环介导等温扩增反应(LAMP)基因诊断技术及产品简介

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。 2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Res杂志上公开了一种新的基因诊断技术,即 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),中文名为“环介导等温扩增反应”,受到了世卫组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注,短短几年,该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中,在这次甲型H1N1流感事件中,日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广,LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中......阅读全文

快速诊断离我们还有多远——LAMP技术告诉你答案

人类在征服世界的过程中,与自然界的万物进行着近乎残酷的斗争,各种各样的疾病威胁着人类的生存,从17世纪让人谈虎色变的“天花”到本世纪初危机全球的“SARS”,整个人类的生命遭遇了其他生物的挑战。再者,从个体层面上看,“HIV”、“HPV”、乙肝病毒等似乎悄然间就能夺去一个人的生命。在疾病的面前,人类

研究提出幽门螺旋杆菌的高敏高精检测方法

  近日,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员李志远团队联合南方医科大学附属东莞医院,通过环介导等温扩增(LAMP)结合最新的CRISPR/Cas12a技术,提出针对高致病性幽门螺旋杆菌菌株的高敏感度检测方法。相关研究发表于Biosensors and Bioelectronics。该论文第一作

分子诊断经验篇:如何应对等温扩增时出现的假阳性问题

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了唏嘘、质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显

等温多自配引发扩增技术简介

等温多自配引发扩增(IMSA)即isothermal multiple self-matching-initiatedamplification,是对目前核酸分子检测技术手段的改进和补充,具有简单、快速、高灵敏性高特异性的优势。IMSA最大特点就是,在等温核酸扩增过程中会产生多倍数的能自我配

仅需唾液!幽门螺旋杆菌的高敏高精检测新方法

  中国科学院广州生物医药与健康研究院李志远团队通过环介导等温扩增(LAMP)结合最新的CRISPR/ Cas12a技术,提出针对高致病性幽门螺旋杆菌菌株的高敏感度检测方法。该方法仅需检测唾液样本,就能快速精准检测出感染该菌株的阳性病人,相关研究成果近日以Harnessing enhanced CR

RPA(重组酶聚合酶扩增)技术原理及RPA与LAMP对比

英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增ZL技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://www.twistdx.co.uk)          

Science子刊:一种检测新冠病毒RNA的双色RTLAMP检测方法

  新型冠状病毒SARS-CoV-2导致2019年冠状病毒病(COVID-19),如今正在全球肆虐。基于此,人类面临着一项重大的公共卫生挑战。快速检测现有的SARS-CoV-2感染和评估病毒传播至关重要。  基于逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediat

四川非洲猪瘟综合防控技术攻关取得重要进展

  四川聚焦非洲猪瘟综合防控,依托四川大学等单位开展防控关键技术攻关,取得阶段性重要进展。一是早期诊断技术取得新突破。建立非洲猪瘟RPA快速诊断方法,研制非洲猪瘟病毒抗原高敏荧光检测试剂盒,其中,非洲猪瘟镧系荧光快速诊断检测方法及试剂盒达国际先进水平,试剂盒在四川省、国内多个省(市)和韩国推广应用,

从唾液中检测到寨卡病毒

近日,美国宾夕法尼亚大学(Upenn)的科学家们开发出了一种低成本的3D打印设备可以快速检测寨卡(Zika)病毒。 据悉这个3D打印的检测装置只有一个苏打水罐大小,成本仅2美元,而且无需用电,也不用专业技术人员操作。患者只需提供一份唾液样本。当遗传分析检测到病毒存在时,装置中可变色的燃料将

食品微生物检验新技术

  摘要:食品安全是全球面临的难题和巨大挑战,不仅影响着人们的健康与生活,还关系着社会的稳定。本文初步介绍了几种食品检测中微生物检验的新技术,希望为从事食品检验工作的人员提供帮助。   《中华人民共和国食品安全法》中定义食品安全是指食品无毒、无害,符合应当有的营养要求,对人体健康不造成任何急性、亚急

酶促重组等温扩增技术(ERA)的应用介绍

1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水

美研制出寨卡病毒快速检测工具

  《科学·转化医学》杂志近日载文称,美国科学家研制出一种快速、高灵敏且便宜的新型检测工具,不仅能直接检测到蚊子体内和人体体液中的寨卡病毒,还能区分寨卡病毒的非洲株和亚洲株,可更有效地追踪寨卡病毒的传播。  寨卡病毒是一种虫媒传播病毒,与登革热、黄热病和西尼罗河病毒同属。寨卡病毒属于单链RNA病毒,

COVID19实验室诊断方法选择和新技术展望(二)

定量RT-PCR(Quantitative Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)获得基因序列后,可以在极短的时间内,设计特异性引物,通过qRT-PCR进行检测。通常,也是临床上最早可以获得的,进行大规模人群筛查的方法。qRT

京检科院快速检测禽流感技术通过验收

  4月12日,记者从北京出入境检验检疫局获悉,由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收,技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍,新检测方法比老方法用时缩短一半,且检验成本较低,未来将在基层检疫机构和养殖场推广。   新检测方法学名为环介导等温扩增法,是集

恒温核酸扩增技术通量

  在实际的产业化中,分子诊断仪器的通量往往至关重要。对于qPCR而言,由于引物设计的成熟和荧光通道的多样性,往往可以比较好的实现高通量检测。由于恒温核酸扩增技术引物设计较为困难,单一的反应温度会造成引物和模板,引物与引物之间的非特异性链接和扩增,使得恒温扩增的检测通量受到限制。但同时也得益于反应温

基因扩增技术的条件及影响

模板核酸PCR可以以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。不过RNA的扩增首先逆转录成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸标本必须经处理后才能用于PCR的扩增,处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。采集标本方法不当,未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现假阴性。但是如果待扩

新一代CRISPR技术实现SARSCoV2高灵敏度即时检测

新冠病毒检测对于控制疾病传播、及早诊断治疗具有重要意义。荧光定量PCR由于高灵敏度和特异性成为了新冠病毒检测的金标准。由于设备昂贵、操作繁琐,荧光定量PCR技术很难用于现场即时检测。近些年来,也开发出了重组酶扩增(RPA)、环介导等温扩增(LAMP)、DNA纳米传感器等快速检测方法。然而假阳性问题制

循环介导的等温扩增早期检测苛养木杆菌等检疫性病原体

  近日,AMB Express发表的一篇文章中,研究人员开发了一种可靠、快速的诊断检测方法,用于早期检测苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)等检疫性病原体。  近年来,自然生态系统在面对非生物和生物破坏时的脆弱性越来越明显,这主要是由于气候变化的影响增加了生态系统的环境压力。随着管理

关于基因扩增技术—聚合酶链反应的扩增产物分析

  基因扩增技术—聚合酶链反应扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产

LAMP技术两小时内检测出禽流感病毒

  记者昨天从北京出入境检验检疫局获悉,由北京市检科院研发的禽流感新检验方法——LAMP快速检测技术已通过验收,技术人员在两个小时内就可以检测出禽流感病毒。据介绍,新检测方法比老方法用时缩短一半,且检验成本较低,未来将在基层检疫机构和养殖场推广。   新检测方法学名为环介导等温扩增法,是集靶核酸扩

金黄色葡萄球菌快速检测方法的研究进展

金黄色葡萄球菌属革兰氏阳性球菌,广泛分布于空气、水、土壤、饲料中,也存在于人、动物的体表、鼻咽喉及肠道,属于人兽共患病原菌。其中,金黄色葡萄球菌致病力最强,除引起皮肤组织及器官化脓炎症外,所产生的毒素污染食物,导致食物中毒。近年来,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件颇多。据美国疾控中心报道,由金黄色

LAMP原理及引物设计与实例

1.LAMP引物的设计LAMP引物的设计主要是针对靶基因的六个不同的区域,基于靶基因3' 端的F3c、F2c和Flc区以及5' 端的Bl、B2和B3区等6个不同的位点设计4种引物。FIP(Forward Inner Primer):上游内部引物,由F2区和F1C区域组成,F2区与靶基

从新冠疫情看分子诊断POCT的发展

     疾病检测技术一直处于高速发展的过程中,越来越多的手段使人类对疾病的诊断日渐精准。但是,准确率更高的检测手段通常意味着更高的成本、更长的时间、更繁复且条件苛刻的诊断流程,这使得临床往往在面对高度传染性疾病时陷入两难的境地,即大规模确诊病人的紧迫性与捉襟见肘的高端检测资源相冲突。在此次新冠疫情

等温扩增到底行不行?

最近又看到一些同行写的关于等温扩增的文章。不禁想起几年前看到的RPA技术介绍。当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像

等温扩增,存在“假阳性”的Bug?

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其

基因扩增技术de条件及影响因素

模板核酸PCR可以以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。不过RNA的扩增首先逆转录成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸标本必须经处理后才能用于PCR的扩增,处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。采集标本方法不当,未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现假阴性。但是如果待扩

酶促重组等温扩增(ERA)的原理和核心技术

酶促重组等温扩增技术(ERA技术)是一种等温核酸扩增技术,它是利用抗体制药领域先进的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技术手段,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定工具酶进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进

我国动植物检疫性疫病的分子检测技术取得显著进展

国家“863计划”现代农业技术领域在动植物检疫性疫病的分子检测技术取得突破,开发出一批适用于口岸检疫和野外诊断的快速、特异、灵敏检测技术产品,研究成果获得2007年教育部科技进步一等奖。 研制出动物水泡性疾病分子鉴别检测试剂盒,并进行了验证应用。该试剂盒适合于水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、猪水泡病病

便携式寨卡病毒快速检测技术

  一组研究人员研发出了一种便携式寨卡病毒感染诊断方法,可以在没有昂贵实验室资源的地区进行寨卡病毒检测。这种技术主要是通过自化学加热的检测杯中扩增病毒 RNA,然后利用变色染料,检测出唾液样品中的病毒,敏感度高达5 plaque forming unit(PFU,空斑形成单位),时间仅需40分钟。 

感染性疾病诊断中POCT的应用

近年来,感染性疾病的新发突发不断威胁人类健康,新型冠状病毒肺炎、中东呼吸综合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黄热病、裂谷热等传染性疾病的传播,成为全球公共卫生问题。随着城市化的发展、全球贸易往来的增加,环境改变加剧自然疫源性传染病的传播风险,感染性疾病的预防控制刻不容缓。因此,开展传染病的即时快速检测,