免疫复合物方法检测酪氨酸蛋白激酶
基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液(新鲜配置并于冰上保存)含蛋白酶抑制剂的 5 X 裂 解 液(细胞活化用,新鲜配制并于冰上保存)考马斯蛋白检测试剂(Pierce) 或类似试剂多克隆或单克隆的兔抗 src-相 关 T P K 抗 血 清(U B I 、 Oncogene Science 或 SantaCruz Biotechnology)对 照 血 清(Sigma) : 正 常 的 兔 血 清(如使用多克隆抗血清),或 同 型 IgG (如使用单克隆抗血清)Pansorbin ( 1 0 % 福 尔 马 林 固 定 的 金 色 葡 萄 球 菌 ; Calbiochem) , 或 蛋 白 A /蛋白......阅读全文
免疫复合物方法检测酪氨酸蛋白激酶
基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液(新鲜配置并于冰上保存)含蛋白
循环免疫复合物检测的方法?
CIC的检测方法大致可分为两类,即抗原特异性与抗原非特异性方法。前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原,选择性测定含有某种特定抗原的IC。在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中,可应用此类方法。所以根据你的情况再采取有些合理进一步确诊检查。
循环免疫复合物(CIC)的检测方法
循环免疫复合物(CIC)的检测方法大致可分为两类,即抗原特异性方法和抗原非特异性方法。前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原,选择性测定含有某种特定抗原的IC。在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中,可应用此类方法。抗原非特异方法,则不考虑形成IC抗原的性质,根据免疫球蛋白分子在结合抗原以后发
免疫复合物的检测
免疫复合物在体内存在有两种方式,一是存在于血液中的循环免疫复合物(CIC),一是组织中固定的免疫复合物。免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。在大多数情况下,免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂,所以抗原特异性方法并不常用。一、循环免疫复合物的检测根据免疫复合物的物理学、免
酪氨酸蛋白激酶的简介
蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)是一类催化ATP上γ-磷酸转移到蛋白酪氨酸残基上的激酶,能催化多种底物蛋白质酪氨酸残基磷酸化,在细胞生长、增殖、分化中具有重要作用。迄今发现的蛋白酪氨酸激酶中多数是属于致癌RNA病毒的癌基因产物,也可由脊椎动物的原癌基因产。
非受体酪氨酸蛋白激酶途径
此途径的共同特征是受体本身不具有TPK活性,配体主要是激素和细胞因子。其调节机制差别很大。如配体与受体结合使受体二聚化后,可通过G蛋白介导激活PLC-β或与胞浆内磷酸化的TPK结合激活PLC-γ,进而引发细胞信号转导级联反应。
非受体酪氨酸蛋白激酶途径
此途径的共同特征是受体本身不具有TPK活性,配体主要是激素和细胞因子。其调节机制差别很大。如配体与受体结合使受体二聚化后,可通过G蛋白介导激活PLC-β或与胞浆内磷酸化的TPK结合激活PLC-γ,进而引发细胞信号转导级联反应。
关于酪氨酸蛋白激酶的作用介绍
PTK的活化是启动DNA合成和细胞增殖中多细胞反应的关键信号,不少反转录病毒致癌基因的编码蛋白以及多种生长因子跨膜受体的胞内部分都有PTK活性,受体PTK不但参与激素和生长因子等胞外信息的传递,还和细胞的恶变和增殖有关。因此,PTK在肿瘤的发生、发展过程中有着极其重要的作用。 因此酪氨酸蛋白激
非受体酪氨酸蛋白激酶途径简介
此途径的共同特征是受体本身不具有TPK活性,配体主要是激素和细胞因子。其调节机制差别很大。如配体与受体结合使受体二聚化后,可通过G蛋白介导激活PLC-β或与胞浆内磷酸化的TPK结合激活PLC-γ,进而引发细胞信号转导级联反应。
酪氨酸蛋白激酶的结构及作用
酪氨酸蛋白激酶Lyn是人类中由LYN基因编码的蛋白质。 Lyn是Src蛋白酪氨酸激酶家族的成员,该蛋白酪氨酸激酶主要在造血细胞,神经组织肝脏和脂肪组织中表达。在各种造血细胞中,Lyn已成为参与细胞活化调节的关键酶。 在这些细胞中,少量LYN与细胞表面受体蛋白相关,包括B细胞抗原受体(BCR),CD4
受体酪氨酸蛋白激酶(RTPK)信号转导途径
受体酪氨酸蛋白激酶超家族的共同特征是受体本身具有酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,配体主要为生长因子。RTPK途径与细胞增殖肥大和肿瘤的发生关系密切。配体与受体胞外区结合后,受体发生二聚化后自身具备(TPK)活性并催化胞内区酪氨酸残基自身磷酸化。RTPK的下游信号转导通过多种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的级
受体酪氨酸蛋白激酶(RTPK)信号转导途径
受体酪氨酸蛋白激酶超家族的共同特征是受体本身具有酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,配体主要为生长因子。RTPK途径与细胞增殖肥大和肿瘤的发生关系密切。配体与受体胞外区结合后,受体发生二聚化后自身具备(TPK)活性并催化胞内区酪氨酸残基自身磷酸化。RTPK的下游信号转导通过多种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的级
酪氨酸蛋白激酶6的结构特点和生理作用
酪氨酸蛋白激酶6是人类中由PTK6基因编码的酶。 酪氨酸蛋白激酶6(也称为乳腺肿瘤激酶,Brk)是细胞质非受体蛋白激酶,其可以作为上皮组织中的细胞内信号转导物。 已显示编码的蛋白质经历自磷酸化。
简述受体酪氨酸蛋白激酶(RTPK)信号转导途径
受体酪氨酸蛋白激酶超家族的共同特征是受体本身具有酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,配体主要为生长因子。RTPK途径与细胞增殖肥大和肿瘤的发生关系密切。配体与受体胞外区结合后,受体发生二聚化后自身具备(TPK)活性并催化胞内区酪氨酸残基自身磷酸化。RTPK的下游信号转导通过多种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶
免疫复合物的纯化
实验概要本实验介绍了免疫复合物纯化的基本操作步骤。主要试剂裂解缓冲液抗体蛋白A或蛋白G微球(用含0.02%叠氮钠裂解缓冲液配成10%(V/V)的混悬液,4℃保存)不含DTT的Laemmli样品缓冲液(2%SDS、10%甘油、60mmol/LTris,pH6.8和0.02%溴酚蓝)1mol/LDTT(
免疫复合物的简介
免疫复合物是抗体与抗原结合所得到的一种复合物,是由各种免疫细胞、吞噬细菌,病毒,致敏物质共同死亡后结合而形成的,所以又称抗原--抗体复合物。 它在正常情况下,小分子可溶性免疫复合物被肾小球滤过排出,大分子不溶免疫复合物被巨噬细胞吞噬消灭,这是机体防御机制的一部分。但在某些情况下,抗原与抗体在体
关于可溶性免疫分子测定—循环免疫复合物检测的介绍
循环免疫复合物检测,正常情况下形成的免疫复合物能为机体的防御系统所清除。在一定条件下,可溶性免疫复合物不能为机体所清除而随血流在身体的某些部位,特别在血管壁和组织内沉积下来,激活补体而导致免疫复合物病。检测组织内或体液中的免疫复合物水平有助于对某些疾病的诊断和估计预后。组织中免疫复合物的测定多采
临床化学检查方法介绍HBsAg免疫复合物介绍
HBsAg免疫复合物介绍: 免疫复合物是抗原-抗体反应产物,可分为两大类,及特异性免疫复合体形成的免疫复合物;非特异性免疫复合物(如在肾小球肾炎、系统性红斑狼疮中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫复合物测定对了解乙型肝炎慢性病变有一定意义。HBsAg免疫复合物正常值: HBsAg免疫复合物:阴性。(
免疫复合物(immune-complexes)的几种测定方法(1)
聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物简要原理 聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的线性分子结构的多糖,为乙二醇的聚合物,有较强的脱水作用。其沉淀循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC)的原理不太清楚,可能与CIC的分子量增
免疫复合物(immune-complexes)的几种测定方法(2)
2、C1q固相法测定免疫复合物基本原理 将待检血清加入包被有C1q的微量反应板中,待检血清中免疫复合物和C1q结合,再与酶标记抗人IgG反应,通过底物颜色的深浅判断免疫复合物的存在及含量。试剂与仪器 有成套试剂盒出售。实验步骤按试剂盒说明书进行,主要步骤如下:(1)将待检血清和参考血清(HAHG)分
原癌基因酪氨酸蛋白激酶ROS的概念和作用
原癌基因酪氨酸蛋白激酶ROS是一种在人类中由ROS1基因编码的酶。这种在多种肿瘤细胞系中高度表达的原癌基因属于酪氨酸激酶胰岛素受体基因的无七个亚家族。 由该基因编码的蛋白质是具有酪氨酸激酶活性的I型整合膜蛋白。 蛋白质可以作为生长或分化因子受体起作用。
临床化学检查方法介绍循环免疫复合物(CIC)介绍
循环免疫复合物(CIC)介绍: 抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物,免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合,沉积在血管壁,可导致组织损伤及血管炎,引起一系列的疾病,如红斑狼疮,由于免疫复合物能在循环血液中检测到,故称之为循环免疫复合物。 循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义,但对病情的
免疫复合物的诊断依据
IgA肾病是一组多病因引起的具有相同免疫病理学特征的慢性肾小球疾病。临床上约40%~45%的患者表现为肉眼或显微镜下血尿,35%~40%的患者表现为显微镜下血尿伴蛋白尿,其余表现为肾病综合征和肾功能衰竭。 IgA肾病是世界范围内一种常见的肾小球疾病,它的流行在不同洲、不同国家或在一个国家不同地
免疫复合物的形成原因
抗原进入致敏的机体可与相应的抗体结合形成复合物;但只有含IgG(IgG4除外)和IgM类抗体的复合物才能活化补体的经典途径而引起炎症。这两类抗体在血清中含量较大,是构成免疫复合物的主要抗体;可溶性抗原与相应抗体形成的较大免疫复合物活化补体的能力较强。IgG抗体为双价,可与相应的多价抗原交互结合形成较
hbsag免疫复合物的概述
免疫复合物是抗原-抗体反应产物,可分为两大类,及特异性免疫复合体形成的免疫复合物;非特异性免疫复合物(如在肾小球肾炎、系统性红斑狼疮中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫复合物测定对了解乙型肝炎慢性病变有一定意义。
免疫复合物的形成原因
抗原进入致敏的机体可与相应的抗体结合形成复合物;但只有含IgG(IgG4除外)和IgM类抗体的复合物才能活化补体的经典途径而引起炎症。这两类抗体在血清中含量较大,是构成免疫复合物的主要抗体;可溶性抗原与相应抗体形成的较大免疫复合物活化补体的能力较强。 IgG抗体为双价,可与相应的多价抗原交互结
免疫学实验HBsAg免疫复合物介绍
HBsAg免疫复合物介绍: 免疫复合物是抗原-抗体反应产物,可分为两大类,及特异性免疫复合体形成的免疫复合物;非特异性免疫复合物(如在肾小球肾炎、系统性红斑狼疮中形成等)。乙型肝炎表面抗原免疫复合物测定对了解乙型肝炎慢性病变有一定意义。 HBsAg免疫复合物正常值: HBsAg
聚乙二醇沉淀法检测循环免疫复合物
实验概要免疫复合物存在的形式有三种,一是大的免疫复合物(大于19S),可被单核巨噬细胞系统吞噬消除;二是中等大的免疫复合物(约等于19S),沉着于局部,如肾脏基底膜、皮肤基底膜、肝脏间质、血管内壁、肌肉、关节滑膜、内分泌腺等处,这些复合物可激活补体,导致组织损伤;第三类是小的免疫复合物(小于19S)
聚乙二醇沉淀法检测循环免疫复合物
实验概要免疫复合物存在的形式有三种,一是大的免疫复合物(大于19S),可被单核巨噬细胞系统吞噬消除;二是中等大的免疫复合物(约等于19S),沉着于局部,如肾脏基底膜、皮肤基底膜、肝脏间质、血管内壁、肌肉、关节滑膜、内分泌腺等处,这些复合物可激活补体,导致组织损伤;第三类是小的免疫复合物(小于19S)
原癌基因酪氨酸蛋白激酶Fyn的结构特点和生理作用
原癌基因酪氨酸蛋白激酶Fyn(p59-FYN,Slk,Syn,MGC45350,Gene ID 2534)是人类中由FYN基因编码的酶。 Fyn是Src激酶家族的59kDa成员,其通常与发育和正常细胞生理学中的T细胞和神经元信号传导相关。这些信号传导途径的破坏通常会影响多种癌症的形成。根据定义为原癌