痘苗DNA检测实验

实验方法原理 实验材料 贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒 PBS胰酶/EDTA干冰/乙醇DNA 提取缓冲液乙酸钠乙醇PCR 扩增缓冲液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培养基完全 MEM-10/BrdU 培养基筛选试剂4 dNTP 混合物MgCl2仪器、耗材 24 孔组织培养板杯状超声仪实验步骤 实验试剂准备详见「其他」。1. 吸出汇片生长单层细胞的培养基。1.1 对于 XGPRT 筛选,用 BS-C-1 细胞。1.2 对于 TK 筛选,用 HuTK-143B 细胞。2. 用 37℃ 的 PBS 或胰酶/EDTA 洗细胞 1 次,以除去剩余血清。3. 用刚好覆盖单层细胞、37℃ 的胰酶/EDTA(对于 150 cm2 培养瓶需要 1.5 ml)覆盖细胞。消化 30 s (细胞应该分开),晃动培养瓶使细胞完全分开。4. 加入 8.5 ml 适当培养基。......阅读全文

Phage-DNA

IntroductionThe phage lysate from the plate contains bacterial DNA and RNA, as well as phage DNA encased in the phage coat. The following procedure, d

electrophoresis-of-DNA

Agarose Gel Electroporesis of DNA Making the gel: 1.  Place casting platform with well former sideways in gel stand where you wish to  pour 

DNA重组

目的:简单介绍了DNA重组技术的一些方法。包括重组质粒、PCR等。包括细胞结构、DNA,DNA如何改点等。

DNA转染

DNA转染·         Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)·         Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents (PDF)

DNA克隆

DNA克隆(主要内容如下)·         General Procedure·         PCR Cloning·         Subcloning·         ET Cloning·         Vector Preparation·         Ligation Re

DNA转化

DNA转化Chemical Transformation·         Transformation of Competent Cells (RbCl2 Method) (Goldberg Lab)Very nice protocol for E. Coli transformation inc

DNA测序

                自动测序法 双脱氧链末端终止法 非同位素银染 鸟枪法 Maxam-Gilbert化学修饰法             实验方法

DNA电泳

DNA电泳(主要内容如下)  Preparation of Agarose Gel and Electrophoresis  Extraction of DNA From Agarose Gel  Extraction of DNA from Acrylamide Gels  DNA Marker 

DNA测序

DNA测序(主要内容如下)·         Sequencing Gel Preparation·         Preparation of Templates ·         DNA Sequencing by the Dideoxy Method·         DNA Sequen

DNA测序

实验方法原理 ABI  PRISM 310型基因分析仪(即DNA测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法),因此通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DN

DNA定量

Characterization of dnaLEVEL IMaterialsDNA sampleSSC bufferUV spectrophotometer 3 and quartz cuvettesProcedureDissolve a small quantity of your extrac

DNA-Laddering

I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace

DNA-Electrophoresis

What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively

DNA标记

DNA标记(主要内容如下)  DNA Labeling by Nick Translation  Random Primed Labeling  End-Labeling  Purification of Labeled DNA  Non-isotopic Labeling  OthersDNA L

DNA指纹图谱分析[DNA-Fingerprinting-]

一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的

DNA凝胶电泳(DNA-agarose-gel-electrophoresis)

实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分

我自主知识产权艾滋病疫苗计划取得阶段性进展

  在5月11日上海举行的第五次中国科协论坛中国艾滋病疫苗高层论坛上,中国疾病预防控制中心艾滋病首席专家、中国艾滋病疫苗联盟执行委员会主席邵一鸣透露,在国家科技重大专项支持下,我国自主知识产权的艾滋病疫苗计划取得阶段性进展。   邵一鸣介绍,由10余家研究所、高校和疫苗企业组成的团

Quick-Yeast-DNA-Prep:-Isolation-of-Total-DNA-(genomic-and-plasmid)

Grow a 5 ml YPD O/N culture inoculated with a single yeast colony at 30 deg. Transfer culture to a small 13 x 100 glass tube. Spin down cells 2

高变区DNA与DNA指纹的关系

人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段(10bp 左右)多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后,用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ,然后将样品进行

可以DNA结合的酶DNA连接酶

DNA连接酶:是能够使用来自ATP或NAD的化学能将先前切割或断裂的DNA链聚集在一起的酶。连接酶在DNA滞后链复制中特别重要,因为它们将冈崎碎片组合成DNA链。连接酶在DNA修复和基因重组中也发挥重要作用。

循环肿瘤DNA比循环正常DNA矮半截

  如今,人们开始利用液体活检技术来诊断癌症,以及监测治疗效果,不过灵敏度是个问题。美国犹他州大学和华盛顿大学的研究人员近日在《PLOS Genetics》上发表文章,称来源于肿瘤的DNA片段比来源于正常细胞的片段要短,这个特征可用于改善液体活检。  犹他州大学的Hunter Underhill及其

A型DNA与B型DNA的结构差异

A型DNA与B型DNA是在两种环境下同种物质不同的形式。B型DNA:92%RH,钠盐,溶液和细胞中天然状态中的DNA多以此状态存在A型DNA:75%RH,钠盐A型DNA也是由反向的两条多核苷酸链组成的双螺旋,为右手螺旋,但螺旋体较宽而短,碱基与中心轴之倾角也不同,呈19度。

DNA的酶切与连接——DNA片段连接

实验方法原理核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。实验材料λDNA EcoT14I:由11条DNA片段组成试剂、试剂盒T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖仪器、耗材电泳仪 水浴锅 移液器 微波

DNA-isolation-extraction

CTAB TECHNIQUE / Method / Schedule / Protocol FOR DNA ISOLATION / DNA EXTRACTION FROM PLANT LEAF / LEAVES SAMPLES (see also DNA RNA double isolati

Gel-Electrophoresis-of-DNA

What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab

Chromosomal-DNA-Isolation

Chromosomal DNA Isolation METHOD: Grow cells in 2-5 ml broth to late log phase. Pellet 1-2 ml cells in microfuge. Resuspend cells in 400

Cosmid-DNA-Isolation

实验概要 Isolation of high yields of highly pure cosmid DNA using PureLink™ HiPure Plasmid Purification Kits. 实验原理 The  PureLink™ HiPure Plasmid Purif

DNA-mobility-in-gels

1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC)   3.5  100 460   5.0

DNA作图实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液仪器、耗材 电泳仪实验步骤   用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2.  从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。3.  比较分子量标准估算出DNA片段的长度,推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。4. 

DEPHOSPHORYLATION-OF-LINEARIZED-DNA

DEPHOSPHORYLATION OF LINEARIZED DNAALKALINE PHOSPATASE(CIP) DIGESTIONDigestion of protruding 5'-ends1. Precipitate digested DNA and resuspend in a