DNA电泳(agarose胶)

实验材料 DNA样品试剂、试剂盒 琼脂糖 电泳缓冲液溴化乙锭 上样缓冲液仪器、耗材 电泳仪电泳漕 透射紫外灯 胶带纸 紫外成像仪......阅读全文

不接触染料也能进行DNA电泳的分析

 问:您是否为EB有毒,安全染料贵的问题而烦恼?答:试试李记生物的DNA电泳套装吧 !图1:I、Hela细胞与EB,李记套装的上样buffer及李记GelRed在室温下孵育一小时,用Olympus荧光显微镜观察并拍照,与EB孵育的细胞显示出绿色荧光,表明染料已透过细胞膜进入细胞并与核酸结合。李记套装

植物DNA的提取及凝胶电泳分析

实验概要利用基因组DNA较长的特性,可以将其余细胞器或质粒等小分子DNA分离。当加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团漂浮其中,可用玻璃棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部,从而达到分离提取的目的。分离基因组DNA应尽量在温和的条件下操作。琼脂糖或聚

DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术

核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一,目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系统,磁珠法由于操作简便、快速,能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化,因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN

琼脂糖凝胶电泳怎么检测DNA质量

如果DNA出现降解或者是混有其他杂质,例如蛋白质、RNA的话,那么琼脂糖凝胶就能够检测得到DNA的质量。标准主要是通过观察电泳条带的亮度,通过亮度就可以粗略地计算出DNA条带的含量。如果DNA出现损失,对应的条带就会变暗或者是消失。线性的单一DNA样品一般是单条带,质粒的话可能会有2-3条带.如果条

dna琼脂糖凝胶电泳条带分析

酶切时所加的DNA 溶液体积不能太大,否则DNA 溶液中其他成分会干扰酶反应。酶活力通常用酶单位(U)表示,酶单位的定义是在最适反应条件下,1 小时完全降解1 mg λDNA 的酶量为一个单位,但是许多实验制备的DNA 不象λDNA 那样易于降解,需适当增加酶的使用量。反应液中加入过量的酶是不合适的

DNA电泳时没有条带是怎么回事

根据您提供的信息,我为您查询到,出现这种情况的原因是比较多的,比如1.样品中没有dna,或者dna太少,或者dna已经降解。2.dna较小而电泳时间太长,导致dna跑了出去。3.dna太大,还在加样孔附近,甚至还没有跑到胶里。这个就是具体的信息啦亲。

质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定实验

实验材料琼脂糖试剂、试剂盒溴化乙锭仪器、耗材琼脂糖凝胶电泳装置紫外灯实验步骤1.  琼脂糖凝胶电泳装置 由于琼脂糖凝胶电泳既要求不高,而适应性又强,在过去15年里已成功地设计了形形色色及大大小小的电泳槽。对这些装置的选择主要是依据个人的喜恶。使用最普遍的装置是Walter Schaffner发明的水

琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分

水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

实验目的   学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。 实验原理   闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DN

DNA测序技术预电泳的注意和样品的制备

  [注意]  (1). 用鲨鱼齿梳制作加样孔时,应注意将齿尖插入胶中0.5mm左右,千万注意不能使加样孔渗漏,否则得不到正确的结果。  (2). 应时刻注意上面电泳槽中的缓冲液是否渗漏,否则极易造成短路而损坏电泳仪。  样品的制备  当在预电泳时,即可进行样品的制备,将反应完毕的样品在沸水浴中加热

DNA测序技术的预电泳的相关内容

  (1)当凝胶聚合完全后,拨出鲨鱼齿梳,将该梳子反过来,把有齿的一头插入凝胶中,形成加样孔。  (2)立即将胶板固定在测序凝胶槽中,一般测序凝胶槽的上下槽是分开的,因而只有在固定好凝胶板后,方能加入TBE缓冲液。  (3)稀释10×TBE缓冲液至1×TBE,将该缓冲液加入上下二个电泳槽中,去除产生

变性梯度凝胶电泳不同的双链DNA-片段

  不同的双链DNA 片段因为其序列组成不一样,所以其解链区域及各解链区域的解链浓度也是不一样的。当它们进行DGGE时,一开始变性剂浓度比较小,不能使双链DNA 片段最低的解链区域解链,此时DNA 片段的迁移行为和在一般的聚丙烯酰胺凝胶中一样。然而,一旦变性剂浓度达到DNA 片段最高的解链区域温度时

DNA琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)分析

一、原理琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在一定条件下,DNA的迁移

质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测

质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测             实验方法原理 1、碱变性法提取质粒DNA:细菌培养物加入SDS和NaOH碱性溶液处理后,菌体裂解,可使细菌的质粒DNA、染

电泳如何在DNA和蛋白质上起作用

电泳在具有静态pH的缓冲溶液中进行。电场施加到包含正端和负端的电泳室。如果被电泳物质的pH值低于周围缓冲液,则会向正极迁移。如果该物质的pH值高于周围的缓冲液,则会向负极迁移。物质以两种不同的速率迁移:粒径和总体电荷。迁移物质的pH值与周围缓冲液的pH值之间的差异越大,物质越能通过凝胶迁移。大分子由

DNA琼脂糖凝胶电泳法需注意哪些

琼脂糖电泳的话,什么试剂、样本之类的准备肯定是前提了……关键在样本是不是很好的沉在胶孔中,点样有没有点好……电流电压有没有控制好……差不多之类的……

质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测

质粒(Plasmid)是细菌染色体外能自身独立复制的双股环状DNA。带有遗传信息,可赋予细菌某些新的表型。分离和纯化质粒DNA的方法很多,但这些方法基本包括三个步骤:即(1)细菌的培养和质粒DNA的扩增;(2)细菌菌体的裂解;(3)质粒DNA的提取与纯化。实验方法原理1、碱变性法提取质粒DNA:细菌

琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分

水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

实验概要学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒 DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDN

DNA电泳图,条带亮度一样说明什么

DNA的长度和条带的位置有关,DNA量和亮度有关。基本上讲,条带亮度一样,DNA的量差别不会很大。

琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分

水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

实验目的学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒 DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDN

DNA双链断裂检测——变压场凝胶电泳(GFGE)

DNA双链断裂与细胞死亡的关系更为密切。变压场凝胶电泳是采用将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中,通过蛋白酶、去污剂等渗入凝胶中融解细胞、去蛋白,纯化细胞DNA,再通过梯增电压进行琼脂糖凝胶电泳,结合DNA解旋荧光测定(FADU)法和检测DNA双链断裂。 1、主要试剂及配制方法: (1)蛋白酶K,

DNA电泳条带怎么分析?这篇文章告诉你

一、微笑形区带(两边翘起,中间凹下):   形成原因:主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的,多出现于较厚的凝胶中。   处理办法:待其充分凝固再做实验。  二、皱眉形区带(两边向下,中间鼓起):   形成原因:主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净引起的。   处理办

单细胞凝胶电泳法检测单细胞DNA损伤

单细胞凝胶电泳(single-cell gel eiectrophoresis,SCGE)又称慧星试验(comet assay)是一项较新的电泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于检验DNA单链断裂以来,经过不断的改进,已成为一种快速、灵敏、简便的检测DNA损伤的方法,广泛地应用

琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)检测DNA

原理: 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DNA呈现超螺旋的共

DNA琼脂糖凝胶电泳图如何分析

第一张图感觉没什么意义,因为没有marker。第二张图只要看看你的条带与marker相同位置的条带大小是多少,就可以判定你的条带大小是多少。至于条带的亮度,在某种程度上也可以指示你的DNA浓度如何,条带越亮浓度越高

质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测

实验材料 E.coliJM109E.coliRRI试剂、试剂盒 TE缓冲液KAc溶液葡萄糖Tris.HclLB液体培养基仪器、耗材 离心机EP管恒温培养箱凝胶槽电泳仪

水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理:闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDNA)。实

DNA电泳条带怎么分析?这篇文章告诉你

  一、微笑形区带(两边翘起,中间凹下):   形成原因:主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的,多出现于较厚的凝胶中。   处理办法:待其充分凝固再做实验。  二、皱眉形区带(两边向下,中间鼓起):   形成原因:主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净引起的。   处