因的缺失、插入和移码重组等突变形式。对于用该法法不能检测的突变,只能应用复杂费时的DNA序列测定分析法。多聚酶链反应

单链构象多态性的结构及应用

单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的,当

关于单链构象多态性的原理介绍

  单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中

单链构象多态性的原理及应用

单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism, SSCP)是一种分离核酸的技术,可以分离相同长度但序列不同的核酸(性质类似于DGGE和TGGE,但方法不同)。原理单链构象多态性(Single-strand conformation polymorph

分子生态学单链构象多态性

单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的,当

关于单链构象多态性的基本介绍

  单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的

毛细管电泳法分析单链构象多态性实验

基本方案1 毛细管电泳的样品准备 基本方案2 应用 ABI 310基因分析仪的自动化毛细管电泳 基本方案3 应用ABI PRISM 3100基因分析仪的自动化毛细管芯片电泳