FDDPCR实验

试剂、试剂盒 cDNA矿物油仪器、耗材 热循环仪薄壁 PCR 管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂矿物油(可选)2. 核酸和寡核苷酸来自方案 3 的 cDNA3. 专用设备热循环仪 [推荐使用 GeneAmpPCRSystem9600(Perkin-Elmer),或者 Mastercyder(EppendorfScientific)]0.2 ml 薄壁 PCR 管4. 附加试剂RNAspectraFluorescentmRNA 差异显示系统(GenHunterF501~F510&R501-R510),包括蒸馏水、10XPCR 缓冲液(100mmol/LTris-HCl、pH8.4,500 mmol/LKC1,15 mmol/LMgCl2,0.01% 明胶)、FDDdNTP 混合液(2.5 mmol/L)、荧光锚定引物(FH-TUM)(2umol/L) 以及任意引物(H-AP)(2umol/L)二、......阅读全文

FDDPCR-实验

本方案设计为 24 个 PCR 反应,使用 3 种 cDNA 亚群(利用方案 3 中的 H-T11M 引物进行 RT 反应),引物为荧光染料标记的锚定引物(FH-T11M) 与 24 种上游任意引物 (HAP) 的组合。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒cDN

FDDPCR-实验

试剂、试剂盒 cDNA矿物油仪器、耗材 热循环仪薄壁 PCR 管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂矿物油(可选)2. 核酸和寡核苷酸来自方案 3 的 cDNA3. 专用设备热循环仪 [推荐使用 GeneAmpPCRSystem9600(Perkin-Elmer),或者 Mastercyder

FDDPCR-实验

            试剂、试剂盒 cDNA 矿物油 仪器、耗材 热循环仪 薄壁 PCR 管

江苏大学生科院发表传染病毒新综述

  家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)病是世界养蚕业一种重大的传染疾病, 该病引起的蚕茧损失占蚕病引起损失总数的60%以上, 长期以来对这种病毒病的防治还没有很好的解决方法。 各国研究人员在寻找抗性基因、阐述抗性机制以及通过传统育种或

实验动物实验标本的采集实验

(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。②眼眶后静脉丛采血:一手拇指及食指抓住鼠两耳之

实验室实验器材使用实验

1、了解化学试剂的等级和保管原则2、掌握玻璃器械的规范使用3、明确各玻璃器械的功用试剂、试剂盒纯水仪器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平温度什移液瓶实验步骤一、实验材料:不同等级的化学试剂 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 无分度两标线管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、实验步骤:1. 根据试剂瓶上的

实验室实验器材使用实验

试剂、试剂盒 纯水仪器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平温度什 移液瓶实验步骤 一、实验材料:不同等级的化学试剂 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 无分度两标线管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、实验步骤:1. 根据试剂瓶上的标志说明该试剂的等级及保管方法2,玻璃量器的使用:按照玻璃量器上的标

实验动物实验标本的采集实验——实验动物脑脊液采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 狗、兔脑脊液的采集:通常采取脊髓穿刺法,穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物麻醉后侧卧位固定,头尾部尽量弯向腰部,去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮肤,腰穿针垂直刺入,当有落空感及动物的后肢跳动时,针已达椎管内,抽去针芯,即

实验动物实验标本的采集实验——实验动物尿液采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒水仪器、耗材收集器实验步骤尿液的采集 常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量的水。(1) 代谢笼法:此法较常用,适用于大、小鼠。将动物放在特制的笼内。一般需收集 5 小时以上的尿液,最后取平均值。(2) 导尿法:常用于雄性兔、狗。动物轻度麻醉后,固定于手术台上

实验动物实验标本的采集实验——实验动物腹水的采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤抽取大鼠、小鼠的腹水时,抓取固定动物,使动物腹部朝上,消毒皮肤,针头在腹股沟和腹中线之间刺人腹腔,腹压高时腹水自然流出,腹水少时可用注射器抽取。

杂交实验的实验目的

了解用聚乙二醇PEG方法诱异同种植物原生质体融合的技术,并能根据新本原生质体的形态樗来鉴别杂种细胞。

实验动物标记实验

实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)

细胞划痕实验实验步骤

一.准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)二.流程:1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过一夜能铺

实验动物标记实验

实验材料兔子 小鼠试剂、试剂盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)。标记的原则是

杂交实验的实验原理

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。

杂交实验的实验材料仪器

1.实验材料:烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2.试剂2.1酶液及洗涤液,同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。

杂交实验的实验结果分析

1.在倒置显微镜下观察异源融合。在培养3天以内,可根据双新原生质体的形态特征来鉴别异核体。因为来自叶肉组织的原生质体具有明显绿色叶绿粒,而来自培养细胞的原生质体无色,但具浓密原生质丝,并可看到显示的核区。2.统计异源融合的频率

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

杂交实验的实验方法

所有操作均在超净工作台上进行。1.原生质体的分离和收集。2.将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生质体密度调整为2×105/ml左右(用血细胞计数板统计原生质体密度)。3.将两种原生质体悬液等量混合。4.用刻度吸管将混合的原生质体悬

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

PCR实验如实预防实验污染

进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,zui大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。1.划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

细胞转染实验的实验步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,

细胞计数实验——细胞计数实验

实验方法原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞牛长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不易

PCR实验如实预防实验污染

进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本处理区,

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

MTT实验原理和实验步骤

MTT原理:MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formaza

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为