酶促重组等温扩增技术(ERA)的应用介绍
1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水产 、畜牧养殖和宠物中各类病原,进行早期快速检测和诊断......阅读全文
酶促重组等温扩增技术(ERA)的应用介绍
1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水
酶促重组等温扩增技术(ERA)的反应原理
1、重组酶首先与上下游引物结合,寻找同源双链DNA,一旦定位发生链交换2、同时SSB蛋白与亲本链绑定,阻止其与其脱离的模板链发生相互作用3、DNA聚合酶从上下游引物的3”端启动合成,形成两条双链DNA,如此循环重复扩增
酶促重组等温扩增(ERA)的原理和核心技术
酶促重组等温扩增技术(ERA技术)是一种等温核酸扩增技术,它是利用抗体制药领域先进的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技术手段,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定工具酶进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进
什么酶重组等温扩增技术?
通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增
核酸等温扩增技术及其应用
据微生物学家的估计,采用培养技术,仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里,以聚合酶链反应(PCR)为代表的基于核酸的检测技术发展迅速,为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑,Kary Mtlllis发明的PCR技术是20世纪80年代分子生物学领域的一项革命性突破。也许他本人当时也没有想
等温扩增技术的原理及应用
等温扩增技术(isothermal amplification technology,ITA)是近年来发展起来的基于恒温扩增的新型核酸扩增技术,主要包括环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[1]、交叉引物扩增(crossing pr
环介导等温扩增技术的原理与应用
环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因扩
环介导等温扩增技术的原理与应用
原理与应用环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因
重组酶聚合酶扩增(RPA)技术简介
核酸检测革命:可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA
LAMP(环介导等温扩增)技术
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
环介导等温扩增技术原理
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification),是一个比较公认的等温扩增方法,现如今等温扩增法很多,比如RCA,NASBA,RPA...如果可以,你可以参考这篇文献:Loop-mediated isothermal amplification inte
核酸等温扩增技术有什么
环介导等温扩增技术(LAMP)。依赖于核酸序列的扩增技术(NASBA)。滚环扩增技术(RCA)。单引物等温扩增技术(SPIA)。依赖于解旋酶的等温扩增技术(HAD)。链接代扩增技术(SDA)。快速等温检测放大技术(RIDA)。切刻内切酶核酸恒温扩增技术(NEMA)。核酸等温扩增技术,无论是在实际操作
twistDx-的重组酶聚合酶扩增(RPA)技术原理
twistDx 的重组酶聚合酶扩增(RPA)将彻底改变在资源有限的现场环境中扩增和检测核酸的能力。RPA 技术原理RPA 体系的重点是重组酶,这些酶与寡核苷酸引物形成复合体,并使引物与双链 DNA 中的同源序列配对。单链 DNA 结合(SSB)蛋白与被取代的 DNA 链结合,并使形成的 D 环保
重组酶聚合酶扩增叙述
重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链D
ERA扩增试剂盒使用条件?
标准的ERA扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT试剂盒,我们建议客户在40℃下运行反应,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。
等温多自配引发扩增技术简介
等温多自配引发扩增(IMSA)即isothermal multiple self-matching-initiatedamplification,是对目前核酸分子检测技术手段的改进和补充,具有简单、快速、高灵敏性高特异性的优势。IMSA最大特点就是,在等温核酸扩增过程中会产生多倍数的能自我配
恒温核酸扩增反应引物探针设计问题合集
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术(由英国公司开发)。以此为基础的核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全
核酸扩增—环介导的等温扩增法
2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Research(核酸研究)杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术,即环介导等温扩增技术,英文名称为“Loop-mediated isothermal amplification",受到了世卫组织、各国学者和相关政府部门的
RPA(重组酶聚合酶扩增)技术原理及RPA与LAMP对比
英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增ZL技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://www.twistdx.co.uk)
深圳先进院首创CRISPR等温扩增基因检测技术
近日,中国科学院深圳先进技术研究院博士周文华等在CRISPR等温扩增基因检测技术领域取得新进展。相关工作“A CRISPR-Cas9-triggered strand displacement amplification method for ultrasensitive DNA detecti
等温扩增技术LAMP和CPA的“孪生兄弟相”
想了很久,还是决定将LAMP和CPA放在一起进行介绍。主要是因为两者的引物设计都相对比较复杂,但却有着比较相似的工作原理,有异曲同工之妙。 背景:LAMP,loop-mediatedisothermal amplification,环介导等温扩增技术LAMP是Notomi等于2000年首先提出来的一
总结篇:一图全面总结各种等温PCR关键要素
乘着新冠的东方,PCR被广泛关注,PCR中的等温PCR由于其系统对仪器设备需求低也备受瞩目,对于医疗设施相对较差地区,甚至可以不需要仪器,只需要一个恒温水浴锅即可。等温扩增PCR发展至今已经近30年,目前市面是的等温PCR七七八八数起来也有大约15种,其中有些工作原理相似或相同,先前也逐个进行了介绍
等温扩增,存在“假阳性”的Bug?
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其
ERA扩增试剂盒应在怎样的温度下使用?
标准的ERA扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT试剂盒,我们建议客户在40℃下运行反应,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。
环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及简介
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
溶藻弧菌核酸检测的原理是什么
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)为海水中常见嗜盐性弧菌,1973年开始明确对人类致病,易污染食物,引起腹泻及创伤部位感染。溶藻弧菌可导致食物中毒,其主要症状为不同程度的头晕、乏力和腹痛、腹泻等消化道症状。也可导致肠道外感染,如经伤口感染可导致人体引起蜂窝组织炎,游泳者为中耳炎
等温扩增到底行不行?
最近又看到一些同行写的关于等温扩增的文章。不禁想起几年前看到的RPA技术介绍。当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像
DNA重组技术-酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DN
从新冠疫情看分子诊断POCT的发展
疾病检测技术一直处于高速发展的过程中,越来越多的手段使人类对疾病的诊断日渐精准。但是,准确率更高的检测手段通常意味着更高的成本、更长的时间、更繁复且条件苛刻的诊断流程,这使得临床往往在面对高度传染性疾病时陷入两难的境地,即大规模确诊病人的紧迫性与捉襟见肘的高端检测资源相冲突。在此次新冠疫情
环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。 2000年日本学者Notomi在Nucle